电针刺激可在大鼠脊髓诱发Fos样蛋白的生成

本研究利用Fos蛋白的免疫组织化学方法首次报道电针“三阴交”穴位可在大鼠脊髓诱发原癌基因c-fos的表达。电针后大量Fos免疫反应(FLI)细胞出现在脊髓腰膨大的背、腹角,但标记最密集区为背角Ⅲ,Ⅳ层。在动物足部注射福尔马林产生的伤害性刺激亦可在脊髓腰膨大背、腹角诱发大量FLI细胞,但以背角Ⅰ,Ⅱ层标记最为密集。因此电针和伤害性刺激引起的脊髓c-fos表达在分布上是不同的。电针诱发的Foc蛋白可能参与针刺镇痛。

电针可促进前脑啡肽原mRNA在大鼠脊髓和延髓的表达:原位杂交研究

本实验室以往的研究表明电针可促进脊髓脑啡肽释放,本研究进一步利用原位杂交方法观察电针后前脑啡肽原mRNA在脊髓和延髓的表达。结果表明电针刺激(2Hz,1-2-3mA,30)后24h同侧脊髓背角前脑啡肽原(PPE)-mRNA阳性细胞数高于对侧。电针后对侧延髓腹内侧网状结构[包括延髓网状巨细胞核(Gi)及其α部(GiA)和Gi的外侧旁核(LPGi)]PPE-mRNA阳性细胞数高于同侧。我们推测电针诱发前脑啡肽原mRNA表达增加可弥补因脑啡肽释放增多而导致脑啡肽前体物质的损失,从而参与针刺镇痛的长期效应。

电针刺激引起中枢原癌基因和阿片肽基因的表达及其定位

针刺镇痛机制的研究在中国已开展多年,并取得重大进展,然而仍有许多问题尚在争议之中,如电针刺激与伤害性刺激是否有差别?电针刺激的初级传入是什么?“以痛制痛”

豚鼠延髓网状巨细胞核传入联系——HRP逆行标记法

应用HRP技术,将HRP注入豚鼠延髓网状巨细胞核,追踪其传入纤维的起源。HRP注入延髓网状巨细胞核及其腹侧部后,大量标记细胞出现在大脑皮层运动感觉区、上丘、小脑顶核及脊髓颈、胸、腰段灰质。此外在中脑、脑桥、延髓网状结构,前庭内侧核,蓝斑及其腹侧部也出现了标记细胞。当将HRP微电泳至延髓网状巨细胞核以后,标记细胞数量明显减少,但在运动感觉皮层、上丘、小脑顶核、前庭内侧核、颈髓灰质和中脑、脑桥、延髓网状结构仍出现标记细胞,然而在蓝斑及其腹侧部以及脊髓胸、腰段灰质未见有标记细胞。本文就延髓网状巨细胞核与运动、痛觉、睡眠等的关系进行了探讨。

豚鼠脑桥被盖部位HRP逆行标记的传入联系

本研究应用HRP微电泳技术,将HRP注射至豚鼠脑桥的腹侧被盖和背侧被盖,追踪其逆行传入投射。将HRP注射至脑桥腹侧被盖后,中脑上丘腹侧的中脑水管周围灰质和网状结构交界处(MSR),具有较密集的标记神经元。此外,在下丘腹侧的楔状核(MLR)、三叉神经脊束核、延髓网状巨细胞核、前庭内和外侧核、蓝斑及其腹侧的网状结构部分以及脊髓颈膨大灰质,也观察到了标记细胞。将HRP注射至脑桥背侧被盖后,脑桥尾侧网状核和延髓巨细胞网状核的标记神经元较多,前庭内、外侧核和外侧楔束核也见到标记细胞,中脑部位仅在红核及其附近见到少量标记细胞。蓝斑及其腹侧的网状结构部分和脊髓灰质未见标记细胞。

大鼠低位脑干睡眠相关结构胆碱能神经元的分布

本文用胆碱乙酰转移酶的单克隆抗体免疫组织化学技术,观察了胆碱能神经元在大鼠低位脑干睡眠相关结构的分布。结果表明,蓝斑是非胆碱能的,很蓝斑腹侧部网状结构含有胆碱乙酰转移酶阳性反应神经元。胆碱乙酰转移酶还出现在脑桥内侧网状结构,相应于脑桥尾侧网状核以及中缝大核。延髓网状巨细胞核及其腹侧部也有胆碱能神经元出现。这些区域的胆碱能神经元可能参与异相睡眠的诱发及其某些特性的产生,也可能和慢波睡眠有关。

豚鼠脑干内侧部踏步相关区域AchE阳性神经元的分布

本研究采用胆碱酯酶(AchE)组织化学方法观察豚鼠脑干内侧部踏步相关区域[三叉神经中脑核(Me5)、蓝斑(LC)、中缝大核(RM)及邻近网状结构和延髓巨细胞网状核(Gi)]AchE阳性神经元分布,并利用大鼠和猫进行对照。结果表明豚鼠Me5含有AchE强阳性神经元,而在大鼠和猫的Me5则没有观察到。豚鼠LCAchE阳性神经元分布明显较猫LC的弥散分布集中,虽然密集程度较大鼠LC为弱。此外,在上述三种动物中AchE阳性神经元在Gi、RM及其邻近网状结构具有相似的分布。本文就实验结果与踏步运动的关系进行了探讨。

豚鼠脑干内侧部位的组织化学研究

脑干位于全脑的末端。与大脑皮层、基底神经节、小脑和脊髓等比较,脑干是研究较贫乏而尚待开垦的区域。因此80年代初国际脑研究组织(IBRO)指出了“重新访问”(revisit)脑干中心(central core)的重要性。现已知脑干具有调节肌张力、控制觉醒、编码呼吸程序、触发异相睡眠、参与镇痛等重要而又相互关联的生理功能,而脑干内侧部位(medial region)

星形胶质细胞调节慢性疼痛的分子机制

慢性疼痛是临床治疗上的难题之一,开发新的镇痛药物需要对慢性疼痛的产生和维持机制进行更加深入的研究。近年来的研究表明,神经胶质细胞,尤其是中枢神经系统的小胶质细胞和星形胶质细胞在慢性疼痛的发生发展中起重要作用。星形胶质细胞是中枢神经系统中数量最多、占据体积最大的细胞,在结构上与神经元突触紧密接触。而且,外周神经损伤、组织损伤、肿瘤浸润、关节炎等引起的慢性疼痛状态下,脊髓星形胶质细胞比小胶质细胞呈现出更持久的活化,该活化与慢性疼痛行为密切相关。活化的星形胶质细胞可通过丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)释放炎症前细胞因子、趋化因子等调节神经元的兴奋性,促进慢性疼痛的维持。本文对脊髓星形胶质细胞参与慢性疼痛调节的机制研究进展进行了综述。

原癌基因与痛觉调制

原癌基因c-fos和c-jun是病毒癌基因v-fos和v-jun的细胞同源序列。伤害性刺激可诱发中枢c-fis和c-jun的表达。c-fos和c-jun在中枢某些部位的表达可作为伤害性刺激的标志物。电针刺激也可诱发c-fos和c-jun的表达。原癌基因的表达与阿片肽基因表达在时程上紧密相关。Fos可与阿片肽共存于同一神经细胞,Fos-Jun/Ap-1复合体可与脑啡肽基因5'端ENK CRE-2位点结合调节基因表达,从而参与痛觉调制。

电针刺激诱发Fos、Jun样蛋白在大鼠上丘的表达

大量资料表明，即刻早期基因产物Ｆｏｓ蛋白与Ｊｕｎ蛋自的诱导表达可以做为神经元活动的标志物。本研究利用免疫组化技术观察并比较外周电针刺激（２Ｈｚ，１—２－３ｍＡ，３０ｍｉｎ）后，Ｆｏｓ、Ｊｕｎ样蛋白在大鼠上丘的表达。结果表明，正常大鼠上丘的Ｆｏｓ、Ｊｕｎ表达很低，而电针可使Ｆｏｓ表达增加１０倍，Ｊｕｎ的表达增加１８倍。Ｆｏｓ、Ｊｕｎ样免疫反应阳性神经元在上丘备层的分布基本相似，均以表层分布最为密集，中间层次之，深层最少。阳性神经元计数结果表明，Ｊｕｎ在上丘各层次及各断面的表达高出Ｆｏｓ约一倍。关于电针刺激上丘表层大量Ｆｏｓ、Ｊｕｎ表达功能意义有待进一步研究。

痛情绪和相关记忆机制的研究进展

感觉分辨和情绪体验是疼痛的两个基本成分。痛的感觉分辨是对刺激的部位、强度和性质作出判断;痛情绪是疼痛刺激引起的不愉快或厌恶的情感体验。过去四十年间,对疼痛的感觉分辨成分在整体、细胞、分子和基因等各个层次上的研究取得了巨大的进展,然而,对痛的不愉快的情绪体验和相关的记忆究竟是怎样产生的还知之甚少。“只考虑痛的感觉特性而忽视其情绪情感特性,那只是看到问题的一部分,而且不是最重要的部分。”越来越多的临床观察表明,慢性痛患者所遭受的恶性情绪,如焦虑、恐惧、孤独、甚至厌世等给病人造成的心身伤害远比疼痛本身更为严重。因此,对痛情绪和相关记忆形成机制的研究近年来逐步受到人们的关注。为进一步加深对疼痛本质的全面理解,本文简要综述了痛情绪和痛记忆的相关研究在神经解剖学、神经生理学和生物化学等方面的进展。

电针诱发大鼠中枢神经系统Fos样蛋白的生成

针刺可以镇痛已被公认。本实验室的系列研究表明针刺激活了中枢某些神经化学系统,如阿片肽系统,单胺能系统等而产生镇痛作用。然而关于针刺镇痛的机制方面,尚存在是否是“以痛制痛”之争,针刺信息的外周传入机制及所激活的中枢区域也不很清楚。原癌基因c-fos的表达被视为特定刺激下神经元活性(neuronal activity)的标志物。我们曾经发现电针刺激可在大鼠脊髓诱导C-fos表达。

局部辣椒素处理抑制福尔马林诱导的脊髓fos表达(英文)

辣椒素是一种阻断伤害性传入(C-纤维)的工具药,利用免疫组织化学技术,本工作发现1％辣椒素包埋坐骨神经可抑制福尔马林(5％,150μl,后肢脚掌注射)诱导的脊髓背角Ⅰ—Ⅱ,Ⅲ—Ⅳ,Ⅴ—Ⅵ层fos蛋白表达(P<0.01),本结果提示C-纤维的激活参与c-fos基因的诱导,同时也说明外周辣椒素处理是阻断伤害性初级传入的有效途径。