红景天苷对大鼠脑缺血再灌注损伤抗氧化活性的实验研究

目的观察红景天苷(Salidroside,Sal)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察红景天苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经功能障碍,脑水肿及脑梗塞范围以及对脑缺血2 h再灌注24 h缺血脑组织能量物质ATP、葡萄糖无氧酵解产物以及体内自由基清除剂SOD、GSH和脂质过氧化产物MDA等生化物质的影响。结果脑缺血2 h再灌注24 h腹腔注射Sal 24.5 mg.kg-1和60 mg.kg-1可明显减轻神经功能障碍(P<0.05),减轻脑水肿(P<0.05)及缩小脑梗塞范围(P<0.05)。同时Sal 24.5 mg.kg-1组和60 mg.kg-1组与缺血再灌注组相比,缺血脑组织内SOD活性和GSH活力明显增高(P<0.05,P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),大鼠脑组织内ATP含量显著升高(P<0.05,P<0.01),脑组织内LA含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论红景天苷对局灶性脑缺血再灌注损伤有良好的保护作用。其机制与其改善缺血脑组织能量代谢、降低自由基损伤有关。

红景天苷对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力和海马组织Aβ含量及p75NTR表达的影响

目的探讨红景天苷对Aβ1~40所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力,p75NTR信号通路关键蛋白表达和β-淀粉样蛋白(Aβ)含量的影响。方法选取96只雄性SD大鼠,随机分为假手术组,模型对照组,红景天苷小、中、大剂量组,石杉碱甲组,每组16只。除假手术组外,各组大鼠均于双侧海马CA1区缓慢注射Aβ1~40各1μL(10μg)制备AD大鼠模型,假手术组则注射等量0.9%氯化钠溶液。红景天苷小、中、大剂量组分别于术后24 h灌胃红景天苷25,50,100 mg·kg^(-1),石杉碱甲组给予灌胃石杉碱甲50 mg·kg^(-1),假手术组及模型对照组灌胃等量0.9%氯化钠溶液,共21 d。给药结束后经Morris水迷宫实验观察红景天苷对模型大鼠学习记忆能力的影响,并采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清与海马组织中Aβ的含量,免疫组化法检测海马区神经元中p75NTR和p-JNK蛋白表达。结果与模型对照组比较,红景天苷小、中、大剂量组大鼠在水迷宫训练中潜伏期明显缩短(P<0.05或P<0.01),而水迷宫测试中跨越平台的次数显著增加(P<0.05或P<0.01);红景天苷小、中、大剂量组血清与海马组织中Aβ含量显著降低;海马神经元p75NTR、p-JNK表达显著减少(P<0.05或P<0.01)。结论红景天苷可改善Aβ1~40所致学习记忆障碍模型大鼠学习记忆能力,其作用机制可能与其抑制p75NTR对Aβ的调控通路,减少Aβ的神经毒性作用,从而使海马神经细胞凋亡减少有关。

红景天苷对脑缺血再灌注大鼠行为及脑梗塞范围的影响

目的观察红景天苷(Sal)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,再灌注同时各给药组腹腔注射相应的药物Sal和Nim,对大鼠进行神经功能评分,观察脑梗塞范围并测定脑含水量。结果模型组大鼠脑缺血2h再灌注24h后神经功能评分2.13±0.31,Sal大、中剂量组神经功能评分显著升高(均P<0.01)。模型组脑梗塞范围达(29.7±6.3)%,脑含水量为(86.55±0.45)%,Sal大、中剂量组脑梗塞范围显著缩小(P<0.01,P<0.05),脑含水量显著减少(P<0.01,P<0.05)。结论红景天苷对局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用。

儿童血友病A伴凝血因子抑制物合并肺部感染的药学监护

目的 介绍1例血友病A并发凝血因子抑制物合并肺部感染患儿的药物治疗过程及药学监护,为临床药师参与罕见病儿童患者的多学科照护提供借鉴。方法 通过对患儿的治疗全程进行药学监护,结合临床病例特点,分析患儿止血、退热、抗感染药物治疗方案,总结血友病患儿临床药学服务切入点及药学服务。结果 该患儿经多学科治疗后出血停止,口腔创口愈合,肺部感染好转,未监测到血栓形成等不良反应。结论 临床药师在血友病患儿的多学科诊疗过程中可以联合用药及辅助用药的合理性、优化患儿家庭治疗管理等方面为切入点,提供高质量临床药学服务。

1例儿童肝豆状核变性并发肝损害的药物治疗分析和药学监护

目的分析总结1例儿童肝豆状核变性(WD)并发肝损害的药物治疗,为WD患儿的药学服务提供借鉴。方法通过梳理患儿疾病治疗过程,基于文献调研分析药物治疗方案,寻找临床药学服务切入点,进行药学监护、用药指导和健康教育。结果患儿在临床药师参与的多学科照护下,肝功能逐渐恢复正常,最后病情好转出院。结论临床药师应积极参与罕见病儿童患者治疗,提供高质量临床药学服务。

LC-MS/MS法测定抑郁症患者晨尿中9种氨基酸类内源性物质的浓度

目的:建立测定人体尿液中5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、马尿酸、庚二酸、脯氨酸、酪氨酸、色氨酸、酪胺、缬氨酸浓度的方法。方法:采集抑郁症患者的晨尿,加入内标可的松,以乙腈处理后取上清液进行浓缩,采用液相色谱-质谱串联法(LC-MS/MS)进行分析。色谱柱为XTerra RP18;流动相A相为0.1%乙酸-水,流动相B相为0.1%乙酸-乙腈(梯度洗脱);柱温为40℃;流速为0.45mL/min;采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测方式(MRM)进行定量分析,5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、马尿酸、庚二酸、脯氨酸、酪氨酸、色氨酸、酪胺、缬氨酸和内标可的松在正离子模式下定量分析离子对分别为质荷比(m/z)192.2→146.1、147.2→130.0、180.1→105.1、161.1→125.2、116.1→70.2、205.2→188.2、138.2→121.1、182.0→123.0、118.2→72.1、361.2→163.0。结果:5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、缬氨酸、庚二酸、脯氨酸、酪胺的检测质量浓度范围为10.00~3 200 ng/mL(r=0.993 8~0.998 9,n=6),定量下限为10 ng/mL;色氨酸、酪氨酸、马尿酸的检测质量浓度范围为1 600~51 200 ng/mL(r=0.999 2~0.999 7,n=6),定量下限为1 600ng/mL,准确度试验结果为86.29%~98.65%(n=6),日内、日间精密度试验的RSD均不高于14.65%(n=6),基质效应的CV为6.18%~14.37%(n=6),提取回收率为86.21%~98.14%(n=6),稳定性试验的RE均<14.71%(n=3~6)。结论:该方法灵敏、准确,可用于测定人体内上述9种物质的浓度。

基于网络药理学探讨甘露消毒汤治疗新型冠状病毒肺炎的作用机制

目的:基于网络药理学的研究方法,探讨甘露消毒汤治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的可能机制。方法:采用SPSS Clementine 12.0软件对甘露消毒汤中所有药材的性味归经进行网络关联规则分析;通过中药系统药理学数据库和分析平台、中药系统药理学成分分析平台、中医药综合数据库等数据库,获取甘露消毒汤的活性成分和相对应的作用靶点;通过Gene Cards、人类孟德尔遗传综合数据库,查询物种为"Homo sapiens"对应COVID-19的相关基因,导入软件构建甘露消毒汤-COVID-19-靶点网络;采用STRING数据库,制作活性化合物作用靶点蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein Interaction,PPI)网络,采用R语言中Bioconductor程序包对作用靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,以预测其作用机制。结果:甘露消毒汤中的药材以性微寒,味辛苦,归心、肺、脾、胃经为主;甘露消毒汤中共得到219个药物靶点,COVID-19中共得到259个疾病靶点,最终取交集获得治疗关键靶点25个;GO功能富集得到74条GO条目;KEGG通路富集得到145条信号通路;PPI网络分析发现,EGFR、IL-6、MAPK8、CASP3、FOS、RELA、CASP8、NOS3、PPARG及ICAM1等靶蛋白可能是甘露消毒汤防治COVID-19疾病的潜在关键靶点。结论:甘露消毒汤中的槲皮素、木犀草素、汉黄芩素及山奈酚等成分可能为其治疗COVID-19的有效成分,其机制可能与上述成分作用于多个靶点来发挥抗炎、抗病毒,同时调节免疫等综合作用相关。

星点设计-效应面法优化PLGA-PEG纳米粒的处方工艺

目的:采用星点设计-效应面法优化载体基质为PLGA-PEG的siRNA纳米粒的制备工艺。方法:采用复乳法制备载药纳米粒,以二氯甲烷体积、吐温-80的质量分数和复乳的超声时间为试验因素,纳米粒的平均粒径、包封率和突释量为考察指标,根据星点设计原理安排实验和处方工艺优化。结果:成功制备了纳米粒。最佳工艺为二氯甲烷体积13 ml,乳化剂吐温-80的质量分数为3.1%,复乳的超声时间为2.8 min;按优化处方工艺制备的纳米粒的平均粒径(101.5±6.3)nm,包封率(57.6±4.8)%,体外48 h累积释放度高于80%。结论:星点设计-效应面法适用于PLGA-PEG纳米粒的工艺优化,所建立的数学模型预测性良好。

载siRNA的PLGA-b-PEG纳米粒制备及初步体外评价

目的 探讨载小干扰核糖核酸(siRNA)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物-b-聚乙二醇(PLGA-b-PEG)纳米粒的制备工艺,并对其进行表征及初步体外评价。方法 采用复乳法制备含药纳米粒。通过透射电子显微镜、原子力显微镜观察形态,Zeta电位/粒度分析仪测定Zeta电位及其粒径,计算包封率,考察稳定性、体外释药,并进行细胞增殖检测。结果 制备的纳米粒呈球形,粒径均匀,平均粒径为(101.5±6.3)nm,Zeta电位为-(31.7±4.5)mV,包封率为(57.6±4.8)%;在4℃条件下放置30 d,粒径和Zeta电位分别为(103.3±5.7)nm和-(32.5±5.2)mV;纳米粒体外可持续释药48 h以上,且超声可加速药物释放;siRNA纳米粒具有较强的肿瘤细胞活性抑制作用。结论 制备的纳米粒理化特性良好,性质稳定,具有一定的超声刺激释药特性。

沉默MPR1基因的壳聚糖/siRNA纳米粒的制备与初步表征

目的:构建一种能够沉默肿瘤多药耐药相关基因MPR1的小干扰RNA(siRNA)的基因转染载体。方法:采用天然来源的高分子材料壳聚糖(CS)作为沉默MPR1的siRNA递送载体材料,以三聚磷酸钠(TPP)作为交联剂,制备了CS与siRNA静电结合的交联纳米粒-CS/siRNA。同时制备不经TPP交联的CS与siRNA简单静电结合物CS-siRNA作为对照。分别对其进行理化性质表征、稳定性、体外释药、细胞毒性及细胞摄取研究。结果:与CS-siRNA相比,CS/siRNA具有更小的粒径、更高的药物包封率、更少的药物释放和更好的血清稳定性,对siRNA的缩合保护作用更好,且CS/siRNA的放置稳定性显著优于CS-siRNA。所制备的空白载体、CS/siRNA和CS-siRNA均无明显的细胞毒性。CS/siRNA的细胞摄取率和胞内分布均显著优于CS-siRNA。结论:本研究所制备的CS/siRNA有望提供一个有潜力的siRNA转染载体。

武汉地区314例消化系统疾病患者CYP2C19基因多态性分析

目的分析武汉地区消化系统疾病患者CYP2C19基因的多态性。方法选取2016年1月—2017年12月于湖北省武汉市第三医院行CYP2C19基因多态性检测的无血缘关系汉族消化系统疾病患者314例。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测质子泵抑制剂代谢相关酶CYP2C19基因型,根据基因型判断代谢表型,并分析性别、年龄及消化系统疾病临床分型与CYP2C19基因多态性的相关性。结果该研究共检测到8种基因型:CYP2C19~*1~*17、~*1~*1、~*1~*2、~*1~*3、~*2~*17、~*3~*17、~*2~*2及~*2~*3;4种代谢表型:超快代谢型为0.96%,快代谢型型为36.94%,中间代谢型型为45.54%,慢代谢型型为16.56%。不同年龄、性别及消化系统疾病临床分型患者CYP2C19基因型比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同性别、消化系统疾病临床分型患者代谢表型比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同年龄患者代谢表型比较,差异有统计学意义(P <0.05)。结论武汉地区消化系统疾病患者CYP2C19基因具有多态性,其等位基因频率和代谢表型分布情况与亚洲人群接近,与欧洲等其他国家人群存在明显差异。

红景天苷对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察红景天苷(salidroside,Sal)对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:采用线栓法制备老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察红景天苷对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经功能障碍,脑水肿及脑梗死范围以及对脑缺血2h再灌注24h缺血脑组织能量物质ATP、葡萄糖无氧酵解产物以及体内自由基清除剂SOD、GSH和脂质过氧化产物MDA等生化物质的影响。结果:脑缺血2h再灌注24h腹腔注射Sal40,20,10mg.kg-1可明显减轻神经功能障碍(P<0.05,P<0.01),减轻脑水肿(P<0.05,P<0.01)及缩小脑梗死范围(P<0.05)。同时Sal40,20,10mg.kg-1组与缺血再灌注组相比,缺血脑组织内SOD活性和GSH活力明显增高(P<0.05,P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),大鼠脑组织内ATP含量显著升高(P<0.05,P<0.01),脑组织内LA含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:红景天苷对老龄大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有良好的保护作用。其机制与其改善缺血脑组织能量代谢、降低自由基损伤有关。

70例脑梗患者CYP2C19基因多态性与中医证型分布的相关性

目的:探究脑梗患者CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17基因多态性与中医证型分布的相关性。方法:将我院2017年4月-2019年7月中医科的脑梗患者根据中医证型进行分型,并且采集其静脉血,提取基因组DNA,然后进行扩增及结果判定,观察CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17基因位点多态性与中医证型分布的相关性。结果:某院中医科的脑梗患者根据中医分型,分为阴虚风动型、气虚血瘀型、痰热腑实型和风痰瘀阻型,其中,气虚血瘀型占比50%,占比明显高于其他证型(P<0.05)。基因检测分析发现,脑梗患者CYP2C19基因的突变易发于2、3位点,CYP2C19*2突变等位基因频率为0.3072;CYP2C19*3突变等位基因频率为0.0857;CYP2C19*17突变等位基因频率为0.0215。其中,气虚血瘀型患者中CYP2C19*2基因突变率最高,并且CYP2C19*2突变型比率高于野生型(P<0.05)。结论:脑梗患者的中医证型分布与CYP2C19*2基因多态性具有显著的相关性;气虚血瘀证型为脑梗患者的主要分型,并且气虚血瘀证型脑梗患者大多数存在CYP2C19*2基因突变,并且呈正相关。