益气固表丸对慢性阻塞性肺疾病细胞模型线粒体中SIRT5表达的影响

目的探讨益气固表丸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)支气管上皮样细胞线粒体中SIRT5表达的影响及对线粒体功能的调节作用。方法使用烟草提取物(CSE)刺激人支气管上皮样细胞16HBE建立COPD模型。实验设6组:正常组取人支气管上皮样细胞16HBE常规培养;COPD组取建模细胞常规培养;COPD+siRNA空转组取建模细胞,siRNA空转后培养;COPD+siRNA SIRT5组取建模细胞,siRNA转染后培养;COPD+益气固表丸组取建模细胞,加入益气固表丸含药血清培养;COPD+siRNA SIRT5+益气固表丸组取建模细胞,siRNA转染后加入益气固表丸含药血清培养。通过siRNA转染、RT-qPCR法筛选SIRT5最佳敲降靶序,显微镜下观察各组细胞形态和线粒体膜电位变化,流式细胞仪检测各组细胞线粒体膜电位及活性氧(ROS)含量,ELISA法测定各组细胞中ATP含量,RT-qPCR法检测各组细胞中SIRT5 mRNA相对表达量。结果与正常组相比,COPD各组细胞皱缩变圆,细胞密度低,细胞状态差;线粒体膜电位、ATP含量及SIRT5 mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05),ROS含量明显升高(P<0.05)。与COPD组比较,COPD+siRNA SIRT5组细胞状态更差,线粒体膜电位、ATP含量及SIRT5 mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05),ROS含量明显升高(P<0.05);与COPD组和COPD+siRNA SIRT5组比较,COPD+益气固表丸组和COPD+siRNA SIRT5+益气固表丸组细胞状态明显改善,线粒体膜电位、ATP含量及SIRT5 mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05),ROS含量均明显降低(P均<0.05)。结论益气固表丸能够通过调控CES诱导16HBE细胞线粒体中SIRT5的表达,从而改善线粒体功能障碍,起到治疗COPD的作用。

SIRT5通过促进IDH2去琥珀酰化增加COPD小鼠肺上皮细胞的抗氧化能力

目的探讨去乙酰化酶5(SIRT5)对慢性阻塞性肺病(COPD)中肺上皮细胞抗氧化能力的调节作用及机制。方法体外实验:肺上皮细胞MLE-12经H_(2)O_(2)、SIRT5过表达质粒(SIRT5-OE)或空载体(EV)处理后分为control组、H_(2)O_(2)组、SIRT5-OE组、EV组、H_(2)O_(2)+SIRT5-OE组、H_(2)O_(2)+EV组。在体实验:用烟草烟雾(CS)和脂多糖(LPS)诱导小鼠COPD模型,并分为正常组(小鼠不进行任何处理)、CS组(模型小鼠)、CS+saline组(生理盐水静脉注射到模型小鼠中)、CS+rhSIRT5组(将rhSIRT5静脉注射到模型小鼠中)、CS+rhSIRT5+SIRT5 inhibitor 1组(将rhSIRT5和SIRT5抑制剂共同注射到模型小鼠中)。按照说明书检测各组肺细胞/肺组织中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平。免疫沉淀法和蛋白免疫印迹法检测柠檬酸脱氢酶2(IDH2)的琥珀酰化水平和SIRT5蛋白表达。结果与EV组相比,SIRT5-OE组抑制IDH2的琥珀酰化水平降低,SIRT5蛋白表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与control组相比,H_(2)O_(2)组中IDH2的琥珀酰化、凋亡率、MDA、ROS的水平都增加/高(P<0.05)。与H_(2)O_(2)+EV组相比,H_(2)O_(2)+SIRT5-OE组的琥珀酰化和细胞凋亡率降低,且SOD和GSH-Px水平增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,CS组肺组织中IDH2的琥珀酰化、MDA、ROS的水平均增加/高(P<0.05)。与CS+saline组相比,CS+rhSIRT5组中IDH2的琥珀酰化减少,而SOD和GSH-Px水平均增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与CS+rhSIRT5组相比,CS+rhSIRT5+SIRT5 inhibitor 1组中MDA、ROS的水平均增加,SOD、GSH-Px水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SIRT5通过促进IDH2去琥珀酰化增加COPD小鼠肺上皮细胞的抗氧化能力。

慢性阻塞性肺疾病患者的氧化应激改变分析

目的分析慢性阻塞性肺疾病患者的氧化应激改变。方法选取医院2020年2月至2021年2月收治的慢性阻塞性肺疾病患者60例为病例组,根据疾病分期分为加重期组和缓解期组,各30例;同期健康人员30例为健康组。统计病例组患者呼吸困难评分,并行动脉血气分析;比较两组人员血浆氧化应激指标;分析病例组患者动脉血气分析与血浆氧化应激指标水平的相关性。结果加重期组患者的呼吸困难评分显著高于缓解期组,动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))显著高于缓解期组,动脉血氧分压(PaO_(2))显著低于缓解期组(P<0.05)。加重期组、缓解期组患者的血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力均显著低于健康组,且加重期组更低(P<0.05);血浆丙二醛(MDA)含量均显著高于健康组,且加重期组更高(P<0.05);血浆总抗氧化能力(TAC)均显著低于健康组,且加重期组更低(P<0.05)。加重期组和缓解期组的MDA含量与PaO_(2)呈显著的负相关(r=-0.462,-0.410,P<0.05);TAC与GSH-Px活力、PaO_(2)均呈显著的正相关(r=0.555和0.432,0.582和0.395,P<0.05),与MDA含量呈显著的负相关(r=-0.586,-0.450,P<0.05)。结论慢性阻塞性肺疾病患者体内缺乏平衡的氧化/抗氧化机制,有氧化应激存在,其改变能为临床诊断疾病分期提供参考。

不同剂量泮托拉唑治疗消化性溃疡并上消化道出血临床研究

目的观察不同剂量泮托拉唑治疗消化性溃疡并上消化道出血的临床效果。方法选取医院2016年4月至2018年4月收治的消化性溃疡并上消化道出血患者76例,随机分为研究组和对照组,各38例。研究组采用大剂量(80 mg)泮托拉唑治疗,对照组采用小剂量泮托拉唑(40 mg)治疗,对比两组患者的临床疗效。结果研究组总有效率明显高于对照组(97.74%比81.58%,P<0.05);研究组的输血量、止血时间、住院时间均优于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率相当(7.89%比10.53%,P>0.05)。结论大剂量泮托拉唑治疗消化性溃疡并上消化道出血,可提高临床疗效,减少输血量,缩短治疗时间。