芜菁酸性多糖结构及对脂多糖诱导肺损伤小鼠的保护作用

目的:研究芜菁酸性多糖(Brassica rapa L.acidic polysachharide-1,BRAP-1)的结构及其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠肺损伤的影响及其机制。方法:采用苯酚硫酸法、间羟基联苯法、考马斯亮蓝法、高效凝胶渗透色谱、傅里叶变换红外光谱、气相色谱-质谱法对BRAP-1化学组成、分子质量、结构及单糖组成进行分析。动物实验正常组、模型组小鼠灌胃0.5 mL/d生理盐水,BRAP-1低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/(kg mb·d),持续10 d,采用LPS气管滴注法建立肺损伤模型,检测相关指标,包括肺湿质量/干质量比值、肺泡灌洗液蛋白质量浓度、总细胞数,并进行苏木精-伊红染色;采用酶联免疫吸附测试法测定各组小鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、干扰素γ水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肺组织中肿瘤坏死因子受体、Toll样受体4、核转录因子-κB p65(nuclear factor kappa B p65,NF-κB p65)、IL-1β、NOD样受体3(NOD-like receptor 3,NLRP3)基因m RNA表达水平。结果:与模型组相比,BRAP-1对肺损伤小鼠肺组织水肿、肺泡浸润、蛋白渗出、细胞因子过度释放等病理学改变有缓解作用;并显著降低NF-κB/NLRP3通路关键基因mRNA表达水平。结论:BRAP-1对LPS诱导的小鼠肺损伤具有显著保护作用,其机制可能是调节NF-κB/NLRP3信号通路。

不同乙醇浓度醇沉对库尔勒香梨多糖含量及红外表征的影响

目的 探讨不同乙醇浓度醇沉法对库尔勒香梨多糖含量的影响,分析多糖红外表征及抗氧化活性。方法 采用水提取的库尔勒香梨提取物中加无水乙醇将乙醇浓度分别调为20%、40%、60%和80%沉淀得到四组库尔勒香梨总多糖组分,采用苯酚-硫酸法测定其含量,利用红外光谱法确定量高的多糖组分特定官能团结构。测定库尔勒香梨多糖清除1,1-二苯基-2-苦肼基(·DPPH)自由基、羟基自由基(·OH)及Cu还原能力,评价库尔勒香梨不同浓度乙醇沉淀的多糖组分的抗氧化活性。结果 当乙醇浓度为20%时多糖组分提取率为64.52%,乙醇体积分数为80%时多糖含量为62.93%。红外光谱结果显示,乙醇浓度80%时的库尔勒香梨多糖为吡喃糖;库尔勒香梨多糖对清除DPPH、·OH自由基能力和Cu^(2+)还原能力随着多糖浓度的增加均逐渐增强。结论 水提、分级醇沉法操作简便,不同乙醇浓度醇沉对库尔勒香梨多糖含量、提取率和抗氧化活性有一定的影响。

库尔勒香梨酸性多糖PSAP-1的分离纯化及其糖醛酸含量测定

目的分离纯化库尔勒香梨酸性多糖(Pyrus sinkiangensis Yu.acidic polysaccharide,PSAP-1),检测红外吸收并对其所含糖醛酸进行含量测定。方法经DEAE-650M、HW-55F及Sephacryl S-300色谱柱进行分离纯化PSAP-1,通过蒽酮-硫酸法测定多糖含量,红外光谱法确定其化学键或官能团信息,采用间羟基联苯法测定PSAP-1中糖醛酸的含量。结果葡萄糖对照品和PSAP-1的吸光度在0.04~0.12 mg/mL质量浓度范围内线性关系良好,PSAP-1含量为61.51%,精密度、稳定性、重复性和加样回收率的相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)分别为0.2%、1.3%、1.7%、1.4%,均小于2.0%;红外图谱显示,PSAP-1中有糖醛酸的特征吸收峰。确定D-半乳糖醛酸和PSAP-1的吸光度在0.035~0.055 mg/mL质量浓度范围内线性关系良好,糖醛酸的含量为62.78%,精密度、稳定性、重复性和加样回收率的RSD分别为0.14%、0.31%、1.00%、1.10%,均小2.0%。结论本研究从新疆库尔勒香梨中得到多糖含量高、富含糖醛酸的酸性均一多糖组分PSAP-1,所确定的PSAP-1多糖含量和糖醛酸含量测定方法准确可靠,为库尔勒香梨的深层研究提供了基础依据。

新疆芜菁中均一多糖的分离纯化及结构分析

目的测定分离纯化后的芜菁多糖均一组分BP1和BP2含量及纯度,并对其进行结构分析。方法经DEAE-纤维素52和sephadex-G150柱层析分离纯化BP1和BP2,采用蒽酮-硫酸法在紫外-可见分光光度计进行纯度测定;采用比旋光度法、气相色谱法、傅里叶红外光谱法、核磁共振法等方法进行结构分析。结果BP1和BP2在分离得到的7种多糖组分中含量较高,纯度测定结果中在260 nm和280 nm处未见到蛋白质和核酸的吸收峰。BP1组分相对分子质量为110662,[α]为+18.83;BP2组分相对分子量为37844,[α]为+12.00。BP1、BP2均由阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal)组成,其摩尔比分别为为1∶2.90∶16.48∶1.52和1.24∶2.03∶15.24∶1。BP1主链由α-D-Man-(1→,→6)α-D-Glc-(1→跟→2,6和1→连接的β-D-Gal组成,α-D-Man-(1→,→6)α-D-Glc-(1→组成支链;BP2主链由→6)α-D-Ara-(1→,→6)α-D-Man-(1→和→6,1→)连接的β-D-Glc组成,→6和1→)连接的β-D-Glc组成支链。结论本研究初步成功推测出多糖均一组分BP1、BP2的结构特征并给后期芜菁多糖的结构鉴定提供了可靠的理论基础。