人呼吸道禽流感病毒受体的分布趋势(英文)

禽类流感病毒和人类流感病毒具有很强的受体识别特异性,分别与唾液酸α-2,3Gal和α-2,6Gal受体分子结合而感染各自的宿主细胞.这种受体结合特异性是流感病毒在禽类和人类之间跨种属传递的主要障碍.应用凝集素组织化学染色技术,探讨人呼吸道各解剖学部位流感病毒唾液酸受体的分布特征.结果显示,唾液酸α-2,3Gal受体,即禽类流感受体,主要分布在下呼吸道的呼吸部即呼吸细支气管和肺泡,而在主气管、支气管和细支气管仅少量分布.相反,人类流感病毒受体,唾液酸α-2,6Gal受体在气管、支气管呈高密度分布,随着支气管分级逐渐降低分布减少,至肺泡分布最少.但比较人呼吸道发育成熟过程中,唾液酸α-2,3Gal和α-2,6Gal受体的表达,未发现明显差别.禽流感H5N1病毒体外感染人呼吸道组织试验结果表明,肺泡上皮较支气管和气管上皮易感染,与唾液酸α-2,3Gal受体分布特点相符合.结果提示,人呼吸道可被禽流感病毒感染,目前H5N1病毒极少发生人传人的特点,可能与个体间上呼吸道唾液酸α-2,3Gal受体表达差异有关.

高致病性H5亚型禽流行性感冒病毒血凝素单克隆抗体的制备与初步应用

以禽流感病毒株Ck/HK/Yu22/02(H5N1)作为免疫原,利用常规杂交瘤技术和血凝抑制试验法成功地筛选出6株稳定分泌抗高致病性H5亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体(单抗),分别命名为2F2、3C8、3FC1、7C6、10HD4和13G4。经血凝抑制试验法分析,结果发现这6株单抗具有特异性高、反应性强、识别谱宽且互补等特点。基于单抗2F2,初步建立了三种H5N1病毒诊断方法,经评估证实均具有很好的特异性。由此说明,研究制备的抗H5亚型禽流感病毒血凝素单抗可适用于H5N1病毒的诊断。

一种新型H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂的建立

利用5株广谱特异性抗H5亚型血凝素单克隆抗体和酶联免疫渗滤技术成功地建立了一种适于现场检测H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的抗原快速检测试剂H5-HA(Ag)Dot-ELISA。该试剂对41株代表当前亚洲地区流行的各种遗传变异亚系H5N1禽流感病毒检测均为阳性,对多数毒株的分析灵敏度优于0.1个血凝滴度(HA titer),其中部分优于0.01个血凝滴度;比较该试剂与早期开发的同类ELISA试剂,发现前者对后者未能检出的H5N1新变异株检测均为阳性;利用该试剂和商品化Directigen Flu A(BD)试剂检测两株H5N1病毒株,提示前者灵敏度高于后者;该试剂对一株H5N1病毒的检测灵敏度与标准RT-PCR相当;该试剂对24株非H5亚型病毒检测均为阴性,显示出良好特异性。以上结果提示,此研究建立的H5N1病毒抗原快速检测试剂在H5禽流感现场检测上具有较好的应用前景。

H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂对不同现场标本的检测比较

利用H5亚型禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂“H5-HA（Ag）Dot-ELISA（H5-Dot）”对来自陆禽、水禽的484份气管拭子、泄殖腔拭子和粪便拭子标本进行检测，结果：①不同采集方式的H5N1阳性标本的检出率高低有别，气管拭子的检出率最高，泄殖腔拭子次之，粪便拭子最低（P〈0．05），因此建议现场采样时应尽可能采集气管拭子标本；②陆禽标本检出率显著高于水禽标本（P〈0．05），对病毒培养阳性的陆禽气管拭子检出率达80％（95％CI：70．6％～87．8％），对水禽气管拭子标本的检出率为38％（95％CI：26．9％～49．4％），可能与标本中病毒滴度高低有关；③有症状与无症状陆禽标本的检出率无显著差异。另外，H5-Dot试剂对333份非H5病毒气管拭子标本的特异性为99．4％（95％CI：97．9％～99．9％）。这些结果表明，H5-Dot是一种较为可靠的H5亚型禽流感病毒早期快速检测方法，在缺乏仪器设施和高素质专业技术人员的H5N1禽流感病毒防控第一线具有重要推广价值。

高致病性禽流感病毒H5N1中和抗体的单链抗体构建与活性鉴定

在本实验室研制出的多株针对H5N1血凝素的鼠单抗中,10F7对34株H5N1病毒株都有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强、识别谱广的特点。通过基因工程构建10F7单链抗体(scFv)表达重组质粒,在大肠杆菌中表达并纯化scFv,经血凝抑制实验及中和实验检测其活性。结果在针对3株病毒的血凝抑制实验中,10F7scFv蛋白对其中2株H5N1病毒均显示出结合活性,而对H9毒株没有反应。在针对7株H5N1病毒的中和实验中,10F7scFv对5株病毒具有较好的中和能力。H5N1广谱中和抗体10F7的单链抗体构建,为进一步研制针对H5N1禽流感病毒的治疗性抗体奠定了基础。

一株抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的广谱中和活性

以H5N1禽流感病毒株Ck／HK／Yu22／02作为抗原，应用常规杂交瘤技术和血凝抑制实验筛选出抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的单抗8H5，单抗8H5经免疫荧光鉴定具有很好的H5特异性。选择33株2002～2006年不同地域，不同宿主中分离的不同遗传变异亚系的H5N1病毒代表株，对单抗8H5分别进行血凝抑制实验及中和试验分析，结果显示单抗8H5对所有H5亚型病毒均有较强反应，而对非H5亚型标准病毒株均不反应，说明8H5是一株广谱性抗H5特异性中和单抗，并提示单抗8H5的HA识别表位可能是一个相当保守的中和表位。并且单抗8H5双抗夹心系统的初步评价显示了其在诊断应用上的前景。

深圳东门市场野生动物SARS病毒的监测

目的 对深圳东门市场野生动物标本中SARS病毒进行监测 ,了解动物携带SARS病毒的情况。方法 对 2 0 0 3年 5月 7日至 12月在东门市场采集的果子狸、貉、鼬獾、猪獾和狗獾等 5种动物标本 ,进行病毒分离鉴定及RT -PCR和SARS荧光定量PCR检测。结果 5月首先从 4份果子狸和 1份貉标本中分离到SARS病毒。 5月至 12月的 12 1份动物标本中共有 5 5份SARS病毒阳性标本 ,阳性率为 4 5 4 5 %。 5月份、10月份、11月份和 12月份野生动物标本中SARS阳性率分别为 5 0 %、83 33%、34 78%和 4 4 87% ,其中 ,果子狸的SARS病毒携带率为 90 %。结论 东门市场售卖的果子狸可能是携带SARS病毒的重要载体之一 ,在SARS的传播中可能起着重要的作用。

免疫荧光法检测非典型肺炎患者血清抗冠状病毒抗体

目的 :检测非典型肺炎患者血清中抗冠状病毒抗体及其滴度变化 ,协助临床确诊非典型肺炎。方法 :间接免疫荧光法检测患者体内急性期和恢复期血清中的抗冠状病毒抗体。结果 :3例临床诊断非典型肺炎患者血清内有特异性抗冠状病毒抗体 ,且恢复期抗体滴度比急性期的滴度增高 4倍以上。结论 :用具有高度特异性的免疫荧光技术对怀疑感染非典型肺炎的患者进行血清学检测 。

冠状病毒感染细胞抗原片法检测SARS患者血清中特异性抗体

目的 :检测SARS患者血清中特异性抗冠状病毒抗体及其滴度变化 ,协助临床确诊SARS。方法 :用本次爆发SARS患者鼻腔抽吸液分离的冠状病毒感染新生恒河猴肾细胞 ,制备抗原片 ,用间接免疫荧光法检测患者体内急性期和恢复期血清中的抗冠状病毒抗体。结果 :汕头地区 7例SARS患者血清内均有特异性抗冠状病毒抗体 ,且恢复期抗体滴度比急性期的滴度增高 4倍以上。结论 :用冠状病毒感染细胞抗原片对怀疑感染SARS的患者血清进行特异性抗体检测 。

多媒体为音乐教学添活力

使用现代信息技术可以在音乐教学中营造一种信息化教学环境，这种环境能够支持真实的情境创设、启发思考、信息获取、资源共享、多重交互、自主探究、协作学习等多方面要求的教学方式与学习方式。能充分体现学生的主体地位和以“自主、探究、合作”为特征的新型教与学的方式。这样，就可以把学生的主动性、积极性、创造性较充分地发挥出来。

探讨城乡统筹的发展之路

由来已久的城乡"二元"结构以及依然存在悬殊的城乡差距是统筹城乡发展必须反思的问题。推进城乡统筹,不仅仅是为了城镇化,也不仅仅是出于对农村发展的若干扶持,而是包含了促进城乡协调的必然要求。这个过程非常长,必须逐步推进。那么,我们到底该怎么走呢?

保护与传承——谈传统村落保护设计与传统中国画的结合

传统村落是中国传统文化的记忆载体。如何保护传统村落,留住传统文脉,留住地域的乡愁?通过分析传统中国画的布局、表达、对象及中国传统审美关系,呼吁在传统村落保护设计中加入传统中国画的元素和意境,借鉴与传承,把"传统村落"写在画纸上,还广大民众浓浓的乡愁。

中国广东2003年严重急性呼吸综合征疫情的流行病学及病原学研究

严重急性呼吸综合征（SARS）全球大流行的源头来自中国广东省的非典型性肺炎疫情爆发。本研究对广东省疫情爆发的病原体进行鉴定，并对SARS在广东省内的发生与传播情况进行介绍。

广州市社区人群流感抗体水平与人际接触状况的相关性分析

目的 探讨广州市社区人群流感抗体水平与人际接触状况的相关性.方法 采用Google数码地图随机抽取广州市行政区域范围内研究点,受检者接受问卷调查并抽取静脉血检测甲型流感（H3N2、H1Nl）抗体.结果 （1）Google数码地图随机选取50个点中符合研究入选条件40个（856户家庭2 801人）作为研究对象,实际参加1 821人（65.0％）,乡村和市区人群分别占77.3％（1 407/1 821）和22.7％（414/1 821）,以18～59岁年龄段为主,其次为≥60岁老年人,2～17岁组比例最低;（2）愿意提供血样者占78.1％（1 423/1 821）,H3N2和H1N1流感病毒抗体阳性率与年龄密切相关,以2～17岁年龄组最高;（3）受检人群间皮肤或近距离人际接触频率甚高,每天接触≥10人者高达49.8％ ～ 72.6％,无零接触者,且以6～17岁组比例最高;相对于工作日,休息日接触人数较少.结论 广州地区社区人群H3N2和H1N1流感病毒抗体阳性率以及人际间近距离接触频率均与年龄有关.