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题名蚯蚓纤溶酶基因番茄表达载体的构建
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作者
米国桥
李继刚
贾永亮
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机构
河北大学生命科学学院
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出处
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期47-50,共4页
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基金
河北省教育厅项目(2007412)
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文摘
为研究蚯蚓纤溶酶的番茄表达,构建EFE基因的番茄表达载体pF和pEF,并导入农杆菌。采用PCR法在EFE基因DNA序列上添加了表达调控元件和酶切位点后,得到新EFE基因片段,将该片段与切去GUS基因的pBI121载体相连,以构建CaMV35S驱动的EFE组成型表达载体pF;用PCR克隆得到的E8启动子片段替换pF上的35S启动子,以构建番茄成熟果实特异性表达载体pEF;最后,采用三亲交配法用重组质粒转化根癌农杆菌EHA105;结果表明:经过酶切、PCR和测序鉴定,EFE基因、E8启动子序列已重组到表达载体上,植物表达载体构建正确,并且已经转化进农杆菌EHA105中。
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关键词
EFE基因
E8启动子
植物表达载体
番茄
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Keywords
earthworm fibrinolytic enzymes
E8 promoter
plant expression vector
tomato
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分类号
Q782
[生物学—分子生物学]
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题名蚯蚓MT基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引量:1
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作者
刘兰芳
李继刚
米国桥
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机构
河北大学生命科学学院
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出处
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期84-87,92,共5页
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基金
河北省教育厅项目(2007412)
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文摘
为了研究蚯蚓金属硫蛋白的生物学功能,采用RT-PCR方法从镉诱导后的赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)中克隆到蚯蚓金属硫蛋白基因cDNA。将其克隆入原核表达载体pET-DsbA中,然后转化至大肠杆菌表达受体菌BL21(DE3)中进行表达。产物经SDS-PAGE进行分析,可见约32.4 kD的融合蛋白。Zn2+抗性测定表明含pET-DsbA-efMT的重组菌较含空载体pET-DsbA的对照菌重金属抗性有所提高。
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关键词
MT基因
克隆
原核表达
抗性
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Keywords
metallothionein gene
clone
prokaryotic expression
resistance
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
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