β-谷甾醇靶向CDC25B抑制肝癌细胞增殖

【目的】探讨β-谷甾醇对肝癌细胞增殖的影响及其可能作用机制。【方法】通过SwissTarget和TargetNet数据平台预测β-谷甾醇的靶点、GEO2R分析GSE101728肝癌数据集中表达上调基因并分析两者共同基因,通过下载TCGA_LIHC数据矩阵分析得到细胞分裂周期25B(CDC25B)与肝癌临床分期和患者生存预后存在关系。CCK-8、细胞集落形成实验、流式细胞法检测β-谷甾醇作用下肝癌细胞HepG2和Hep3B细胞活力、细胞增殖、细胞周期分布和细胞凋亡情况;构建HepG2皮下移植瘤裸鼠模型分为Control组和β-谷甾醇组,β-谷甾醇组腹腔注射β-谷甾醇(50 mg/kg·d),测量移植瘤体积和质量,免疫组化检测Ki67表达水平;Western blot检测β-谷甾醇不同作用浓度和不同作用时间HepG2和Hep3B细胞系中CDC25B蛋白水平,构建稳定过表达CDC25B的HepG2和Hep3B细胞系并给予β-谷甾醇处理,同上方法检测HepG2和Hep3B细胞系细胞活力、细胞增殖、细胞周期分布和细胞凋亡情况。【结果】CDC25B表达水平,肝癌组织高于其癌旁组织(P<0.05),TNM分期(T2-4)高于TNM分期(T1)(P<0.05),肝癌临床分期Ⅱ-Ⅳ高于临床分期I(P<0.05),肝癌G3-4分化高于G1-2分化(P<0.05),复发患者高于未复发者(P<0.05),预后不良者高于预后良好者(P<0.05);CDC25B高表达组患者的总生存率低于CDC25B低表达组(P<0.05)。Hep3B和HepG2的细胞活力随着β-谷甾醇作用剂量增加、作用时间延长而降低,Hep3B(β-谷甾醇15µmol/L)和HepG2(β-谷甾醇18µmol/L)的相对克隆数目、S期细胞百分比均显著低于Control组(P<0.05),而G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率均显著高于Control组(P<0.05)。β-谷甾醇组移植瘤的体积、质量和Ki67相对表达水平均显著低于Control组(P<0.05)。Hep3B和HepG2细胞中的CDC25B蛋白表达均随着β-谷甾醇浓度增加、作用时间延长而减低,Hep3B和HepG2细胞的β-谷甾醇+CDC25B组的细胞生长、相对克隆数目、S期细胞百分比均显著高于β-谷甾醇组(P<0.05),而G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率均显著低于β-谷甾醇组(P<0.05)。【结论】β-谷甾醇可促进肝癌细胞凋亡和抑制细胞增殖,其抑制细胞增殖可能与抑制CDC25B蛋白表达有关。

2015—2020年达州市手足口病流行特征分析

目的 分析2015—2020年达州市手足口病和病原学流行现状,为达州市手足口病防控提供科学依据。方法 对中国疾病预防控制信息系统中2015—2020年现住址为达州市的手足口病例信息和达州市疾控中心实验室病原学资料进行统计分析,率的比较采用χ^(2)检验,检验水准α=0.05。结果 2015—2020年达州市共报告手足口病例17 108例,年平均发病率为50.49/10万,偶数年发病率高于奇数年,各县(市、区)每月均有病例报告,发病呈现5-7月和10-11月两个高峰;男女比为1.49∶1,男性发病高于女性,5岁以下儿童占96.76%,以散居儿童为主,幼托儿童次之;共检测1 728份标本,阳性率为69.97%,EV 71构成比降至1%以下,其他肠道病毒构成比升高。结论 达州市2015—2020年手足口病处于低流行状态,呈现明显季节性和周期性,防控重点在两个高峰时间和5岁以下儿童,优势毒株为其他肠道病毒,需进一步强化社区健康教育工作,并尽快开展其他肠道病毒分型工作,明确当前流行毒株。