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miR-370-3p对口腔鳞癌细胞SCC-9增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 万紫微 粟小平 +1 位作者 韦珍夏 黄旋平 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第1期32-39,共8页
目的:探究miR-370-3p对口腔鳞癌细胞(SCC-9)增殖、迁移和侵袭的影响,并分析其可能的作用机制。方法:比较人正常口腔鳞状上皮细胞(NOK)与SCC-9细胞miR-370-3p和NPC1表达。将SCC-9细胞分为miR-370-3p mimic组、miR-370-3p阴性对照(NC)组、... 目的:探究miR-370-3p对口腔鳞癌细胞(SCC-9)增殖、迁移和侵袭的影响,并分析其可能的作用机制。方法:比较人正常口腔鳞状上皮细胞(NOK)与SCC-9细胞miR-370-3p和NPC1表达。将SCC-9细胞分为miR-370-3p mimic组、miR-370-3p阴性对照(NC)组、miR-370-3p inhibitor组、miR-370-3p inhibitor-NC组。采用克隆形成实验检测细胞集落形成能力,CCK-8法、划痕实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞miR-370-3p表达,双荧光素酶实验检测miR-370-3p与NPC1的靶向关系,western blotting法检测NPC1蛋白表达。结果:与NOK细胞比较,SCC-9细胞miR-370-3p表达上调,NPC1表达下调(均P<0.05)。与mimic NC组比较,miR-370-3p mimic组miR-370-3p表达水平升高,NPC1蛋白表达水平降低,细胞活力增强,划痕迁移率降低,穿膜细胞数增加(均P<0.05)。miR-370-3p inhibitor组上述指标变化趋势与miR-370-3p mimic组相反(均P<0.05)。荧光素酶实验结果显示,miR-370-3p能够靶向结合NPC1的3’-UTR,并抑制NPC1蛋白表达(P<0.05)。结论:miR-370-3p可促进口腔鳞癌细胞SCC-9增殖、迁移和侵袭,其机制可能与调控其下游靶基因NPC1的表达有关。 展开更多
关键词 miR-370-3p 口腔鳞状细胞癌 增殖 迁移 侵袭
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超临界机组锅炉汽水系统通用换热器链式集总参数模型的建模和仿真
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作者 覃贵芳 王恩营 +3 位作者 韦海燕 张弘 张宝芳 粟小平 《装备制造技术》 2023年第1期44-46,49,共4页
锅炉汽水系统的省煤器、过热器、再热器等通用换热器在建模时,通常采用单段集总参数模型或多段集总参数模型。单段集总参数模型是最传统的,也是最常见的模型,这种模型的优点是建模简单,缺点是模型精确度低,不能精确的模拟通用换热设备... 锅炉汽水系统的省煤器、过热器、再热器等通用换热器在建模时,通常采用单段集总参数模型或多段集总参数模型。单段集总参数模型是最传统的,也是最常见的模型,这种模型的优点是建模简单,缺点是模型精确度低,不能精确的模拟通用换热设备的实际运行过程,尤其是不能较好反应温焓通道过渡过程特征。此时,多段集总参数模型应运而生,这种模型是把多个单段集总参数模型的串联起来,其优点是模型精确度变高了,缺点是建模方法和模块的计算方法也相对复杂了。根据实际需求综合考虑,提出通用换热器链式多段集总参数模型;与多段集总参数模型相比较,链式结构模型有更多的优点,例如,与三段集总参数模型在计算量相当的情况下,虽然在热流量的扰动时,工质出口焓的动态响应无明显改善,但是在入口流量和入口焓的扰动时,动态响应过程却有比较明显的改善。最后,依托功能强大的MSP多学科仿真平台进行图形化建模、仿真和调试。结果表明,链式结构的模型建模方法相对简单、模块运行速度快、稳定性好且精度高,能更好的满足工程对于模型的要求。 展开更多
关键词 通用换热器 链式结构模型 建模 仿真
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三分仓回转式空气预热器动态模型优化和仿真
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作者 覃贵芳 王恩营 +3 位作者 粟小平 张宝芳 张婧 韦海燕 《红水河》 2023年第1期113-117,共5页
为了提高火电仿真培训系统模型精度和模块运行速度,笔者以三分仓回转式空气预热器为研究对象,提出三分仓空气预热器链式结构集总参数模型,该模型由三个相互重叠的环节组成,分别建立各环节的简单集总参数模型,在烟气热流量、空气入口流... 为了提高火电仿真培训系统模型精度和模块运行速度,笔者以三分仓回转式空气预热器为研究对象,提出三分仓空气预热器链式结构集总参数模型,该模型由三个相互重叠的环节组成,分别建立各环节的简单集总参数模型,在烟气热流量、空气入口流量和焓扰动的情况下,其出口焓分别以二阶和三阶的精度逼近分布参数模型,提高了三分仓空气预热器模型的精度。依托MSP多学科仿真开发平台进行图形化建模和仿真,结果表明:该模型具有精度高、建模方法相对简单、运行速度快、模块可移植性好等优点。 展开更多
关键词 三分仓回转式空气预热器 链式结构 集总参数模型 建模 仿真
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基于网络药理学探究黄芪治疗口腔鳞状细胞癌的机制
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作者 吕薇 李翠萍 +2 位作者 冯冰华 粟小平 黄旋平 《中医临床研究》 2023年第25期67-71,共5页
目的:通过网络药理学理论及分子对接探究黄芪治疗口腔鳞状细胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC)的可能机制。方法:从中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)下载黄芪的有效成分及对应靶点,并通过癌症基因组图谱获取OSCC的差异表... 目的:通过网络药理学理论及分子对接探究黄芪治疗口腔鳞状细胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC)的可能机制。方法:从中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)下载黄芪的有效成分及对应靶点,并通过癌症基因组图谱获取OSCC的差异表达基因集,筛选出的共同靶点即为黄芪治疗OSCC的潜在靶点。利用STRING数据库获取潜在靶点的相互作用关系,用Cytoscape软件构建黄芪治疗OSCC的潜在靶点相互作用网络图,并获得关键靶点。通过注释可视化和集成发现数据库(DAVID)和KOBAS数据库分别对潜在靶点进行基因本体论功能和京都基因与基因组百科全书通路富集分析并构建“靶点-信号通路”网络图。借助Schrodinger软件对关键靶点及相应的黄芪有效成分进行分子对接。结果:黄芪可通过66个潜在靶点治疗OSCC,包括周期蛋白依赖激酶1(Cyclin Dependent Kinase 1,CDK1)、信号转导和转录活化因子1(Signal Transducer and Activator of Transcription 1,STAT1)、雄激素受体蛋白(Androgen Receptor,AR)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)和微囊蛋白1(Caveolin-1,CAV1)。黄芪治疗OSCC的潜在靶点富集最显著的是肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)信号通路、细胞衰老和p53信号通路。关键靶点AR和黄芪相关有效成分均有良好的结合活性。结论:研究证明了黄芪治疗OSCC的多组分、多靶点和多通路特征,并为黄芪治疗OSCC的深入验证及黄芪在临床的合理应用提供科学依据。 展开更多
关键词 网络药理学 口腔鳞状细胞癌 黄芪 蛋白质-蛋白质相互作用网络 分子对接
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“电力工程概预算”课程的“三教”改革实践
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作者 颜晓娟 粟小平 +3 位作者 梁梅 韦佳伟 韦海燕 覃贵芳 《装备制造技术》 2023年第3期215-217,共3页
针对“电力工程概预算”课程教学存在电力工程类的概预算教材偏少、教学内容局限在教材内容、教学实践条件和师资力量不足、教学模式单一和教学评价方式单一等问题,“电力工程概预算”课程团队结合“电力工程概预算”课程特点、学生学... 针对“电力工程概预算”课程教学存在电力工程类的概预算教材偏少、教学内容局限在教材内容、教学实践条件和师资力量不足、教学模式单一和教学评价方式单一等问题,“电力工程概预算”课程团队结合“电力工程概预算”课程特点、学生学习特点以及学校的教学硬件条件,从教师、教材、教法三方面落实“电力工程概预算”课程“三教”改革。通过引进电力工程造价企业专家,输送教师到企业去实践锻炼,老教师和青年教师结对子、共同申报研究课题、课堂听课以及教学竞赛辅导等方式进行教师改革。根据岗位典型工作任务,重构课程教学项目和任务,编制实训教材;根据工程造价技术发展,与时俱进地添加教学内容,编制理论教材;利用现代网络信息技术,建立丰富立体的教学资源,编制数字化教材。通过以上三种方式进行教材改革。从教学文件、理论教学课堂、实训教学课堂、第二课堂多维度,游戏化教学、对分课堂、思维导图多教学模式进行教法改革。经过多个专业多个学期的教学实践证明,说明“电力工程概预算”课程“三教”改革有利于提高教学效果。 展开更多
关键词 电力工程 概预算 “三教”改革 课程团队
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沼泽型水牛ALK3基因克隆分析与表达模式研究 被引量:4
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作者 朱鹏 粟小平 +3 位作者 苏节 刘金凤 刘庆友 石德顺 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期516-524,共9页
试验旨在对沼泽型水牛ALK3基因进行克隆、生物信息学分析,并对其在水牛组织中的表达规律进行系统研究。根据GenBank中已公布的牛ALK3基因序列设计特异性引物,应用RT-PCR方法扩增、克隆获得目的基因片段;应用生物信息学方法分析和预测了... 试验旨在对沼泽型水牛ALK3基因进行克隆、生物信息学分析,并对其在水牛组织中的表达规律进行系统研究。根据GenBank中已公布的牛ALK3基因序列设计特异性引物,应用RT-PCR方法扩增、克隆获得目的基因片段;应用生物信息学方法分析和预测了水牛ALK3的遗传进化及蛋白质的理化性质、二级和三级结构;并应用QRT-PCR技术对ALK3基因在水牛组织中的表达进行了差异分析。结果表明,水牛ALK3基因编码区全长1 599bp,共编码532个氨基酸。多重序列比较分析显示,水牛ALK3核苷酸序列与牛、绵羊、猪、马、人和小鼠相应序列的同源性分别为98%、96%、95%、93%、94%和91%。系统进化树分析显示,ALK3基因在不同物种以及进化的过程中具有高度保守性。对ALK3蛋白质的分析表明该蛋白呈弱碱性,有信号肽,细胞亚定位于胞膜上,存在丝氨酸/苏氨酸激酶和GS等结构。定量分析结果显示,ALK3在水牛生殖脊、心脏、肝脏、颗粒细胞、肺脏、卵丘细胞、肾脏、下丘脑、垂体、大脑等15种组织或细胞中有不同程度的表达,其中卵巢中表达量最高,垂体、肺脏和睾丸次之,卵丘细胞表达量最低。本研究成功克隆了沼泽型水牛ALK3基因,并研究了其在不同水牛组织细胞中的表达规律,为阐明其在水牛繁殖过程中的功能及转基因载体构建中的应用研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 水牛 ALK3 克隆分析 表达模式
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水牛MBD3基因克隆分析及其真核表达载体的构建 被引量:3
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作者 粟小平 肖宁 +4 位作者 罗西尔 雷薇 崔奎青 石德顺 刘庆友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第8期1951-1959,共9页
本研究旨在克隆水牛MBD3基因,进行生物信息学分析,并构建MBD3基因的真核表达载体,为研究MBD3基因在水牛胚胎发育及诱导多能干细胞(iPSCs)中的作用奠定基础。试验从卵巢组织中提取总RNA,反转录得到cDNA,并以此为模板,应用RT-PCR克隆得到M... 本研究旨在克隆水牛MBD3基因,进行生物信息学分析,并构建MBD3基因的真核表达载体,为研究MBD3基因在水牛胚胎发育及诱导多能干细胞(iPSCs)中的作用奠定基础。试验从卵巢组织中提取总RNA,反转录得到cDNA,并以此为模板,应用RT-PCR克隆得到MBD3基因,测序并应用相关的生物学软件进行分析;将MBD3基因连接至真核表达载体pEGFP-C1,再将携带目的基因的重组质粒转染HEK293T细胞和水牛胎儿成纤维细胞(BFF),利用RT-PCR及Western blotting方法分析目的基因的表达。结果表明,克隆获得了898bp的水牛MBD3基因序列,其中编码区全长774bp,编码257个氨基酸。通过对MBD3基因核苷酸序列的多重比对及进化树分析,MBD3基因在进化中高度保守,特别是MBD结构域,水牛与牛的同源性为100%,与人、猪、猩猩的同源性均为97%。将水牛MBD3基因真核表达载体转染HEK293T细胞和BFF,通过荧光观察、RT-PCR及Western blotting方法鉴定表明,成功构建了水牛MBD3基因的真核表达载体。本研究克隆得到了水牛的MBD3基因,并成功构建了MBD3基因的真核表达载体,为进一步研究MBD3基因在水牛胚胎发育及iPSCs诱导上的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 水牛 MBD3基因 DNA甲基化 表观遗传 干细胞
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关中奶山羊PIS区域序列多态性分析 被引量:5
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作者 侯策 粟小平 +3 位作者 王起恬 崔奎青 石德顺 刘庆友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期3554-3562,共9页
山羊无角性状是畜牧业生产中重要的经济性状,报道显示山羊无角间性综合征(polled intersex syndrome,PIS)控制着山羊的无角和间性性状。山羊PIS序列定位于1号染色体约11.7kb的序列上,试验旨在研究这段序列对关中奶山羊(3只有角山羊、3... 山羊无角性状是畜牧业生产中重要的经济性状,报道显示山羊无角间性综合征(polled intersex syndrome,PIS)控制着山羊的无角和间性性状。山羊PIS序列定位于1号染色体约11.7kb的序列上,试验旨在研究这段序列对关中奶山羊(3只有角山羊、3只无角山羊)无角性状的影响。选用4对引物(PIS1-1、PIS1-2、PIS2、PIS3)扩增关中奶山羊的PIS序列,第5对引物(PIS whole)用于检测PIS序列的完全缺失,对测序结果进行拼接、多态性分析,并对序列进行基因注释。结果发现,试验成功扩增出山羊PIS的全长序列(12.814kb),BLAST比对结果正确。PIS whole引物没有扩增出任何条带,说明关中奶山羊中不存在11.7kb的完全缺失。经SeqMan软件分析拼接序列发现30个多态性位点,这些多态性位点可能与关中奶山羊有角/无角性状相关。对拼接序列进行基因注释,发现存在1个tRNA编码位点、2个微卫星、3个microRNA编码位点及L1-EN、RT-nLTR-like样保守结构域,并发现1个CpG岛、1对反向重复序列和2段串联重复序列。本试验结果对关中奶山羊无角性状的分子机理研究具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 关中奶山羊 无角性状 无角间性综合征(PIS) 多态性 序列注释
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猪JHDM2A基因的克隆及表达分析 被引量:2
9
作者 宋延霞 吴大平 +3 位作者 李海艳 李胜 粟小平 李湘萍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第6期1596-1603,共8页
试验旨在克隆猪JHDM2A基因,并研究其在猪卵巢组织中的表达情况。首先克隆猪JHDM2A基因,并构建pLVX-IRES-ZsGreen1-JHDM2A真核表达载体,同时对JHDM2A基因在猪卵泡发育过程中的表达情况进行分析。结果显示,克隆得到的猪JHDM2A基因编码区... 试验旨在克隆猪JHDM2A基因,并研究其在猪卵巢组织中的表达情况。首先克隆猪JHDM2A基因,并构建pLVX-IRES-ZsGreen1-JHDM2A真核表达载体,同时对JHDM2A基因在猪卵泡发育过程中的表达情况进行分析。结果显示,克隆得到的猪JHDM2A基因编码区长度为3 945bp,编码1 315个氨基酸。通过多重氨基酸序列比对发现,猪JHDM2A基因与黄牛、水牛、绵羊和人相应氨基酸序列的同源性分别为93.5%、94.7%、94.7%和93.8%。蛋白质分子系统进化树分析结果表明,JHDM2A基因在物种进化过程中高度保守。通过脂质体转染法将构建的pLVX-IRES-ZsGreen1-JHDM2A真核表达载体导入HEK293T细胞,可观察到清晰的绿色荧光蛋白表达。免疫组化结果显示,JHDM2A蛋白在不同发育阶段猪卵泡中均有表达。本试验通过克隆获得猪JHDM2A基因序列,JHDM2A蛋白在猪卵巢中高度表达,表明其功能可能与猪卵泡发育密切相关。 展开更多
关键词 JHDM2A基因 克隆 卵泡 表达分析
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ICSI受精卵胞质注射生产转基因猪胚胎的初步研究 被引量:2
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作者 李红丽 粟小平 +4 位作者 路粟雨 刘帅 刘庆友 崔奎青 石德顺 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第6期1618-1625,共8页
试验旨在探讨单精子胞浆内注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)法生产猪体外受精卵和应用猪ICSI受精卵进行胞质注射生产转基因胚胎的可行性。首先对比了猪体外受精(in vitro fertilization,IVF)受精卵与ICSI受精卵的胚胎发育效... 试验旨在探讨单精子胞浆内注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)法生产猪体外受精卵和应用猪ICSI受精卵进行胞质注射生产转基因胚胎的可行性。首先对比了猪体外受精(in vitro fertilization,IVF)受精卵与ICSI受精卵的胚胎发育效率;然后观察了猪ICSI受精卵的双原核形成时间及效率,对精子注射到胞质后6~18h分6个时间段进行地衣红染色,对比精子进入卵胞质后的状态及原核形成;最后对猪IVF受精卵受精后8~10h及ICSI受精卵受精后12~14h进行EGFP-N1质粒(20ng/μL)胞质注射,观察胚胎发育效率及转基因效率。结果表明,ICSI受精卵的胚胎发育率(卵裂率89.4%和67.9%、囊胚率36.5%和16.1%)显著优于IVF组(P<0.05),适合用于猪的体外受精卵试验;猪ICSI受精卵双原核在精子注射到卵胞质后12~14h形成,双原核形成率为54.90%,显著高于其余5个试验组(P<0.05);ICSI受精卵胞质注射组胚胎卵裂率(86.2%和66.3%)、囊胚率(30.0%和13.6%)及转基因效率(18.5%和0)均显著高于IVF受精卵胞质注射试验组(P<0.05)。本试验结果为采用ICSI受精卵进行胞质注射生产转基因猪的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 单精子胞浆内注射(ICSI) 胞质注射 转基因 猪胚胎
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硫酸软骨素蛋白多糖4在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 刘俊君 覃浩 +5 位作者 李翠萍 粟小平 穆婷 冯浩然 黄旋平 麦华明 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第1期31-35,共5页
目的:研究硫酸软骨素蛋白多糖4(CSPG4)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其临床意义。方法:应用荧光定量PCR及免疫组织化学技术检测42例OSCC组织及相应的癌旁正常组织(>2cm)中CSPG4mRNA及其蛋白的表达,并分析其与患者临床特征之... 目的:研究硫酸软骨素蛋白多糖4(CSPG4)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其临床意义。方法:应用荧光定量PCR及免疫组织化学技术检测42例OSCC组织及相应的癌旁正常组织(>2cm)中CSPG4mRNA及其蛋白的表达,并分析其与患者临床特征之间的关系。结果:CSPG4 mRNA及其蛋白在OSCC组织中的表达均较癌旁组织显著上调(均P<0.05),CSPG4mRNA及其蛋白的表达与患者年龄、民族、OSCC分化程度无关(P>0.05),与性别、淋巴结转移及临床分期相关,男性患者中的表达较女性患者高,转移组高于非转移组,Ⅲ~Ⅳ期高于Ⅰ~Ⅱ期(均P<0.05)。结论:CSPG4与OSCC的发生、发展及转移有着密切的联系。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 硫酸软骨素蛋白多糖4 转移 实时荧光定量PCR 免疫组织化学
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基于生物信息学对头颈鳞癌的关键基因进行分析 被引量:1
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作者 冯浩然 粟小平 +4 位作者 穆婷 王爽 黄旋平 李翠萍 何雨亮 《右江民族医学院学报》 2020年第5期568-573,共6页
目的探讨头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)潜在的关键基因。方法从GEO数据库中下载GSE6631和GSE13398芯片数据集,通过GEO2R工具筛选出HNSCC癌组织与正常组织的差异表达基因(differentially expressed gen... 目的探讨头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)潜在的关键基因。方法从GEO数据库中下载GSE6631和GSE13398芯片数据集,通过GEO2R工具筛选出HNSCC癌组织与正常组织的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。HNSCC高通量测序数据从TCGA数据库中下载,通过R包edgR筛选HNSCC癌组织与正常组织的DEGs。利用STRING数据库构建蛋白互作网络(protein-protein interaction network,PPI network)。关键基因通过Cytoscape软件及GEPIA在线工具进行筛选,并进行GO(Gene Ontology)功能注释分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析。最后通过QRT-PCR在临床标本上对关键基因表达进行验证。结果在本研究中,共筛选出70个DEGs,其中34个基因表达上调,36个基因表达下调。PPI网络中候选关键基因的功能分析显示大部分基因富集于细胞外基质组织、细胞外基质受体相互作用、黏着斑和PI3K-Akt信号通路等。MCC算法结合生存分析,最终确定7个关键基因:PLAU、FAP、LAMC2、SERPINH1、ITGA6、SPP1和MMP1。结论7个关键基因PLAU、FAP、LAMC2、SERPINH1、ITGA6、SPP1、MMP1可为HNSCC的诊断及治疗提供潜在靶点。 展开更多
关键词 头颈部肿瘤 鳞状细胞 差异表达基因 生物信息学
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“投其所好”在培养生物技术专业学生学习兴趣中的作用
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作者 粟小平 《大众科技》 2021年第5期137-139,共3页
生物技术是全球发展最快的高新技术之一,其技术过程复杂,基础理论知识体系庞大且复杂难懂。对多数学生来说,生物技术知识较为晦涩,不容易掌握,长期以往容易对这门课程丧失兴趣。而"投其所好"教学法,即以学生本来的兴趣为基础... 生物技术是全球发展最快的高新技术之一,其技术过程复杂,基础理论知识体系庞大且复杂难懂。对多数学生来说,生物技术知识较为晦涩,不容易掌握,长期以往容易对这门课程丧失兴趣。而"投其所好"教学法,即以学生本来的兴趣为基础,将专业知识与其兴趣爱好相融合,辅以现代多媒体教学手段,能够培养其对生物技术专业的学习兴趣,同时使其更加容易接受和掌握相关的专业知识,对于学生专业知识的学习与学业发展具有重要的作用。 展开更多
关键词 生物技术 投其所好 兴趣 多媒体
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MIC微处理型数字式无方向过流继电器简介
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作者 粟小平 《广西电力建设科技信息》 2002年第1期24-26,共3页
贵港航运枢纽二期工程仙衣滩水电站发电机出口电抗器的保护采用了美国通用电器公司生产的MIC微处理型数字式无方向过流继电器。它具有功能强大,体积小,安装方便,操作及维护简单,尤其是它具有故障显示及记录功能,这大大方便了运行... 贵港航运枢纽二期工程仙衣滩水电站发电机出口电抗器的保护采用了美国通用电器公司生产的MIC微处理型数字式无方向过流继电器。它具有功能强大,体积小,安装方便,操作及维护简单,尤其是它具有故障显示及记录功能,这大大方便了运行及检修工作。本文对其功能,运作原理及整定步骤进行介绍。 展开更多
关键词 数字式无方向过流继电器 微处理型继电器 MIC型 过载保护
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树鼩原代耳缘成纤维细胞体外分离培养及鉴定的研究
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作者 冯梅 罗秋妮 +6 位作者 郑思聪 彭碧燕 孙俊铭 张名媛 粟小平 欧阳轶强 李习艺 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第11期1719-1725,共7页
目的:旨在建立树鼩耳缘成纤维细胞体外分离、培养纯化及鉴定的方法。方法:采用组织块贴壁法进行原代树鼩耳缘成纤维细胞(TSEF)的分离培养,将获得的细胞利用波形蛋白(Vimentin)进行免疫荧光鉴定,RT-qPCR法检测Vimentin基因mRNA的相对表达... 目的:旨在建立树鼩耳缘成纤维细胞体外分离、培养纯化及鉴定的方法。方法:采用组织块贴壁法进行原代树鼩耳缘成纤维细胞(TSEF)的分离培养,将获得的细胞利用波形蛋白(Vimentin)进行免疫荧光鉴定,RT-qPCR法检测Vimentin基因mRNA的相对表达量;用苏木精—伊红(HE)染色,观察细胞形态;用细胞增殖试剂盒(CCK-8)检测TSEF的增殖情况;利用流式细胞仪检测第3代和第5代细胞周期和凋亡的情况。结果:通过组织块贴壁法可以成功分离出树鼩的耳缘成纤维细胞,在倒置荧光显微镜下原代细胞呈现出长梭形、多触角、鱼群状等形态;细胞免疫荧光Vimentin呈现强阳性;TSEFVimentin mRNA的相对表达量与小鼠3T3 Swiss albino细胞Vimentin mRNA的相对表达量无明显差异(P>0.05)。HE染色结果显示,该细胞形态呈典型的长梭形或星形,细胞质染为淡紫色,细胞核着深紫色,为规则的卵圆形;检测原代细胞增殖情况,细胞增殖曲线呈典型的S形,且第2至第3天是细胞的最佳增殖期。第3代和第5代细胞在G0/G1期所占的比例没有明显地改变(P>0.05),且处于G0/G1期的细胞占主导地位;两代细胞的凋亡率较低且没有明显变化(P>0.05)。结论:组织块贴壁法可成功提取TSEF,且细胞在第3至第5代内生长状况良好,可用于体细胞核移植等科学研究活动。 展开更多
关键词 树鼩 耳缘成纤维细胞 组织块贴壁法 体细胞核移植 波形蛋白 细胞增殖
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异鼠李素对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制研究
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作者 冯冰华 粟小平 +3 位作者 李翠萍 韦珍夏 吕薇 黄旋平 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第12期1951-1957,共7页
目的:探讨异鼠李素对口腔鳞癌细胞(SCC-9、SAS)增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法:体外培养SCC-9、SAS细胞,加入不同浓度的异鼠李素,CCK-8法检测细胞活力。将SCC-9、SAS两种细胞分别分为3组:对照组(不予处理)、低剂量组和高剂量组... 目的:探讨异鼠李素对口腔鳞癌细胞(SCC-9、SAS)增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法:体外培养SCC-9、SAS细胞,加入不同浓度的异鼠李素,CCK-8法检测细胞活力。将SCC-9、SAS两种细胞分别分为3组:对照组(不予处理)、低剂量组和高剂量组。用平板克隆实验检测细胞集落形成情况,划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞水平及垂直迁移情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果:随着异鼠李素浓度增加,SCC-9、SAS细胞增殖抑制率升高(P<0.05)。与对照组相比,两种细胞的低剂量组和高剂量组克隆形成率和水平迁移率降低,垂直迁移细胞数减少,两种细胞的高剂量组细胞凋亡率升高(均P<0.05)。SCC-9、SAS细胞高剂量组PI3K110、PI3K85、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、S6、p-S6蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05)。结论:异鼠李素可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制口腔鳞癌细胞的增殖、迁移,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 异鼠李素 口腔鳞状细胞癌 增殖 迁移 凋亡
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基于TCGA数据库口腔鳞状细胞癌相关microRNA预后风险模型的建立
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作者 李晶晶 黄月娇 +4 位作者 冯焯明 余浩华 李炳锟 罗莹 粟小平 《大众科技》 2022年第9期107-111,共5页
目的:研究旨在通过检测microRNA(miRNA)的表达特征来预测口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者的存活率。方法:从TCGA数据库下载397名OSCC患者的表达谱数据及相应的临床信息。通过生物信息学的方法分析OSCC与正常组织间的差异表达的miRNA,使用Cox... 目的:研究旨在通过检测microRNA(miRNA)的表达特征来预测口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者的存活率。方法:从TCGA数据库下载397名OSCC患者的表达谱数据及相应的临床信息。通过生物信息学的方法分析OSCC与正常组织间的差异表达的miRNA,使用Cox回归分析和其他生物信息学方法筛选预后相关的miRNA。并应用采用Kaplan-Meier分析和、受试者工作特征(ROC)曲线分析评估所筛选的miRNA作为预后评估指标的可信度。结果:通过生物信息学的方法分析获得差异表达的miRNA363个,其中上调的miRNA197个,下调的miRNA166个(PDR<0.05)。通过单变量COX回归分析发现84个miRNA的表达与患者预后显著相关,将其中P<0.001的11个miRNA进一步进行多变量COX回归分析,其中4个miRNA(has-mi R-30e、has-mi R-337、has-mi R-6507、has-mi R-1251)纳入了风险评估模型。根据多因素COX分析的回归系数,构建由4个miRNA组成的预后风险评估模型,根据风险评分将OSCC患者分为高风险组和低风险组。Kaplan-Meier生存曲线表明高风险组生存率显著低于低风险组生存率(p=1.026e-05),构建的ROC曲线下面积AUC为0.669,C-index为0.63。结论:4个miRNA,has-mi R-30e、has-mi R-337、has-mi R-6507及has-miR-1251的组合可以作为预测OSCC患者预后的潜在标志物。 展开更多
关键词 TCGA OSCC MICRORNA 预后 风险
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水牛ALK5基因克隆分析与组织表达模式研究 被引量:1
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作者 朱鹏 赵鲜红 +4 位作者 粟小平 苏节 刘金凤 刘庆友 石德顺 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期9-13,246,共6页
为了阐明水牛ALK5基因在水牛卵泡发生过程中的作用,了解其在水牛不同组织中的表达模式,试验采用了RT-PCR及QRT-PCR方法对ALK5基因进行了研究,参考已公布的Gen Bank中牛ALK5基因序列,设计特异性引物应用RT-PCR方法扩增克隆获得目的基因片... 为了阐明水牛ALK5基因在水牛卵泡发生过程中的作用,了解其在水牛不同组织中的表达模式,试验采用了RT-PCR及QRT-PCR方法对ALK5基因进行了研究,参考已公布的Gen Bank中牛ALK5基因序列,设计特异性引物应用RT-PCR方法扩增克隆获得目的基因片段;应用生物信息学方法,系统分析和预测了水牛ALK5基因的遗传进化、蛋白质的理化性质、二级和三级结构,并应用QRT-PCR技术对ALK5基因在水牛组织的表达进行了差异分析。结果表明:水牛ALK5基因的编码区全长为1 512 bp,共编码503个氨基酸;水牛ALK5核苷酸序列与牛、绵羊、猪、人和小鼠相应序列的相似性分别为99%、97%、95%、93%和90%,结合系统进化树分析结果推测ALK5基因在不同物种以及进化的过程中具有高度保守性;该蛋白呈弱碱性,有信号肽,细胞亚定位于胞膜上,存在low complexity和GS结构,呈典型跨膜蛋白结构;水牛ALK5基因在肺脏、垂体、下丘脑组织中不表达,在水牛大脑、肝脏、骨骼、卵巢、肌肉和心脏等12个组织细胞中具有不同程度的表达,其中卵巢中表达量最高,心脏和肾脏次之,肌肉表达量最低。说明试验成功地克隆了沼泽型水牛ALK5基因,其具备典型的TGF-β受体家族结构,表达具有一定的组织特异性。 展开更多
关键词 水牛 ALK5基因 克隆分析 表达规律 卵泡发生
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水牛自噬相关基因克隆、序列分析及组织表达研究 被引量:1
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作者 雷薇 李卉 +3 位作者 粟小平 黄时海 石德顺 李湘萍 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期14-17,309,310,共6页
为了克隆水牛ATG5、LC3基因序列,并分析自噬相关基因在水牛各组织中的表达情况,试验采用RT-PCR技术克隆了水牛自噬相关基因ATG5、LC3序列,并对其CDS序列进行了生物学信息分析,同时利用QRT-PCR方法,对ATG3、ATG5、ATG6、ATG7、ATG12、LC3... 为了克隆水牛ATG5、LC3基因序列,并分析自噬相关基因在水牛各组织中的表达情况,试验采用RT-PCR技术克隆了水牛自噬相关基因ATG5、LC3序列,并对其CDS序列进行了生物学信息分析,同时利用QRT-PCR方法,对ATG3、ATG5、ATG6、ATG7、ATG12、LC3、BECN1 7个基因在胎水牛心脏、肝脏和肌肉等9种组织、成年水牛卵巢中的mRNA表达水平进行了分析。结果表明:克隆得到水牛ATG5基因序列980 bp,其中包括CDS序列828 bp,预计编码275个氨基酸;水牛LC3基因mRNA序列全长499 bp,包括CDS序列378 bp,预计编码125个氨基酸;所分析的7个自噬相关基因在10种水牛组织中均有不同程度的表达。 展开更多
关键词 水牛 ATG5 LC3 基因克隆 表达模式
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二苯乙烯苷对口腔鳞癌细胞SCC-9增殖、迁移及凋亡的作用机制研究 被引量:3
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作者 过禾佳 李翠萍 +5 位作者 粟小平 冯冰华 廖凯彬 何雨亮 吕薇 黄旋平 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期308-312,共5页
目的探讨中药单体二苯乙烯苷(TSG)对口腔鳞癌细胞SCC-9增殖、迁移及凋亡的影响及其分子机制。方法将SCC-9细胞分为3组:空白对照组(0μmol·L^(-1)TSG)和低、高2个浓度实验组(14,28μmol·L^(-1)TSG)。用划痕实验和Transwell迁... 目的探讨中药单体二苯乙烯苷(TSG)对口腔鳞癌细胞SCC-9增殖、迁移及凋亡的影响及其分子机制。方法将SCC-9细胞分为3组:空白对照组(0μmol·L^(-1)TSG)和低、高2个浓度实验组(14,28μmol·L^(-1)TSG)。用划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞迁移水平,用流式细胞仪测定凋亡率,用实时荧光定量-PCR法检测抗凋亡基因B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)基因表达水平,用蛋白印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B (Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达水平。结果空白对照组和低、高2个浓度实验组于24 h的平均水平迁移率分别为(48.00±5.87)%,(19.30±1.34)%和(17.16±1.50)%;这3组的垂直迁移细胞数分别为73.00±9.17,32.67±3.21和24.33±4.04;这3组的细胞凋亡率分别为(11.10±0.70)%,(23.17±1.03)%和(36.10±1.32)%;这3组的bcl-2基因的相对表达水平分别为1.03±0.02,0.39±0.09和0.15±0.04;这3组的PI3K蛋白表达水平分别为0.18±0.02,0.14±0.01和0.15±0.01;这3组的Akt蛋白表达水平分别为0.26±0.03,0.13±0.01和0.19±0.01;这3组的mTOR蛋白表达水平分别为0.47±0.05,0.38±0.01和0.34±0.02。上述指标:低、高2个浓度实验组与空白对照组相比,差异均有统计学差异(均P<0.05)。结论 TSG具有抑制口腔癌细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡的抗癌特性,并可抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达。 展开更多
关键词 二苯乙烯苷 口腔鳞状细胞癌 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B-雷帕霉素靶蛋白信号通路
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