用牛αS1-酪蛋白基因构建乳腺生物反应器表达载体的研究

牛αS1-酪蛋白基因是制备乳腺生物反应器常用的表达载体,可以指导外源基因在动物乳腺中高水平表达。对牛αS1-酪蛋白基因的结构、表达载体的各种调控元件及其研究应用进展等方面作一综述。

中国黑白花奶牛干扰素-τ成熟蛋白基因的克隆与序列分析及牛干扰素-τ的分类

通过PCR克隆测序首次测定了黑白花奶牛干扰素-τ成熟蛋白的完整基因序列（GenBank登录号：DQ680846、DQ680847）,其CDS长度为519 bp,编码含有172个氨基酸的牛干扰素-τ成熟蛋白。对所有牛干扰素-τ序列进行聚类分析,可将其聚为4类,发现了一类新的牛干扰素-τ（τ4）和6种新亚型（τ1e、τ3f、τ3g、τ3h、τ4a、τ4b）。DQ680846属于τ4类的一种亚型,标记为τ4a;DQ680847属于τ3类的一种亚型,标记为τ3f。各牛干扰素-τ基因核苷酸序列间的同源性在92.7%-99.8%之间,推导氨基酸序列间的同源性在88.5%-99.4%之间;τ4a、τ3f与其他牛干扰素-τ基因核苷酸序列间的同源性分别在94.0%-97.1%、92.9%-99.6%之间,推导氨基酸序列间的同源性分别在91.4%-96.0%、88.5%-99.4%之间。这一结果反应了牛干扰素-τ基因在进化过程中的高度保守性。二级结构预测发现牛干扰素-τ成熟蛋白是以5个α-螺旋（A-E螺旋）为基础构成的。Asn78、Cys1、Cys29、Cys99、Cys139I、le143、Lys160和C-末端的11个氨基酸为高度保守区,它们是维持牛干扰素-τ的结构和功能所必需的。

阿托伐他汀强化降脂对急性脑梗死患者的疗效及血脂和血清炎性因子水平影响

目的:探讨阿托伐他汀强化降脂对急性脑梗死患者血脂和血清炎性因子水平的影响及其疗效。方法:94例急性脑梗死患者随机分为强化组(47例)和普通组(47例)。两组患者均予降颅内压脱水、控制血压和血糖、抗血小板聚集、神经保护等基础治疗。普通组同时口服阿托伐他汀钙片20 mg,qd;强化组同时口服阿托伐他汀钙片40 mg,qd,两组均连用8周。比较两组患者治疗前后血脂,血清炎性因子hs-CRP、TNF-α和IL-10水平及临床疗效。结果:治疗8周后,两组TC、TG和LDL-C水平均较前不同程度下降,HDL-C水平均较前不同程度上升(P<0.05或P<0.01),且强化组变化幅度较普通组更明显(P<0.05);两组血清hs-CRP和TNF-α水平较治疗前均不同程度下降,血清IL-10水平较治疗前均不同程度上升(P<0.05或P<0.01),且强化组变化幅度较普通组更明显(P<0.05)。强化组临床总有效率为95.74%,明显优于普通组的80.85%(P<0.05)。两组药品不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阿托伐他汀强化降脂治疗急性脑梗死疗效显著,安全性较好,能显著降低血脂水平,降低血清hs-CRP和TNF-α水平,升高血清IL-10水平,抑制局部炎性反应。

双歧杆菌四联活菌片对重症脑卒中患者营养状况及免疫指标的影响

目的观察双歧杆菌四联活菌片联合肠内营养对重症脑卒中患者营养状况及免疫指标的影响。方法 76例重症脑卒中患者,随机分为观察组与对照组各38例。两组均予早期留置胃管鼻饲行肠内营养治疗;观察组加用双歧杆菌四联活菌片1.5g研磨水化后自胃管注入,每日3次。治疗2周后比较两组治疗前后营养状况、格拉斯哥昏迷(GCS)评分及免疫指标的变化情况。结果两组总蛋白、白蛋白水平,淋巴细胞计数,免疫球蛋白Ig G、Ig A和Ig M水平均较前明显下降,但观察组上述指标均高于对照组,差异有统计学意义;治疗后GCS评分观察组略高于对照组,但差异无统计学意义。结论双歧杆菌四联活菌片联合肠内营养治疗重症脑卒中,可明显改善患者营养状况,减缓恶化,提高GCS评分,可减缓LYM和免疫球蛋白下降幅度,改善免疫功能。

氧化应激与帕金森老年患者运动功能的关系

目的探究氧化应激对帕金森老年患者运动功能的影响。方法选取50例帕金森患者(实验组)、50例身体健康者(对照组),检测Hoehn-Yahr(H-Y)不同分级患者和对照组血清微量元素以及血浆内与氧化应激相关的指标含量,包括丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH),观察实验组中患者的上述指标与其所处HY分级之间的关系。结果对照组血清内铜、锌的平均含量高于实验组,铅含量低于实验组;血浆内MDA平均含量低于实验组,SOD与GSH高于实验组;上述差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组患者中,H-Y1级8例,H-Y2级13例,H-Y3级17例,H-Y≥4级12例;患者所处Hoehn-Yahr分级与其血浆内MAD含量呈显著正相关,与SOD、GSH含量呈显著负相关(P<0.05)。结论随着疾病发展,帕金森病症患者机体的抗氧化应激能力越来越差,运动障碍越严重。

阿托伐他汀强化降脂对急性脑梗死内皮功能的影响

目的观察阿托伐他汀强化降脂对急性脑梗死患者内皮功能指标血清血栓调节蛋白(TM)与血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)水平的影响。方法 94例急性脑梗死患者,按随机数字表法分为强化组与普通组各47例。两组均予普通组口服阿托伐他汀钙片20mg,每日1次;强化组口服阿托伐他汀钙片40mg,每日1次,两组均连用8周。结果治疗后两组血清TM和VE-cadherin水平均有明显下降,但强化组低于普通组,总有效率95.7%明显高于普通组的80.9%;组间差异均有统计学意义。结论阿托伐他汀强化降脂治疗急性脑梗死效果显著,安全性好,并能保护与修复血管内皮功能。

叶酸、维生素B_(12)对急性脑梗死的疗效分析

目的观察叶酸和维生素B_(12)治疗急性脑梗死的疗效。方法根据随机数字法将120例急性脑梗死患者分为观察组和对照组,各60例。对照组给予常规治疗;观察组在对照组基础上给予叶酸和和维生素B_(12)口服。另选60例健康体检者作为正常对照组。比较患者肱动脉血流介导的舒张功能(FMD)、颈动脉内膜中膜厚度(IMT)、血清同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮(NO)、内皮型NO合成酶(eNOS)、卒中量表(NIHSS)及Barthel指数(BI)等。结果与正常对照组相比,急性脑梗死患者FMD及血清NO、eNOS水平均明显降低,而IMT、Hcy水平明显增高(均P<0.05)。与对照组相比,在治疗2周和12周时,观察组血清NO、eNOS、BI评分均明显增高,NIHSS评分降低(均P<0.05)。结论急性脑梗死患者的FMD、血清NO、eNOS降低,而IMT、Hcy增高。叶酸联合维生素B_(12)可有效升高急性脑梗死患者的NO、eNOS水平,改善脑血管内皮功能、神经功能缺损,提高患者的日常生活能力。

牛干扰素-τ在大肠杆菌中的融合表达和鉴定

牛干扰素-τ(bIFN-τ)是胚胎妊娠识别物质,通过体外重组表达bIFN-τ蛋白用于妊娠识别机理研究和胚胎工程应用具有重要意义。本研究的目的是利用大肠杆菌作进行bIFN-τ蛋白的体外重组表达和鉴定。通过PCR方法扩增得到牛干扰素-τ(bIFN-τ)基因,克隆到pMD18-T载体中。经BamHⅠ和NdeⅠ双酶切回收后连接到原核表达载体pET-28a(+)中,构建了表达质粒(pET-28a-bIFN-τ),然后将其转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。结果表明:bIFN-τ基因序列插入方向和读码框在pET-28a-bIFN-τ中正确;表达产物分析表明其在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了融合表达,表达量占菌体总蛋白的20.68%。优化后的表达条件可使其表达量达到28.84%。重组蛋白主要以包涵体形式存在,经纯化和鉴定,表明表达产物为bIFN-τ蛋白。

绝经后脑梗死患者雌激素水平与血小板活化及聚集功能的相关性研究

目的观察绝经后脑梗死患者雌激素指标雌二醇(E2)水平与血小板活化及聚集功能的相关性,探讨雌激素与脑梗死的关联性。方法选取2018年1月-2019年1月该院收治的79例绝经后脑梗死患者为研究对象(脑梗死组),另选取78例绝经后健康对照者作为对照组,均空腹抽取静脉血,检测两组血清E2、血小板活化、血小板聚集、纤维蛋白原(FIB)、凝血功能等指标变化情况。对两组存在差异指标进行Logistic回归分析,并观察绝经后脑梗死患者E2水平与血小板活化及聚集之间的相关性。结果脑梗死组患者E2、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血小板聚集时间显著低于对照组,而FIB、凝血酶时间(TT)、血小板聚集率、血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P)、P选择素、血小板Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂(GPⅡb/Ⅲa)则显著高于对照组,两组以上指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),而总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。Logistic回归分析以脑梗死为因变量,分析显示血小板聚集率、CD62P、P选择素、GPⅡb/Ⅲa、E2、血小板聚集时间是独立危险因素(P<0.05),而和高血脂症、TT、FIB无关(P>0.05)。脑梗死患者雌激素浓度和血小板聚集率、CD62P、P选择素、GPⅡb/Ⅲa存在负相关(均P<0.05),和血小板聚集时间存在正相关(r=5.256,P=0.000),而与FIB无关(r=0.144,P=0.076)。结论绝经后脑梗死患者存在雌激素紊乱,雌激素能调节血小板活化与聚集,升高雌激素水平能通过血流动力学发挥保护心脑血管作用。