富血小板血浆联合人重组骨形态形成蛋白-2诱导羊脂肪基质干细胞成骨化趋势的研究

目的探讨如何优化羊等大型哺乳类动物的脂肪基质干细胞（ADSCs）的生物活性及适应体外成骨分化，并建立一种羊脂肪基质干细胞体外诱导成骨的改良方法。方法从2013年3月至2014年9月，取安哥拉羊静脉血制备自体源性富血小板血浆（PRP），并取羊腹部脂肪，经系列原代与传代培养，如下诱导羊骨化脂肪基质干细胞．并分为4组：联合诱导组（富血小板血浆加人重组骨形态发生蛋白-2加ADSCs）、成骨因子组（人重组骨形态发生蛋白-2加ADSCs）、常规诱导组（地塞米松加抗坏血酸加甘油磷酸钠加ADSCs）及非诱导组（空白诱导），第1、3、5、7、9、13、17和21天，倒置显微镜观察，茜素红及VonKossa染色，测定增殖、I型胶原及骨钙素（OC）含量。对各组间差异进行单因素方差分析和最小显著差异t检验，SPSS11．0统计软件进行统计学分析。结果与其他组相比，联合诱导组细胞体积明显增大，胞浆中的细胞器发达，细胞生长旺盛、细胞外基质矿化结节丰富，呈集落状层叠分布：矿化结节出现时间及分布规律：联合诱导组〉成骨因子组〉常规组〉非诱导组；ALP表达时效及强度情况：联合诱导组〉成骨因子组〉常规组〉非诱导组；此外，第13天时联合诱导组增殖活力、I型胶原分别为（0．82±0．19）AU、（79．82±1．36）μg／ml，第17天时0C含量为（78．51±4．32）μg／ml]，均高于其它组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PRP联合rhBMP-2能通过协同机制，发挥强化ADSCs诱导成骨效应，为一种可行的优化成骨诱导方法。