实施减肥增效 推进农业绿色发展

江苏省睢宁县是传统的农业大县,全县耕地面积155万亩。近年来,睢宁把化肥减量增效作为推进农业绿色发展的重要抓手,多措并举,取得了一定成效。2019年上半年,全县施肥总量6.91万吨(折纯),实现比上年同期减肥650吨(折纯),减少1%;比2015年同期施肥总量7.2万吨(折纯)减少4%。

短期热量限制对雄性大鼠睾丸形态和抗氧化能力的影响

本文旨在研究短期热量限制对雄性大鼠睾丸形态和抗氧化能力的影响。将20只6周龄Wistar雄性大鼠随机分为对照组(C)和短期热量限制组(CR)(n=10),对照组自由采食,热量限制组按对照组食物消耗量的60%进行饲喂。连续饲养7周后称重,观察精神状态,处死,采集睾丸组织。对大鼠睾丸组织进行HE染色、紧密连接蛋白(ZO-1)免疫荧光染色;通过生化技术测定超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力及过氧化产物丙二醛含量;荧光定量PCR检测ZO-1、超氧化酶歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽巯基转移酶和转录因子Nrf2 mRNAs的表达变化。与对照组相比,短期热量限制组大鼠体重上升趋势减缓,精神状态好于对照组,曲细精管生长良好,基膜完整,管内各级生精细胞排列整齐,生精上皮普遍可见有6-8层细胞。短期热量限制组与对照组相比ZO-1 mRNAs表达显著升高,同时在免疫荧光结果中观察到ZO-1蛋白有较强的阳性反应。此外,短期热量限制组睾丸组织相较于对照组丙二醛含量显著降低(P<0.05),超氧化酶歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力显著升高(P<0.05);短期热量限制组相较于对照组抗氧化编码基因SOD、CAT、GST和Nrf2 mRNAs水平显著升高(P<0.05)。短期热量限制可以促进大鼠睾丸支持细胞间的紧密连接,改善精子发育微环境,提高大鼠睾丸组织的抗氧化能力,减少自由基对细胞的毒性作用,改善大鼠生殖机能。

神经肽W对猪睾丸间质细胞增殖和睾酮分泌的影响

为了明确神经肽W(NPW)对猪睾丸间质细胞功能的影响,本试验采用RT-PCR和免疫荧光(IFA)技术研究了NPW受体NPBWR1(GPR7)、NPBWR2(GPR8)基因和蛋白在睾丸间质细胞的表达与分布,用MTT法和放射免疫分析(RIA)技术研究了不同浓度的NPW(NPW-30)对睾丸间质细胞增殖和睾酮分泌的影响。结果表明,NPBWR1和NPBWR2 mRNA在猪睾丸间质细胞中表达,NPBWR1在睾丸间质细胞上分布;10-6和10-8mol/L NPW处理睾丸间质细胞24 h可分别极限著或显著促进睾酮的分泌(P<0.01,P<0.05),10-10mol/L NPW可极显著促进睾丸间质细胞的增殖P<0.01)。研究结果提示,NPW可促进猪睾丸间质细胞的增殖和睾酮的分泌,进而参与生殖的调控。

基于血清代谢组学研究Kisspeptin对热应激大鼠的保护作用

运用代谢组学方法研究神经肽Kisspeptin对热应激大鼠的保护作用。本试验通过建立热应激大鼠模型,基于气相色谱-飞行时间质谱联用技术(GC/TOFMS)代谢组学方法检测大鼠血清中内源性代谢物,并采用主成分分析及偏最小二乘判别法分析对照组、热应激组和Kisspeptin干预组之间的代谢物差异,筛选出潜在的生物标志物。代谢组学结果显示热应激组大鼠的血清代谢谱与正常对照组大鼠明显不同,而Kisspeptin干预后大鼠的血清代谢谱有趋于正常的趋势。生化代谢通路分析结果显示热应激引起大鼠三羧酸循环、糖代谢、氨基酸和核苷酸代谢异常,而热应激后给与Kisspeptin处理可缓解上述代谢通路的紊乱并趋于正常状态。此外,氧化应激指标检测结果显示给与Kisspeptin处理可降低热应激大鼠血清中丙二醛(MDA)含量,并提高超氧化酶歧化酶(T-SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,该结果表明Kisspeptin在一定程度上缓解了热应激诱导的氧化应激。该研究从代谢及抗氧化的角度研究了Kisspeptin对热应激大鼠的保护作用,为动物健康养殖和开发抗热应激的安全生物制品提供试验依据。

基于GC/TOF-MS技术研究猪健康大卵泡和中等卵泡液的代谢变化

为研究国内猪卵巢卵泡液的代谢组分轮廓特征以及由中等卵泡发育为大卵泡过程中的代谢成分变化,运用气相色谱-飞行时间质谱联用技术（GC/TOF-MS）对采自屠宰场三元杂交母猪卵巢中的11份大卵泡液（直径5-8 mm）和12份中等卵泡液（直径3-5 mm）进行代谢物检测,并采用主成分分析（PCA）及偏最小二乘判别法（PLS-DA）分析方法对数据进行多元统计分析。结果显示：猪大卵泡与中等卵泡液的代谢谱明显不同,共有33种差异代谢物与卵泡大小密切相关;与中等卵泡液相比,大卵泡液中α-酮戊二酸、葡萄糖1-磷酸、脯氨酸的浓度极显著升高（P〈0.01）,葡萄糖浓度显著升高（P〈0.05）,其他如氨基酸、脂肪酸在内的绝大多数代谢物浓度均显著性降低（P〈0.05）;代谢物通路富集分析显示差异代谢物主要与三羧酸循环、糖代谢、氨基酸代谢和核苷酸代谢等代谢通路相关。结果表明：应用GC/TOF-MS技术可有效筛选出猪不同大小卵泡之间的卵泡液差异代谢物,这些差异代谢物提示卵泡发育过程涉及很多代谢通路的变化,这为今后利用人工干预手段对卵泡发育进行调控提供参考依据,同时为猪卵母细胞发育潜能和早期胚胎发育研究提供一个新思路。

Kisspeptin-10对热应激引起大鼠心肌损伤的影响

试验旨在探究kisspeptin-10对热应激造成的大鼠心肌损伤的影响及其分子机制。将24只SD雄性大鼠随机分为3组(对照组、热应激组和热应激后kisspeptin-10皮下注射组),每组8只。诱导发生热应激后采用透射电镜、HE染色和masson染色来观察心脏组织病理变化情况;并采用RT-PCR技术检测与心肌损伤通路相关基因ITGA4、ITGB8、BNP、MYL7、HIF-1α和ITGB7的mRNA在心肌中的变化;用Western-Blot验证其关键蛋白ITGB8和BNP表达的变化。与对照组相比,热应激组(H)出现心肌损伤现象;热应激后kisspeptin-10皮下注射组(KH)与热应激组(H)相比,心肌纤维排列较整齐,细胞核染色较均匀,纤维增生减少,线粒体空泡和线粒体嵴断裂现象明显减少;另外,心脏组织中ITGB8和BNP在热应激组(H)发生上调,而热应激后kisspeptin-10皮下注射组(KH)与热应激组(H)相比显著下调。本研究从形态学和分子机制方面探究kisspeptin-10缓解SD大鼠由热应激所致心肌损伤的途径。一方面ITGB8作为心肌细胞膜的异二聚体在热应激后表达发生变化,另一方面热应激后心肌组织形态学上的改变。这些由热应激引起紊乱的在kisspeptin-10干预后有趋于正常表现,为进一步研究kisspeptin-10在热应激导致心肌损伤中的缓解作用机制提供了理论基础。

miR-15a对猪卵泡颗粒细胞BDNF基因表达的影响

为探索miR-15a对猪卵泡发育的影响,选取健康大卵泡、中等卵泡和闭锁卵泡,研究不同卵泡中miR-15a的相对表达量以及其是否对卵巢颗粒细胞中有BDNF表达具有调节作用。分别抽取直径3-5 mm、大于5 mm健康卵泡和3-5 mm闭锁猪卵泡,采用q PCR检测发现闭锁卵泡中miR-15a表达显著升高。免疫组化结果显示中等健康卵泡颗粒细胞上BDNF、Tr KB均有表达,而在靠近卵泡腔的凋亡颗粒细胞BDNF免疫阳性反应较弱。分离培养猪卵巢颗粒细胞,过表达miR-15a能显著上调BDNF基因表达水平,Bcl-2基因表达有下降趋势但差异不显著;抑制miR-15a表达能显著抑制BDNF、bcl-2基因表达水平。Western-Blot结果发现,过表达miR-15a显著下调BDNF蛋白水平,而抑制miR-15a表达则能显著上调BDNF蛋白水平。实验结果显示miR-15a可能经由其靶基因BDNF参与猪卵泡的发育和闭锁。