薯蓣皂苷对烟曲霉菌性角膜炎的作用及其机制

目的探究薯蓣皂苷(DS)对烟曲霉菌(AF)性角膜炎的作用及其机制。方法通过细胞存活实验(CCK-8)和Draize眼表毒性实验分别检测DS对RAW264.7细胞和小鼠角膜的毒性作用;应用扫描电子显微镜、透射电子显微镜、碘化丙啶摄取实验评估DS的抗真菌作用;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测RAW264.7细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和核因子-红细胞2相关因子2(Nrf2)mRNA的表达,评估DS的抗炎作用;在AF性角膜炎小鼠模型中,通过裂隙灯拍照临床评分评估DS对AF性角膜炎的改善作用;通过平板菌落计数和苏木精-伊红(HE)染色分别评估DS在体内的抗真菌及抗炎作用。结果CCK-8和Draize眼表毒性实验结果显示,16 mg/L的DS对RAW264.7细胞和小鼠角膜无明显毒副作用(P>0.05);扫描电子显微镜、透射电子显微镜观察显示,16 mg/L的DS能够使菌丝萎缩变形、破坏真菌细胞器及细胞膜;碘化丙啶摄取实验显示,16 mg/L的DS能够破坏细胞膜完整性;qRT-PCR检测显示,16 mg/L的DS可以显著升高Nrf2的mRNA表达,并抑制炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达(F=40.31~126.81,P<0.001);临床评分、平板菌落计数和HE染色结果均表明,16 mg/L的DS可以明显改善AF引起的角膜炎症反应(F=18.27,P<0.001),降低真菌负荷(t=8.78,P<0.05)以及减少炎症细胞的浸润。结论DS可通过抗真菌和抗炎作用改善AF性角膜炎。