基于DNA条形码技术鉴定蒙药材刺柏叶及其混淆品

目的:基于DNA条形码技术鉴别蒙药材刺柏叶及其混淆品。方法:采用国际通用的条形码序列ITS2、psb A-trn H、mat K和rbc L,对刺柏叶及其混淆品圆柏叶共计11份样品进行DNA提取、扩增,采用CodonCode Aligner进行序列拼接,并用MEGA软件对拼接序列进行变异位点分析、邻接(NJ)聚类分析,并计算其平均种内、种间遗传距离。结果:4对引物的PCR扩增产物测序成功率分别为ITS2 100%、psb A-trn H 100%、rbc L 100%、mat K 0%;ITS2序列和psb A-trn H序列均可通过变异位点比较区分刺柏叶及其混淆品;NJ聚类分析的结果显示,psb A-trn H序列的NJ聚类树中刺柏叶与圆柏叶均能分别聚为一支,且psb A-trn H序列的平均种间遗传距离明显大于平均种内遗传距离。结论:psb A-trn H序列能有效区分圆柏叶与刺柏叶,可作为鉴别刺柏叶及其混淆品圆柏叶的条形码序列,为蒙药材刺柏叶及其混淆品的鉴别提供支持。

蒙成药清肺十八味丸的质量研究新进展

清肺十八味丸是蒙医临床治疗呼吸系统疾病的常用药物之一,其药物组成复杂,种类繁多,因此如何对清肺十八味丸的质量进行检测是临床实践中的重要问题。本文旨在通过整理归纳国内外近年来与蒙成药清肺十八味丸中所用药物相关的研究,通过对主要药物的化学成分、药理活性及质量控制应用分析,为蒙成药清肺十八味丸的质量控制提供理论参考。

清肺十八味丸质量标准研究

目的 提高并完善蒙成药清肺十八味丸的质量标准。方法 采用薄层色谱法对处方中的甘草、沉香、肉豆蔻进行定性鉴别研究;采用高效液相色谱法以甘草苷为指标性成分建立含量测定方法;采用滴定分析法对处方中的银朱建立含量测定方法。结果 薄层色谱鉴别方法主斑点清晰、Rf值适中、分离良好、阴性无干扰;含量测定(甘草)甘草苷的质量数线性范围为38.02~570.30 ng(r=0.9998),平均回收率为94.01%,RSD为1.49%;含量测定(银朱),平均回收率为96.28%,RSD为0.91%。结论 本文所建立的薄层色谱鉴别及含量测定方法专属性强、重复性好、准确可靠,可用于清肺十八味丸质量控制。

透骨灵橡胶膏质量标准研究

目的:提升透骨灵橡胶膏的质量标准。方法:采用薄层色谱法对制剂中含乌头碱类成分的药材进行定性鉴别;运用气相色谱法对制剂中含挥发性成分的药材进行定量测定,色谱柱为PE Elite-WAX ETR毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μm);检测器为氢火焰离子化检测器(FID);进样口温度230℃;检测器温度250℃;采用程序升温;载气流速1.0mL·min^(-1);分流比10∶1;进样量1μL。结果:苯甲酰乌头碱类的薄层色谱斑点清晰,分离度好,且阴性对照无干扰。樟脑、薄荷脑、异龙脑、龙脑的线性范围分别为3.305~105.765mg、5.621~179.878mg、2.048~65.537mg、3.399~108.763mg(R^(2)=1.0000,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%(n=6);平均加样回收率分别为93.5%,94.5%,94.0%,94.1%,RSD分别为2.2%,2.3%,2.3%,2.5%(n=6)。结论:本研究建立的方法专属性较强,适用于透骨灵橡胶膏的成分分析,可用于该制剂的质量控制。

蒙成药苏格木勒-7味丸质量控制方法研究

目的:完善质量标准体系,建立蒙成药苏格木勒-7味丸质量控制方法。方法:增加了豆蔻、沉香、肉豆蔻的薄层鉴别方法;建立沉香中沉香四醇的HPLC含量测定方法,应用Waters XBridge C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(15∶85)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长252 nm。结果:薄层斑点清晰,阴性对照无干扰;沉香四醇进样量在67.8~678.0 ng范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8),平均回收率为94.01%,RSD为1.49%。测定样品9批,沉香四醇含量为0.032~1.07 mg·g^(-1)。结论:所建立的定性、定量分析方法简便、准确,能显著提升苏格木勒-7味丸质量控制水平。

蒙药八味沉香散配伍不同动物心脏时丁香酚药代动力学比较研究

目的对牦牛心脏配伍和家猪心脏配伍八味沉香散的丁香酚药代动力学进行比较研究。方法采用HPLC法测定大鼠血浆中丁香酚的含量。以3,4-二甲氧基苯乙烯为内标;使用ALLtima HP C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为35℃;流动相为乙腈和水,按梯度洗脱,流量为1.0 m L/min;检测波长为280 nm。使用软件DAS 2.0对灌胃配伍不同动物心脏八味沉香散的大鼠体内丁香酚平均血药浓度-时间进行隔室模型拟合。结果以二室模型(权重为1/cc)计算血药浓度与实测值契合度优于其他模型。配伍牦牛心脏八味沉香散和配伍家猪心脏八味沉香散中丁香酚在大鼠体内的最大峰质量浓度(质量分数)Cmax分别为16.21 mg/L和12.50 mg/L;达峰时间Tmax分别为21.67 min和19.17 min;分布半衰期T1/2α分别为20.03 min和42.34 min;消除半衰期T1/2β均为69.315 min。结论在两种不同动物心脏配伍的八味沉香散中丁香酚代谢情况不相同。配伍牦牛心脏组方的代谢较好,其最大峰质量浓度更高、体内转运速率更快、吸收进入血液循环总量更多。

蒙药野兔心中17种氨基酸的含量测定

目的：建立蒙药野兔心中17种氨基酸的含量测定方法。方法：用氨基酸分析仪测定野兔心中17种氨基酸的含量。结果：在实验的浓度范围内,17种氨基酸的线性相关系数r值均大于0.9990,各氨基酸平均加样回收率（n=6）为96%~102%之间,RSD均小于2%。结论：该方法简便、准确,可用于测定野兔心中氨基酸的含量。

奶制瑞香狼毒RP-HPLC指纹图谱研究

目的:建立奶制瑞香狼毒RP-HPLC指纹图谱。方法:采用梯度洗脱方法进行色谱分离,使用"计算机辅助相似度评价软件"进行数据处理,对不同产地奶制瑞香狼毒药材指纹图谱相似度进行比较分析。结果:不同产地奶制瑞香狼毒药材指纹图谱相似度较好;在图谱中对狼毒色原酮和E15部位进行了定位和分析。结论:该方法重现性好,可用于奶制瑞香狼毒的质量控制。

葛根素对CVB3病毒致心肌炎模型miRNA表达的影响

目的:研究葛根素对CVB3病毒所致小白鼠病毒性心肌炎模型中miRNA表达的影响。方法:选取昆明种小白鼠60只,随机分为空白对照组、葛根素低剂量组、葛根素中剂量组、葛根素高剂量组、阳性药物(黄芪注射液)对照组和模型对照组,每组10只。除空白对照组外,其余50只小白鼠腹腔注射CVB3标准病毒株建立小白鼠病毒性心肌炎模型。8d后,腹主动脉取血,测定血清中SOD酶活性和MDA含量。取心脏,沿冠状面纵切,前部分制组织匀浆,测定清液中SOD酶活性和MDA含量。后部分心房部分测定组织中CVB3 miRNA的表达;心室部分制作病理切片,观察结构。结果:葛根素三个剂量组对病毒性心肌炎模型血清和心肌组织匀浆中的SOD酶活性和MDA含量有不同程度的改善。同时,对CVB3 miRNA的表达都有一定的抑制作用。葛根素在影响模型血清中的SOD酶活性和MDA含量和CVB3 miRNA的表达过程中均呈现剂量依赖性,即高剂量组优于中剂量组优于低剂量组。结论:葛根素对CVB3所致小白鼠病毒性心肌炎模型中CVB3 miRNA的表达有较好的抑制作用。

GC—MS法测定大米中十种有机氯农药的残留

目的：建立大米中十种有机氯农药的残留分析方法。方法：GC—MS法，色谱柱为：Rxi-5ms柱（30m×0．25mm×0．25μm），程序升温，以氦气为载气，流速40．0cm／sec，进样量1μL，经气相色谱分离，以EI源检测。结果：十种有机氯在1×10^-3ng-40×10^-3ng线性良好，r均在0．9950以上，回收率均在85．0％以上。RSD均在5％以下。结论：该方法简便、灵敏、结果准确可靠，可作为大米中十种有机氯农药残留的分析方法。

蒙药材蓝盆花指纹图谱及一测多评含量测定方法研究

目的:建立蒙药材蓝盆花的HPLC指纹图谱及一测多评法同时测定绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A及异绿原酸C 4个成分的含量,评价药材质量。方法:采用Kromasil 100-5-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长分别为326 nm(含量测定)和350 nm(指纹图谱),柱温30℃。以17批样品建立指纹图谱共有模式。以异绿原酸A为内参物,建立绿原酸、木犀草苷、异绿原酸C与内参物的相对校正因子,计算含量,并与外标法计算结果进行比较。结果:建立了蓝盆花药材的HPLC指纹图谱,标示了10个共有峰,并指认其中的7个色谱峰,分别为绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、大波斯菊苷、异绿原酸C、木犀草素、芹菜素。相对校正因子重现性良好,以异绿原酸A为内参物采用校正因子计算的含量值与实测值之间无显著差异。结论:采用指纹图谱与多指标检测模式可为评价蒙药材蓝盆花的质量提供有效方法。

奶制瑞香狼毒HPLC-ELSD指纹图谱的研究

目的建立奶制瑞香狼毒HPLC-ELSD指纹图谱。方法采用AlltimaC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇为流动相A,1%冰醋酸溶液为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,ELSD检测器气体压力25 psi,漂移管温度110℃。结果建立了蒙药材奶制瑞香狼毒HPLC-ELSD指纹图谱共有模式,并对不同产地奶制瑞香狼毒进行相似度比较。结论该方法简便、可靠,可用于不同产地奶制瑞香狼毒指纹图谱测定和质量评价,为有效控制奶制瑞香狼毒内在质量提供依据。

HPLC法测定蒙成药小儿清肺八味丸中羟基红花黄色素A的含量

目的:建立蒙成药小儿清肺八味丸中羟基红花黄色素A的含量测定方法。方法:采用HPLC法,应用Agilent TC-C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸水溶液(16∶1∶83),用三乙胺调pH值为6.0,流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃,进样量为10μL,检测波长为403 nm。结果:羟基红花黄色素A进样量范围在0.10~2.00μg时,进样量与峰面积线性关系良好(r=0.9999);平均回收率为102.48%,RSD为1.52%。结论:该方法简便、灵敏、准确,可用于小儿清肺八味丸中羟基红花黄色素A的测定。

HPLC法测定蒙成药三子散中没食子酸的含量

目的:建立蒙成药三子散中没食子酸的含量测定方法。方法:采用HPLC法,采用Phenomenex C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(5∶95),流速1.0 mL(min^(-1)),柱温35℃,进样量为10μL,检测波长为273nm。结果:没食子酸进样量范围在6.357~158.935μg时,进样量与峰面积线性关系良好(r=0.9999);平均回收率为97.70%,RSD为1.30%。结论:该方法简便、灵敏、准确,可用于三子散中没食子酸的测定。

蒙药材木棉花萼质量标准研究

目的:建立蒙药材木棉花萼的质量标准。方法:对不同产地的蒙药材木棉花萼进行性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别。建立测定木棉花萼中芒果苷含量的HPLC法。色谱柱为Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-1%冰醋酸水溶液(12∶88)为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0 m L·min^(-1);检测波长为258 nm;柱温为30℃;进样量为10μL。结果:薄层色谱鉴别中,薄层图谱清晰,与相邻斑点分离较好,阴性对照无干扰;高效液相色谱含量测定中,芒果苷在0.08388μg^0.8388μg范围内呈良好的线性关系。回归方程为:Y=73.853X-0.3706,R^2=0.9999。结论:所建立的显微鉴别、薄层鉴别方法和高效液相含量测定方法简便、可靠、重复性好、专属性强,可作为蒙药材木棉花萼的质量控制方法。

蒙成药小儿清肺八味丸的质量控制方法研究

目的:建立蒙成药小儿清肺八味丸的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对小儿清肺八味丸中红花、麦冬、拳参、人工牛黄、胡黄连进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定胡黄连中胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ的含量。结果:薄层鉴别方法专属性强,特征斑点清晰,阴性对照无干扰;胡黄连苷Ⅰ在3.8~76μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.71%,RSD为1.03%;胡黄连苷Ⅱ在8.4~168μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为103.30%,RSD为1.95%。结论:所建立的定性、定量分析方法简便、准确、灵敏度高,可用于小儿清肺八味丸的质量控制。

HPLC法测定蒙药乌兰三味汤散中羟基茜草素和大叶茜草素的含量

目的:建立测定蒙药乌兰三味汤散中羟基茜草素和大叶茜草素的含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱,型号为Waters XBridge C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)和Agilent ZORBAX C18柱(250 mm×4.6mm,5μm)。流动相:以乙腈为流动相A,以0.2%三乙胺、0.2%三氟乙酸的混合溶液为流动相B;流速:1.0 mL/min。检测波长为250 nm。柱温为35℃。结果:羟基茜草素对照品在97.0~970.0 ng范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=355197x-33743,r^(2)=1。大叶茜草素对照品在98.3~983.0 ng范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=209843x-3827.6,r2=0.9999。结论:该含量测定方法简便、可靠、重现性好、专属性强,可用于蒙药乌兰三味汤散的质量控制。

明目十六味丸质量标准研究

目的:完善明目十六味丸的质量标准。方法:对其形状及显微鉴别进行修订及规范化描述;采用薄层色谱法对明目十六味丸中决明子、当归、枸杞等进行定性鉴别研究;采用高效液相法,色谱柱为PhenomenexLuna C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(用三乙胺调pH值为6.0)(15∶1∶84)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长403 nm,柱温30℃,进行红花中羟基红花黄色素A含量测定。结果:决明子、当归和枸杞的薄层色谱主斑点清晰,分离良好,阴性对照无干扰;羟基红花黄色素A在79.1~1185.9 ng(r=0.9999)范围内线性良好,平均加样回收率为98.6%,RSD为0.49%。结论:建立的TLC和HPLC专属性强、重复性好、准确可靠,能够有效评价和控制蒙成药明目十六味丸质量。

广枣总黄酮对三氧化二砷诱导大鼠心肌损伤的作用研究

目的:探讨广枣总黄酮(total flavnoids of fructus choerospondiatis,TFFC)对三氧化二砷(Arsenic trioxide,ATO)诱导大鼠心肌损伤的保护作用。方法:采用灌胃5mg·kg^(-1) ATO溶液建立动物损伤模型。实验设为空白组、模型组(ATO 5mg·kg^(-1))、TFFC低剂量组(TFFC 15mg·kg^(-1)+ATO 5mg·kg^(-1)),TFFC中剂量组(TFFC 30mg·kg^(-1)+ATO 5mg·kg^(-1))、TFFC高剂量组(60 mg·kg^(-1)+ATO 5mg·kg^(-1)),空白组大鼠灌胃给予相同体积的药物溶媒0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),连续灌胃2周。用药期间监测大鼠体重,2周后用10%水合氯醛将大鼠麻醉,用生物机能实验系统测定大鼠心电图变化;腹主动脉取血,测定大血清中磷酸肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)的活力;处死大鼠取心脏称重,计算心体比;检测心肌组织中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力。结果:模型组大鼠体重及心体比显著降低(P<0.05),血清中CK、AST、LDH的活力显著升高(P<0.05),心肌组织中CAT、SOD、GSH-Px的活力显著下降(P<0.05);与模型组比较,TFFC各剂量组大鼠体重及心体比显著升高(P<0.05),血清中CK、AST、LDH的活力显著降低(P<0.05),心肌组织中CAT、SOD、GSH-Px的活力显著升高(P<0.05)。结论:TFFC对ATO诱导大鼠心肌损伤具有显著的保护作用。