双清论坛:自然科学发展的推进器——访国家自然科学基金委员会政策局局长韩宇

说起“双清论坛”这个名称，也许很多人并太熟悉，但“双清论坛”每期研讨的话题，却因涉及到了我国科学前沿或围家发展战略需求的深层次科学问题、学科交叉与综合的重大基础科学问题、发展与完善科学基金制的重大政策与管理问题，在业内十分引人注目。

我们应尽快建立国民急救教育体系——访中国工程院院士、山东大学副校长张运教授

采访张运院士,是记者＂蓄谋已久＂的事情,但约了几次,都因为种种原因没有成行。在2011年12月召开的2011年国家自然科学基金委员会主办的＂双清会＂上,记者终于有机会与张运院士就我国心血管急救方面的话题,作了面对面的交流。

NAD延缓背根神经节轴突变性的实验研究

目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)对神经轴突变性的保护作用。方法用长春新碱处理原代培养的背根神经节细胞,建立轴突变性细胞模型,然后加入不同浓度的NAD,观察神经轴突生长状况,MTT检测背根神经节细胞的生长活性,行神经丝蛋白(NF)免疫组化染色观察神经轴突的变化。结果损伤组加入长春新碱8 h后,轴突远端发生典型的轴突变性,12 h后轴突肿胀,断裂,24 h后见不到完整的轴突结构。保护组加入NAD后可明显延缓轴突变性,在12 h后仍能保持比较完整轴突结构,24 h后远端发生轻微变性。MTT结果显示:NAD保护组可提高细胞存活率(P<0.01)。轴突计数显示:NAD保护组在加入长春新碱后12 h,只有35%左右的轴突发生变性,而损伤组却高达60%的轴突发生了变性(P<0.01)。结论NAD对轴突变性具有明显的保护作用,可延缓轴突变性。

躯干神经嵴干细胞体外分离培养及其增殖、分化的实验研究

目的体外分离培养鉴定躯干神经嵴干细胞,探讨其生物学特性,为研究周围神经再生修复提供新的细胞来源。方法取大鼠胚胎躯干部神经管,组织块法培养获取躯干神经嵴干细胞,通过形态学及免疫细胞化学观察其细胞生长、增殖、分化等特性。结果原代培养的躯干神经嵴干细胞呈梭形,其特异性标记物nestin和p75表达阳性,并有较高的增殖活性。传代培养后,在含血清培养基中,其分化细胞呈GFAP、MAP-2、α-SMA阳性。结论成功地培养了躯干神经嵴干细胞,细胞表现出多潜能干细胞特性,为研究周围神经组织工程种子细胞来源提供实验依据。

SIRT1在NAD保护神经轴突作用中的表达变化

目的探讨沉默信号调控因子(SIRT1)在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)保护神经轴突中的作用。方法应用长春新碱毁损法制备背根神经节轴突变性细胞模型,应用透射电镜、RT-PCR、Western blot方法,观察正常背根神经节培养组、长春新碱毁损组、NAD保护组神经轴突的生长变化、超微结构变化和SIRT1 mRNA及SIRT1蛋白的表达变化。结果NAD保护组毁损8h后轴突远端始发生轻微肿胀,断离。透射电镜结果显示,长春新碱毁损组轴突肿胀,大量髓样小体出现,微丝微管排列紊乱,聚集,溶解,被絮状沉淀物和膜性结构所代替。NAD保护组可见较多平行排列的微丝微管,轴突肿胀较轻。RT-PCR结果显示,NAD保护组的SIRT1基因表达较毁损组上调。Western blot结果显示,损伤组可见其蛋白表达量明显降低,NAD保护组中SIRT1蛋白表达较毁损组上调。结论SIRT1参与NAD对轴突变性的保护作用。

神经上皮干细胞粘附壳聚糖纤维生长分化的实验研究

目的检测神经上皮干细胞与壳聚糖纤维的生物相容性,并探讨其在壳聚糖纤维材料上的生长、分化情况。方法从胚胎神经管取材神经上皮干细胞,并与壳聚糖纤维进行体外共培养。采用MTT法检测细胞在壳聚糖纤维上的活性,采用光镜和扫描电镜技术观察细胞在壳聚糖纤维上的存活、生长状况,采用免疫细胞化学染色鉴定神经上皮干细胞的分化情况。结果神经上皮干细胞可以贴附在壳聚糖纤维表面生长,并可分化为神经元和神经胶质细胞,细胞活性与单纯神经上皮干细胞培养组没有明显差别。结论壳聚糖纤维与神经上皮干细胞有良好的生物相容性,二者在外周神经损伤的治疗中具有良好的应用前景。