链脲佐菌素致迟发型大鼠1型糖尿病模型的研究

目的探讨链脲佐菌素(streptozocin,STZ)致迟发型大鼠1型糖尿病模型建立的方法。方法将8只大鼠随机分为对照组3只,实验组5只;实验组将福氏完全佐剂(CFA)与小剂量STZ联合使用,连续3周大鼠腹腔注射,制造Wistar大鼠1型糖尿病模型,并对2组大鼠的进食量、饮水量、尿量、体重、血糖及尿糖进行密切监测,同时对实验组及对照组大鼠进行葡萄糖耐量实验(OGTT)。结果3只大鼠(60%)成模,实验组大鼠表现出多饮、多食、多尿、高血糖、高尿糖的1型糖尿病典型症状,与对照组大鼠的各项指标差异均有统计学意义(P<0.05),且实验组大鼠表现出葡萄糖耐量异常。结论CFA与小剂量STZ联合使用可制造Wistar大鼠1型糖尿病模型。

实时定量PCR法检测生物技术药物中宿主基因组DNA残留

利用基于SYBR GreenⅠ荧光染料的实时定量PCR方法检测酵母表达生物技术药物产品中宿主DNA残留量。该方法检测灵敏度可达到1.0 fg/μL,DNA浓度在1.0 fg/μL^1.0 ng/μL范围内线性良好,其标准曲线的相关系数为0.99以上。应用该方法对3批不同实验样本进行测定,宿主DNA残留量分别为8.635×105fg/μL、6.265×102fg/μL和1.436 fg/μL。实验表明该方法操作简便、灵敏度高,可用于生物技术药物产品中酵母DNA残留的定量测定。

氨苄西林细菌内毒素检查的研究

目的 :建立氨苄西林细菌内毒素检查方法。方法 :按 2 0 0 0年版《中国药典》附录细菌内毒素检查法操作。结果 :氨苄西林在浓度 3.33mg/ ml时对鲎试剂与内毒素反应无干扰因素影响。结论 :细菌内毒素检查法适用于检测氨苄西林中的内毒素。

人皮肤成纤维细胞系的鉴定及老化检测

目的探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的方法。方法以包皮组织为材料,采用胶原酶消化,分离、培养细胞,倒置显微镜观察,同时进行免疫细胞化学鉴定和β-半乳糖苷酶染色。结果分离的成纤维细胞可在体外快速贴壁生长、增殖。波形蛋白免疫细胞化学染色95%以上为阳性。随成纤维细胞的连续传代培养β-半乳糖苷酶表达呈递增趋势。结论该方法在体外可以获得高纯度的成纤维细胞。