勘误:IL-33基因重组和表达不影响重组狂犬病病毒体外表型特征

因本文作者失误,发表在《细胞与分子免疫学杂志》2023年第39卷第7期第586-591页的“IL-33基因重组和表达不影响重组狂犬病病毒体外表型特征”的论文中,图1、图2C及图3C、3D用错了图片。投稿时由于疏忽,错误的使用了其他图片。经过反复核对和确认,现申请对图1、图2C及图3C、3D进行勘误,勘误结果与本文结论相符合,不影响文章的结果和结论。本文作者对该错误所造成的任何不便或误解,深表歉意。现将原图和更正后的图片附后。

IL-33基因重组和表达不影响重组狂犬病病毒体外表型特征

目的 构建白细胞介素33(IL-33)基因重组的狂犬病病毒,明确表达IL-33对重组病毒体外表型特征的影响。方法从狂犬病强毒株感染的小鼠脑内扩增获得的IL-33基因,通过反向遗传操作技术插入亲本病毒LBNSE基因组的G、 L基因之间,并拯救过表达IL-33的重组病毒;将重组狂犬病毒rLBNSE-IL33和亲本毒株LBNSE感染BSR仓鼠肾细胞或NA小鼠神经瘤细胞;在感染复数=0.01的情况下,测序和荧光抗体病毒中和试验检测重组病毒在传代过程中的稳定性;检测病毒滴度病灶形成单位(FFU)绘制多步生长曲线(感染复数=0.01);细胞毒性检测试剂盒检测细胞活性;ELISA检测不同感染复数感染细胞上清中IL-33的含量。结果 拯救获得过表达IL-33的rLBNSE-IL33,rLBNSE-IL33能够稳定连续传代至少10代,且毒价约为108FFU/mL;rLBNSE-IL33能够以剂量依赖的形式高水平表达IL-33,但检测被LBNSE感染的细胞上清,没有检测到IL-33的高表达;检查rLBNSE-IL33和亲本毒株LBNSE在BSR和NA细胞中5 d内的滴度,显示无明显差别,具有相似的生长动力学特性;过表达IL-33对感染细胞增殖及活性无显著影响。结论 IL-33基因重组和表达对狂犬病病毒体外表型特征无显著影响。

OX40/OX40L在免疫调节及相关疾病中的研究进展

新型正性协同刺激分子OX40L为肿瘤坏死因子超家族成员,与其受体OX40的信号在免疫应答有效启动、适度效应和适时终止过程中起重要调节作用。近年研究证明,OX40/OX40L在相关疾病发生、发展中起重要作用。本文就OX40/OX40L的免疫调节特性及其在炎症性疾病、肿瘤及自身免疫性疾病中的研究进展进行综述。

干扰素λ对氧糖剥夺/复氧诱导的血-脑屏障模型通透性的影响

目的探究干扰素-lambda(interferon-lambda,IFN-λ)对氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的血脑屏障(blood brain barrier,BBB)模型通透性的影响及机制。方法通过Transwell共培养模型,将b.End3细胞在Transwell的上腔室培养,星形胶质细胞在下腔室培养,构建BBB模型。将BBB模型分为对照组、OGD/R处理组、IFN-λ干预组,每组设3个复孔。OGD/R处理组给予OGD/R处理,IFN-λ干预组在给予OGD/R处理的基础上给予IFN-λ干预。采用qRT-PCR检测IFN-λ在OGD/R模型中是否发挥作用;通过qRT-PCR实验确定构成Transwell共培养模型的星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞(b.End3)能否表达IFN-λ的受体;根据Transwell渗透性实验FITC-dextran-10000渗透情况,评估IFN-λ处理后对OGD/R模型BBB通透性的影响;通过qRT-PCR、Western blot和荧光共聚焦实验检测b.End3细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-5 mRNA及蛋白表达水平。结果qRT-PCR检测结果显示,与对照组相比,OGD/R处理组星形胶质细胞和b.End3细胞IFN-λ2和IFN-λ3表达增加(P<0.05),对照组和OGD/R处理组间星形胶质细胞和b.End3细胞IFNLR1和IL-10Rβ表达水平无统计学差异(P>0.05);Transwell渗透性实验结果显示,与OGD/R处理组相比,IFN-λ干预组FITC-dextran-10000渗透量明显降低(P<0.05);qRT-PCR检测结果显示,与OGD/R处理组相比,IFN-λ干预组b.End3细胞紧密连接蛋白mRNA表达增加(P<0.05);Western blot检测结果显示,与OGD/R处理组相比,IFN-λ干预组b.End3细胞紧密连接蛋白表达增加(P<0.05);免疫荧光共聚焦检测结果显示,IFN-λ干预组b.End3细胞紧密连接蛋白平均荧光强度高于OGD/R处理组(P<0.05)。结论IFN-λ能够促进紧密蛋白表达和连接性,降低OGD/R诱导的BBB的通透性。

OX40L通过增殖滤泡辅助性T细胞促进H7N9全病毒灭活疫苗诱导的抗体反应

目的探讨OX40L作为H7N9全病毒灭活疫苗(whole-virion inactivated vaccine,WIV)免疫佐剂的保护效果。方法将50只BALB/c小鼠随机分为5组进行肌肉免疫:未免疫组(对照组)、单独疫苗组(1.5μg WIV)、佐剂疫苗组(1.5μg WIV+0.6/1.8/3.0μg OX40L/Fc)。免疫后21 d,通过ELISA和血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)试验检测免疫小鼠血清中各类抗体水平,并使用50×半数致死量(median lethal dose,LD_(50))的H7N9流感病毒适应株攻击小鼠,记录小鼠体重变化及存活率,以评价OX40L/Fc与H7N9 WIV共免疫后的保护效果。免疫后7 d,通过流式细胞术探究OX40L佐剂效应的机制。结果与单独疫苗组相比较,共免疫OX40L/Fc可使小鼠血清中的特异性IgG抗体水平显著升高,3组佐剂疫苗组(1.5μg WIV+0.6/1.8/3.0μg OX40L/Fc)的抗体几何平均滴度(lgGMT)分别为3.79、4.40和4.20。共免疫显著增加了IgG1和IgG2a抗体的滴度,但对Th1/Th2免疫应答平衡没有显著影响。与单独疫苗组相比较,共免疫1.8μg和3.0μg OX40L/Fc小鼠的HI抗体水平分别为6.25±0.50和5.70±0.97,差异有统计学意义(P<0.05)。共免疫1.8μg和3.0μg OX40L/Fc能够有效保护80%和75%的小鼠抵抗致死剂量病毒的攻击,损失的体重少于单独疫苗组,1.8μg OX40L/Fc为最佳浓度。流式细胞术显示,与单独疫苗组相比,OX40L(0.6/1.8/3.0μg)能够促进趋化因子受体CXCR5和程序性细胞死亡蛋白PD-1高效表达,增强H7N9 WIV免疫后淋巴结中滤泡辅助性T(Tfh)细胞的增殖(P均<0.05)。结论OX40L能够通过增殖Tfh细胞以增强H7N9 WIV诱导的抗体反应。