受精液中精子密度及添加单宁酸对猪胚胎体外生产效率的影响

实验旨在研究受精液中精子密度和添加单宁酸(TA)对猪体外成熟卵母细胞体外受精(IVF)后胚胎发育能力的影响,并初步探讨TA提高胚胎生产效率的机理。将猪体外成熟卵母细胞在不同精子密度的受精液[(9.6±0.4)×10^(6)、(5.1±0.2)×10^(6)、(3.7±0.2)×10^(6)、(2.6±0.1)×10^(6)个/mL]内进行IVF,之后依据受精卵体外培养的卵裂率和囊胚率确定受精液中较适宜的精子密度。在确定的适宜精子密度的受精液中分别添加0(对照组)、2、5、10μg/mL TA,分析TA对胚胎发育能力的影响,通过Hoechst 33342荧光染色检测IVF后12 h原核形成情况,并采用考马斯亮蓝G-250染色检测受精液中孵育2 h的精子顶体反应情况。结果表明:(5.1±0.2)×10^(6)个/mL组卵裂率及囊胚率高于(9.6±0.4)×10^(6)个/mL组、(2.6±0.1)×10^(6)个/mL组(P<0.05),与(3.7±0.2)×10^(6)个/mL组差异不显著;5μg/mL TA组的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数均高于对照组(P<0.05);与对照组相比,添加TA有降低含3个及以上原核受精卵比例的趋势(P>0.05);TA处理组精子的顶体反应率低于对照组(P<0.05)。由此可见,猪卵母细胞IVF时较为适宜的精子密度为5.0×10^(6)个/mL左右,受精液中添加5μg/mL TA可显著提高猪体外生产胚胎的囊胚率和囊胚细胞数。