EB病毒DNA定量检测在鼻咽癌临床分期中的诊断价值

目的探讨EB病毒(EBV)DNA定量检测在鼻咽癌患者不同临床分期中的诊断价值。方法选取广东省汕头大学医学院附属粤北人民医院2013年3月至2015年12月500例病理诊断为鼻咽癌的患者作为研究组,同时选取200例健康体检人群作为对照组。2组同时采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法检测血浆EBV-DNA的表达量,并对2组之间及临床TNM分期I、Ⅱ与Ⅲ、Ⅳ的结果进行比较;再将其分别与酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测的血清EBV病毒壳抗原免疫球蛋白A(VCA-IgA)检测结果进行比较。结果荧光定量PCR方法检测EBV-DNA表达量中,研究组阳性率75.00%,对照组阳性率9.00%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。鼻咽癌患者血浆EBV-DNA拷贝数与临床TNM分期呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);鼻咽癌分期越晚,血浆EBV-DNA拷贝数越高。结论血浆EBV-DNA水平与鼻咽癌患者临床TNM分期有显著相关性,可作为评估鼻咽癌患者临床分期的1种辅助性分子生物指标,具有较高应用价值。

肿瘤型M2-PK、APC、K-ras检测在结直肠癌诊断中的意义

目的检测结直肠癌患者粪便和血清的M2型丙酮酸激酶(M2-PK)、APC、K-ras水平,并分析M2-PK、APC、K-ras的水平与结直肠癌病理T分期的关系。方法将2015年1-10月在该院手术治疗的结直肠癌患者200例纳入该研究作为患者组,另外选取健康体检者100例作为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测结直肠癌患者血清和粪便的M2-PK、APC、Ras水平,并结合患者的病理资料对M2-PK、APC、K-ras的水平与结直肠癌病理T分期的关系进行分析。结果结直肠癌患者血清和粪便的M2-PK、APC、K-ras的表达水平分别高于对照组(P<0.05)。M2-PK、APC、K-ras的表达与结直肠癌的病理T分期有密切关系,且临床病理T分期较晚的患者M2-PK、APC、K-ras的表达水平更高(P<0.05)。结论结直肠癌患者血清和粪便的M2-PK、APC、K-ras水平较高且与肿瘤的临床病理T分期有关。M2-PK、APC、K-ras可作为早期诊断结直肠癌的分子标志物。

结肠癌患者粪便BRAF表达及临床意义

目的:研究鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因蛋白在结肠癌患者粪便中的表达及其与临床病理因素的关系。方法:随机选取汕头大学医学院附属粤北人民医院2015年5月至2016年5月的100例结肠癌患者、100例结直肠高危腺瘤患者和100例正常体检人群,进行粪便中BRAF蛋白的表达对照比较,同时分别进行常规肿瘤消化道相关标志物癌胚抗原(CEA),糖类抗原-199(CA-199),糖类抗原-724(CA-724)比较,采用免疫组织化学技术检测,并对其与临床病理因素的关系进行相关性分析。结果:BRAF蛋白在在结肠癌组、高危患者组和正常对照组粪便中的阳性表达率进行比较,差异具有统计学意义(P<0.05);与常规肿瘤消化道相关标志物CEA,CA-199,CA-724进行比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:BRAF蛋白的高表达与结肠癌的发生发展密切相关,对其进行检测可能会比较好的协助结肠癌的早期临床诊断。

实时荧光定量PCR技术的优化及其在恙虫病东方体诊断中的应用

目的建立一种优化的实时荧光定量PCR技术,并用于诊断粤北山区恙虫病东方体(Ot)基因型。方法采用优化实时荧光定量PCR技术对感染Ot的患者和鼠类的血液和组织标本检测Ot DNA载量并分析其基因型,并与未优化实时荧光定量PCR和巢式PCR的检测结果进行比较。结果采用优化实时荧光定量PCR技术检测660例发热患者,有224例检测到Ot,其中108例是发热5d内的早期患恙虫病患者,以及在55份鼠类的标本中有12份能检测到感染Ot,均为Gilliam型;未优化实时荧光定量PCR在患病7d以上才能检测到Ot。同时,在鼠类基因扩增片段还显示出与Gilliam、Karp、Kato3株国际参考株不同,经巢式PCR分型证实为Kawasaki型,与巢式PCR基因分型的结果相符。结论优化实时荧光定量PCR技术可作为早期诊断恙虫病的实验方法,用于快速分析Ot基因型,适合在基层医院推广应用。

直接免疫荧光法快速检测甲型流感病毒抗原的临床意义

目的探讨直接免疫荧光法快速检测早期甲型流感病毒抗原及其临床应用。方法选择临床上诊断为急性呼吸道感染入院的患者,采集标本200例,将其分为两组:冬春两季流行季节儿童组(100例)和夏秋两季非流感流行期间儿童组(100例),使用美国D3Ultra甲型流感病毒抗原检测试剂,采用荧光标记的单克隆抗体对感冒患者进行甲型流感病毒抗原检测。结果在冬春两季流感流行期间,100例儿童检测有8例阳性,阳性率为8%;在夏秋两季非流感流行期间100例儿童检测有2例阳性,阳性率为2%;两组阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论运用直接免疫荧光法快速检测甲型流感毒感抗原是一种经济、高效、快速、特异的检测方法,能指导临床快速诊断,合理用药。

甲状腺毒症患者单个核细胞Foxp3检测分析

目的:检测分析弥漫性毒性甲状腺肿(Graves病)和亚急性甲状腺炎患者单个核细胞叉头状/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)阳性率和血浆甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)浓度变化。方法:采用流式细胞分析技术分别检测32例Graves病患者(Graves病组)、27例亚急性甲状腺炎患者(亚甲炎组)及30例健康对照者(对照组)外周血单个核细胞Foxp3阳性率;化学发光法测定血浆TGAb、TPOAb水平,比较组间各指标的差异,并分析Graves病患者单个核细胞Foxp3阳性率与血浆TGAb、TPOAb水平的相关性。结果:Graves病组单个核细胞Foxp3阳性率显著低于对照组和亚甲炎组,差异有统计学意义(P<0.05),Graves病组TGAb、TPOAb水平均明显高于对照组和亚甲炎组,差异亦有统计学意义(P<0.05);Graves病患者单个核细胞Foxp3阳性率与血浆TGAb和TPOAb水平均呈负相关(r=-0.70、-0.63,P<0.05)。结论:Foxp3、TGAb、TPOAb检测可为Graves病与亚急性甲状腺炎的诊断和鉴别诊断提供实验室依据。

某地区东方立克次体基因型和遗传特征研究

目的探讨某地区东方立克次体流行株的基因型和遗传特征。方法采用荧光定量PCR技术对该地区东方立克次体感染患者和鼠类标本Sta56蛋白编码基因片段检测,对阳性标本进行基因分型和测序,并与巢式PCR分型结果相比较;对测序结果与GenBank东方立克次体参考序列进行同源性分析。结果东方立克次体感染患者和鼠类标本中可扩增出Gilliam型523bp目的基因片段,与Kawasaki型相似,同源性为96.3%;鼠类标本中还可扩增出318bp目的基因片段,与TA686型相似,同源性为78.5%。东方立克次体感染患者外周血中东方立克次体核苷酸序列与鼠标本的同源性为100.0%。结论粤北山区东方立克次体至少存在Gilliam型和Kawasaki型相似株,鼠类中存在TA686型相似株。粤北山区人、鼠均存在东方立克次体自然感染,已成为恙虫病自然疫源地。