小分子抑制剂LDYS-14007对JAK1-STAT3信号通路的影响研究

目的：研究LDYS-14007对JAK1-STAT3信号通路的影响。方法分别用10μmol 、1 nmol 的LDYS-14007和10μmol的Tofacitinib处理MDA-MB-231细胞。用Western blot法检测JAK1和STAT3的蛋白表达以及磷酸化状况。结果吸光度A与蛋白质浓度C呈线性相关，线性方程为A＝0.0075C＋0.0029，r＝0.9976，线性范围为1.08～5.08 mg／mL；随着LDYS-14007浓度的增加， Phospho-JAK1，Phospho-STAT3的量逐渐减少。结论 LDYS-14007可通过降低JAK1和STAT3的磷酸化水平抑制JAK1-STAT3信号通路。 LDYS-14007可能在类风湿性关节炎（ rheumatoid arthritis， RA）的治疗中起重要作用。

动物细胞大规模培养技术和细胞凋亡的检测

1动物细胞大规模培养技术1．1无血清悬浮培养技术近年来，随着生物医药研究不断深入和发展，动物细胞无血清培养技术已成为引人关注的热点和难点问题。与传统的有血清细胞培养相比，它具有安全性好、过程便于监测、技术稳定可靠、工艺放大容易等众多优点，最大规模可达到25000L，为众多生物制药同行所青睐。

JAK抑制剂在类风湿性关节炎治疗中的研究进展

目的:了解Janus激酶/信号传导及转录激活因子(JAK-STAT)信号通路在类风湿性关节炎(RA)中的作用及JAK抑制剂的研究进展。方法:查阅近年来国内外相关文献,对JAK-STAT信号通路的发现、组成、对RA的调控作用,以及JAK抑制剂的研究进展进行归纳和总结。结果与结论:JAK-STAT信号通路是治疗RA的潜在靶点,JAK家族包括JAK1、JAK2、TYK2和JAK3,STAT家族包括STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5a、STAT5b和STAT6。JAK和STAT家族成员在调控RA等各种免疫反应中有高度特异性,可以通过多种信号因子被激活。处于研究中的JAK抑制剂有Roxolitinib、Tofacitinib、VX-509、R-348、INCB18424、INCB28050等。研究JAK-STAT信号传导途径在RA所致滑膜细胞增殖、炎性介质分泌及关节破坏中的作用,有助于明确RA的发病机制,为研制RA治疗新药提供理论依据。

CD20抗体亲和力和免疫原性的改造及表达

[目的]构建较高亲和力较低免疫原性的CD20抗体。[方法]通过专利分析,进行高亲和力和人源化的设计改造,将抗体的轻链和重链分别克隆到pc DNA3.1/ZEO(+)、pc DNA3.1(+)真核表达载体中,共转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1,通过RT-PCR检测mRNA的转录,夹心ELISA检测抗体表达量,流式细胞术检测细胞上清与CD20阳性细胞Raji的结合活性。[结果]得到了高亲和力的人源化CD20抗体的轻链和重链基因片段,并成功地构建了重组表达载体pc DNA3.1/ZEO(+)-CD20L和pc DNA3.1(+)-CD20H,并可在CHO-K1细胞中表达,通过RT-PCR证明基因在CHO细胞中成功表达,ELISA法测得培养上清的含量在0.45~4.72μg/m L之间,流式检测表明上清中的抗体可与Raji细胞结合。[结论]成功构建并表达筛选了17株单克隆抗体,15号的表达量最大,为4.72μg/m L,为下一步研究抗体的亲合力、免疫原性以及生物学功能打下基础。

口服缓控释制剂的研究与临床应用进展

大量阅读国内文献,对口服缓控释药物制剂进行研究分析。该制剂分为定速、定位和定时释放制剂,三类制剂各有特点并且互为补充。口服缓控释制剂在增加患者的顺应性、提高药物疗效、减少药物不良反应等方面发挥着重要作用,具有很强的临床实用性,但目前缓控释制剂的临床应用存在很多误区。