香菇菌丝转色过程中生理指标检测与分析

测定香菇(Lentinula edodes)菌丝长满期(30 d)和转色初期(45 d)、中期(60 d)、后期(75 d)的生理指标,分析100 mmol·L^(-1)葡萄糖对菌丝转色的影响,并运用实时荧光定量PCR技术对菌丝长满期(30 d)与转色中期(60 d)的β-葡萄糖苷酶编码基因的表达水平进行比较分析。结果表明:在实验范围内,菌丝中的多糖、葡萄糖含量,漆酶、酪氨酸酶、β-葡萄糖苷酶活性呈上升趋势;中性蛋白酶与碱性蛋白酶的活性呈下降趋势。与对照组相比,100 mmol·L^(-1)葡萄糖可以显著促进香菇菌丝转色速度;与菌丝长满期(30 d)相比,转色中期(60 d)的β-葡萄糖苷酶编码基因相对表达量显著升高(P<0.05)。

光照对香菇菌丝后熟转色过程中活性氧代谢及自噬的影响

为研究光照对香菇菌丝后熟转色过程中活性氧代谢的影响,通过设置自然光照条件与黑暗条件下香菇菌丝后熟转色对比试验,分析其活性氧含量、丙二醛(MDA)含量、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性、抗氧化酶活性及自噬的差异。结果表明,自然光照条件下香菇菌丝正常后熟转色,黑暗条件下香菇菌丝不转色。自然光照条件下香菇菌丝活性氧含量、MDA含量、NADPH氧化酶活性、过氧化氢酶(CAT)活性、过氧化物酶(POD)活性均显著高于黑暗条件,超氧化物歧化酶(SOD)活性变化则与之相反。同时,香菇菌丝细胞自噬的透射电镜分析及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对自噬基因Atg8的表达水平分析结果表明,在自然光照条件下香菇菌丝细胞的自噬特征明显。本研究结果为优化香菇栽培的环境条件提供了一定的理论依据,也为后续对光照环境下香菇体内氧化平衡的作用机理研究提供了有效参考。

食用菌液体菌种的制备及应用研究概况

食用菌产业是支撑我国绿色食品的主力军,菌种制备技术在食用菌产业发展中举足轻重。多方面多角度阐述我国目前常用的食用菌液体菌种制备技术以及食用菌液体菌种应用研究现状,并对食用菌液体菌种的发展趋势进行展望,以期更好地推动液体菌种应用,促进我国食用菌产业的发展。

香菇菌丝后熟转色形成的活性氧作用与自噬特征

为了解活性氧(reactive oxygen species,ROS)在香菇菌丝后熟转色形成中的作用及其自噬细胞学特征,以香菇工厂化菌株KS11为研究材料,分析其在菌丝后熟转色过程中4个时间点(30、45、60、75 d)的活性氧含量(ROS)、丙二醛(MDA)含量、NADPH氧化酶浓度、抗氧化酶活性以及外源活性氧和DPI对其影响的表型试验,利用透射电镜观察该过程菌丝细胞自噬特征变化,并运用实时荧光定量PCR对自噬基因Atg8的表达水平进行比较分析。结果表明:(1)H_(2)O_(2)作为主要的活性氧因子在菌丝后熟转色形成中呈现显著动态变化,后熟转色过程中不断升高,并在转色中第60天呈高峰值。(2)NADPH氧化酶浓度与H_(2)O_(2)含量变化呈紧密正相关。(3)外源施加一定浓度H_(2)O_(2)显著促进香菇菌丝后熟转色,且DPI作为NADPH氧化酶抑制剂显著抑制了香菇菌丝后熟转色的发生。(4)香菇菌丝后熟转色过程中,细胞自噬特征逐渐增强,并在转色中后期最显著。上述结果表明以H_(2)O_(2)为主的活性氧在香菇菌丝后熟转色过程中起重要作用,并且可能参与了香菇菌丝后熟转色过程中的自噬进程。

香菇菌丝后熟转色的转录组分析

香菇是世界第二大栽培食用菌,其菌丝后熟转色是其特有的栽培过程,并对其产量和品质至关重要。为了进一步了解香菇后熟转色形成的机制,本研究利用Illumina二代高通量测序平台,对初始未转色菌丝(LE118)、光照下转色菌丝(LE313C)、黑暗下未转色菌丝(LE313W)进行转录组测序,以香菇单核体W1-26基因组为参考基因组进行转录组有参分析,共鉴定出2215个差异表达基因,LE313C比LE118、LE313C比LE313W、LE313W比LE118中分别有1216、1507、1054个基因差异表达。GO富集分析表明,差异表达基因显著富集碳水化合物代谢过程、氧化还原酶活性、水解酶活性、过氧化物酶活性等。KEGG分析发现芳香族化合物的降解在LE313C比LE313W中被显著富集。在LE313C比LE118即香菇菌丝后熟转色发育过程中,筛选出关键差异表达基因包括糖苷酶、疏水蛋白、P450、漆酶、谷氨酸脱氢酶等,表明这些差异基因在香菇菌丝的后熟转色中可能行使重要的生物功能。本研究为进一步研究香菇菌丝后熟及转色形成的机理提供了重要依据。