克氏肺炎杆菌AS1.1736菌株培养条件研究

克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella)AS1.1736具有较高的1,3-丙二醇转化率及底物浓度耐受性。从培养环境、培养时间及培养温度等因素对发酵的影响方面研究了克氏AS1.1736菌株的产菌量培养条件,结果表明,克氏肺炎杆菌AS1.1736菌株在32℃好氧环境下培养18 h可获得较高的产菌量。

基于创新体制下农业高校科研创新团队的构建

知识经济时代到来,全球更趋于信息化、科技化,而吸引高科技人才,不断地进行科技创新已成为每一个国家发展的关键因素。它更需要集体的智慧和劳动,这种跨学科、跨领域的密切合作,更有利于科学的新发现和技术的进步。因此,如何加强高校科研团队的建设与管理,以不断增强高校的科研实力,已成为我国高校面临的重大课题。

甘油脱水酶结构基因(gldABC)克隆及序列分析

以肺炎克雷伯氏菌As1.1736的基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到了目的基因(gldABC)并将该基因克隆到pMD19-TSimple载体。通过对该基因的序列分析,甘油脱水酶(gldABC)结构基因的全长为2816bp,由三个独立的开放阅读框架组成,三个独立的读码框分别由1668、585、426bp组成,分别编码556、195、142个氨基酸。通过BLAST同源性分析,该基因与GenBank中已发表的gldABC基因(U60992)的核苷酸序列同源性为99.39%。氨基酸的同源性为100%。

乳糖酸高产菌株的选育及发酵条件的初步研究

从土壤中分离出了一株乳糖酸生产菌株,经鉴定为洋葱假单胞菌。采用NTG诱变,选育出了乳糖酸高产菌株NTG-15-03,并对其发酵条件进行了初步的研究。结果表明:以乳糖10.0%,玉米水解液1.0%,NaCl 0.05%,K_2HPO_40.1%,KH_2PO_4 0.1%,硫酸镁0.05%,pH7.0为培养基,该菌株的乳糖酸产量为92.1g/L。

甘油脱水酶基因(gldABC)与1,3-丙二醇氧化还原酶基因(dhaT)的共表达

将dhaT基因片段以顺反子的形式插入到重组质粒pMD19TS2中gldABC基因的下游,形成重组克隆质粒pMD19TS3,进而将gldABC与dhaT基因以多顺反子的形式亚克隆至pET-28a(+)表达载体上。终浓度为1mmol/L IPTG诱导重组大肠杆菌E.coli/pET-28a(+)/gldABC-dhaT 2h,SDS-PAGE电泳分析结果表明分别在甘油脱水酶三个亚基分子量相对应的61ku、21ku、16ku和1,3-丙二醇氧化还原酶亚基分子量相对应的42 ku的位置上出现了特异性条带。上清液中酶活性分别为甘油脱水酶23.7U/mL,1,3-丙二醇氧化还原酶30.4 U/mL。

辽宁省社会主义新农村建设公共服务信息化发展战略研究

21世纪是一个充满机遇和挑战的信息时代,信息化在我国国民经济和社会发展中的战略地位不断提升。农业信息化是国家信息化的重要组成部分,是我国创建现代化农业体系的重要环节。以辽宁省农村公共服务信息化为研究对象,参照国内外农业信息化建设的先进思想,结合多年实践,提出了辽宁社会主义新农村建设公共服务信息化建设的指导思想、工作思路、总体规划和实施内容等观点,形成了辽宁省农村公共服务信息化的理论体系。

甘油脱氢酶基因(dhaD)与二羟丙酮激酶基因(dhaKL)共表达

以肺炎克雷伯氏菌As1.1736的基因组为模板,通过PCR技术成功地扩增了dhaD基因,并构建了dhaD和dhaKL基因的共表达载体。序列分析结果表明:dhaD基因全长1104bp,编码367个氨基酸残基。SDS-PAGE电泳结果表明:dhaD和dhaKL基因均获得了有效表达;上清液中酶活性分别为甘油脱氢酶23.2U/ml,二羟丙酮激酶25.6U/ml。

dhaT基因克隆及其与gldABC基因串联表达载体的构建

以肺炎克雷伯氏菌As1.1736的基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到了目的基因(dhaT)并将该基因克隆至pMD19-T Simple载体。基因的序列分析表明,dhaT基因全长为1164bp,编码387个氨基酸。将含有自身核糖体结合位点的dhaT基因片段插入到pMD19-T Simple/gldABC质粒的gldABC基因下游,形成重组克隆质粒pMD19-T Simple/gldABC-dhaT,并进一步将gldABC与dhaT串联基因亚克隆到表达载体pET28a(+)上。

gldABC基因与dhaT基因串联表达载体的构建

以肺炎克雷伯氏菌As1.1736的基因组DNA为模板,通过基因扩增仪(PCR)扩增得到了目的基因(gldABC)并将该基因克隆到pMD19-TSimple载体。通过对该基因的序列分析,甘油脱水酶(gldABC)结构基因的全长为2816bp。将限制性内切酶处理后的含有自身核糖体结合位点的dhaT基因插入到质粒pMD19-T Simple/gldABC中gldABC基因的下游,形成重组克隆质粒pMD19-T Simple/gldABC-dhaT,并进一步将gldABC与dhaT串联基因亚克隆到表达载体pET28a(+)上。

肺炎克雷伯氏杆菌二羟丙酮激酶基因(dhaKL)克隆与表达

以肺炎克雷伯氏菌As1.1736的基因组为模板,通过PCR技术成功地扩增了dhaKL基因,并构建了pET-28a(+)/dhaKL表达载体。DNA序列分析的结果表明:dhaKL基因由2个开放阅读框架组成:ORF1全长为1017bp,编码356个氨基酸;ORF2全长633bp,编码210个氨基酸。SDS-PAGE电泳结果表明:dhaKL基因获得了有效表达,上清液中的酶活性为15.6U/mL。

1,3-丙二醇氧化还原酶基因的克隆与序列分析

以肺炎克雷伯氏菌的基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到了目的基因dhaT,并将该基因克隆到pMD19-TSimple载体。基因序列分析表明,dhaT基因全长为1158bp,与GenBank上已发表基因序列的同源性达99%,氨基酸同源性为100%。

农业高校如何做好国家自然科学基金的依托单位

农业高校作为国家自然科学基金的依托单位,应对基金项目的实施进行全程跟踪管理,经费要做到合理合规、专款专用;制定促成果转化的政策,建立成果转化渠道;做好国家自然科学基金档案管理工作;加强管理队伍建设等。这样才能较好地管理国家自然科学基金项目。

农业高校为新农村建设提供科技支撑探析

新农村建设是中国特色社会主义事业全面推进的关键。为了更好地发挥农业高校在新农村建设中的科技支撑作用,农业高校应加大对基础研究的支持力度、做好团队建设、建立科技创新的激励机制。为加强科技成果的转化力度,应建立健全科研体制、搭建产学研合作平台、加大科技成果转化资金的投入。

以高质量党建引领高等农业院校强农兴农实践——以沈阳农业大学“强农兴农模式”为例

高质量党建是事业发展的保障和推动力,高等农业院校的高质量党建为强农兴农提供坚强的政治保证,不仅引领强农兴农的正确方向,而且为“三农”事业注入强大动力,极大地促进科技成果的有效转化。文章以沈阳农业大学为例,阐明沈阳农业大学党委坚持围绕发展抓党建、抓好党建促发展的实践逻辑,梳理多年来在农业人才培养、农业科技创新和服务地方经济发展等服务“三农”工作方面的宝贵经验,提出了高质量党建引领强农兴农实践的政府+校地合作模式、基地+示范推广模式、企业+协同创新模式、项目+科研攻关模式、市场+品牌牵引模式等五种“强农兴农模式”,在推动高等农业院校高质量党建与服务“三农”事业深度融合上做了有益的探索与实践。

辽宁省2006—2016年基础研究竞争力发展态势研究——基于国家自然科学基金面上项目的分析

国家自然科学基金是我国目前为止最公正、最规范、最能体现基础研究竞争力的重要指标。面上项目是NSFC最重要的资助类型,通过对我国31个省市自治区2006—2016年期间获得国家自然科学基金面上项目资助的相关数据进行深入的计算分析和统计,得到相应的数据结果和竞争指标。结果表明:我国各省市间基础研究竞争力差距大;辽宁省基础研究处于提升阶段,但是竞争能力日趋变弱。