琼脂糖/明胶/透明质酸/细胞外基质水凝胶的制备与性能表征

背景:由于软骨组织无血管结构,无神经组织,缺乏自我修复与再生的内在能力,因此临床上软骨损伤的修复仍然是一个重大挑战。目的:旨在制备一种温敏性可注射生物活性水凝胶,用于软骨组织工程。方法:将0.4%琼脂糖、10%明胶和10 g/L透明质酸溶液混合,制备琼脂糖/明胶/透明质酸水凝胶,然后向其内分别加入0,10,20,30 g/L的软骨细胞外基质,制备4种温敏性可注射生物活性水凝胶,进行扫描电镜、透射电镜、平衡溶胀率、生物力学强度和体外降解率检测。将含20 g/L软骨细胞外基质的温敏性可注射生物活性水凝胶与软骨细胞-骨髓间充质干细胞共培养,培养1,3,7 d,通过活/死细胞荧光双染法评价该水凝胶的细胞相容性。结果与结论:①扫描电镜显示,4种水凝胶均具有良好的三维网格结构,孔径较大;透射电镜显示,细胞外基质颗粒均匀分布于水凝胶中,颗粒粒径主要在50-200 nm;②随着加入细胞外基质颗粒质量浓度的增加,水凝胶的平衡溶胀率降低;③浸泡于PBS溶液4周时,含0,10,20,30 g/L细胞外基质水凝胶的体外降解率分别为42.32%,67.36%,89.05%和99.47%;④当添加细胞外基质颗粒质量浓度在0-20 g/L时,水凝胶的生物力学强度逐渐增加;⑤培养7 d内,软骨细胞-骨髓间充质干细胞在水凝胶内均匀地分布与生长,并不断增殖,细胞存活率均在90%以上;⑥结果表明细胞外基质颗粒修饰的琼脂糖/明胶/透明质酸水凝胶,是一种可用于软骨组织工程的良好医用生物材料。

强脉冲光对大鼠Ⅱ度烫伤模型的建立

为探索脉冲光对大鼠深Ⅱ度烫伤模型建立的实验条件,将24只大鼠随机分成四组,每组6只,选取大鼠脊柱两侧皮肤作为烫伤部位。第1组为正常对照组,第2、3、4组烫伤条件分别为强脉冲光照射7次、8次和9次,每次能量为20 J/cm^2。建立模型后并进行组织形态学检查。结果表明:第2组大鼠为Ⅰ度烫伤,第3组大鼠为深Ⅱ度烫伤,第4组为Ⅲ度烧伤。大鼠模型制作过程中,烫伤的程度同时受照射次数、能量的影响。实验中所建立的大鼠深Ⅱ度烫伤模型制备方法可以通过控制光照强度和次数,利用强脉冲光建立模型操作简单,制造的损伤程度、损伤面积均匀,重复性好。

人脐带间充质干细胞诱导的胰岛样细胞不同途径移植治疗1型糖尿病鼠

背景:人脐带间充质干细胞诱导的胰岛样细胞移植于1型糖尿病鼠体内,会使血糖降低,糖尿病症状有所改善,但腹腔移植的方式少有报道。目的:观察不同途径移植人脐带间充质干细胞诱导的胰岛样细胞对于1型糖尿病小鼠的治疗效果。方法:选采用组织块贴壁法分离培养人脐带间充质干细胞,然后将其定向分化为胰岛样细胞。从15只雄性C57BL/6J小鼠中随机取3只小鼠做正常组,其余12只小鼠腹腔注射链脲佐菌素制备1型糖尿病模型。造模成功9只小鼠随机分为糖尿病组、尾静脉-胰岛样细胞组、腹腔-胰岛样细胞组,每组3只。造模10 d后,正常组和糖尿病组不予处理,尾静脉-胰岛样细胞组经尾静脉注射0.4 mL胰岛样细胞悬液(含5×10^5个细胞),腹腔-胰岛样细胞组经腹腔注射0.4 mL胰岛样细胞悬液(含5×10^5个细胞)。移植后每周检测2次血糖,移植后28 d进行葡萄糖耐量实验,移植后42 d检测胰岛素水平。结果与结论:①与糖尿组相比,尾静脉-胰岛样细胞组在移植后第10天开始血糖明显下降,一直维持到31 d,胰岛素水平升高,葡萄糖耐量改善,差异有显著性意义(P<0.05);腹腔-胰岛样细胞组血糖、胰岛素水平、葡萄糖耐量未见明显改善;②结果提示,应用人脐带间充质干细胞诱导的胰岛样细胞治疗1型糖尿病鼠,尾静脉注射是一种比较理想的移植方式,腹腔注射的效果不佳。