升压物质检查法在药品生物安全性检查中的应用及实验关键点

升压物质检查法是《中国药典》收录的一项药物安全性检查法。用以检测可能含有引起血压升高杂质的原料药及其制剂中升压物质的限度是否符合标准规定。该检查法的使用范围虽然较窄,但在临床用药安全上发挥着重要作用。本文就升压物质检查法的实验原理、实验系统、方法应用、各国药典收录情况、改进建议,以及实验要点进行综述,为相关实验人员提供参考。

硬化性苔藓样变性的诊断及病因学的研究进展

硬化性苔藓样变性(lichen sclerosus, LS)是由Hallopeau于1887年首次提出[1],男性硬化性苔藓样变性(MGLSc)早些年因其三大典型临床症状:表皮干燥、病变组织皮下动脉闭塞、龟头炎,Stuhmer又将其称为干燥闭塞性龟头炎(Balanitis xerotica obliterans, BXO)[2]。而在1976年,“干燥闭塞性龟头炎”的疾病名称已被国际外阴疾病研究学会正式废除[3]。关于LS的病因、发病机制、诊断和治疗尚无定论[4-5],本文围绕以上方面作一综述。

吗啡干预对急性心肌梗死大鼠血浆脑钠素及梗死面积的影响

目的 探讨急性心肌梗死 (AMI)后血浆脑钠素 (BNP)浓度变化及其与肌酸激酶同工酶 (CK -MB)的相关关系 ;明确吗啡干预对AMI大鼠血浆BNP浓度与梗死面积的影响。方法 将 2 4只大鼠随机分为对照组、单纯缺血组、吗啡干预组。分别测定 3组大鼠术后 0 5、5、12、2 2h血浆BNP浓度及血清CK -MB浓度 ;并于 2 2h后处死大鼠 ,取心肌标本染色后测定心梗面积。结果 单纯缺血组血浆BNP浓度与血清CK -MB浓度较对照组和吗啡干预组明显升高 (均 P <0 0 1)。吗啡干预组较对照组血浆BNP浓度在 0 5、5h无差异 ,在 12、2 2h明显升高 (P <0 0 1) ,升高的BNP与CK -MB呈正相关。吗啡干预组心梗面积较单纯缺血组明显减少 (P <0 0 1)。结论 AMI后血浆BNP浓度显著升高 ,BNP浓度与血清CK -MB浓度及梗死面积呈正相关 ;吗啡干预可减小心梗面积 ,同时降低血浆BNP浓度。

吗啡对急性心肌梗死再灌注损伤保护效应的实验研究

目的 通过测定急性心肌梗死再灌注损伤模型大鼠的血浆降钙素基因相关肽 (CGRP)、内皮素(ET 1)浓度及心肌梗死面积的变化 ,探索吗啡对急性心肌损伤的保护机制。方法 将 4 0只 SD大鼠随机分为单纯缺血再灌注模型组、吗啡预处理组、吗啡 +纳洛酮组和手术对照组 ,每组各 10只。采用戊巴比妥钠(40 m g/ kg)腹腔注射麻醉大鼠 ,采用穿线结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌缺血再灌注模型。用放射免疫法测定血浆 CGRP和 ET 1浓度 ,同时测定血清中肌酸磷酸激酶同工酶 (CK MB)含量 ;用氯化三苯四唑(TTC)法染色和数码照相计算机图像分析系统计算心肌梗死面积。结果 大鼠左冠状动脉前降支结扎 10 m in时血浆 ET 1和 CGRP浓度较手术对照组显著增高 (P均 <0 .0 1) ;再灌注 4 .5 h时吗啡预处理组血浆 ET 1及 CK MB浓度较结扎 10 m in时显著降低 ,心肌梗死面积也显著缩小 (P均 <0 .0 1) ;而血浆 CGRP浓度则显著增高 (P<0 .0 1) ;吗啡预处理组以上变化较吗啡 +纳洛酮组差异有统计学意义 (P均 <0 .0 1)。结论 吗啡预处理可通过显著降低 ET 1而增加 CGRP血浆浓度、缩小心肌梗死面积 ,对急性心肌梗死后再灌注心肌产生保护效应。

吗啡对急性心肌梗死保护效应的临床研究

目的 研究急性心肌梗死 (AMI)患者血浆中降钙素基因相关肽 (CGRP)和内皮素 - 1(ET - 1)浓度的变化 ,以明确吗啡对急性心肌损伤的保护作用。方法 30例AMI患者随机分为吗啡组 (A组 ) 15例和未用吗啡组 (B组 ) 15例 ,10例健康体检者为正常对照组 (C组 )。A组入院即刻采静脉血 2mL后 ,立即静脉注射吗啡 3mg ,10min后再次采静脉血 2mL ;B组于入院时及 10min后分别采静脉血 2mL ,两次采血期间未用吗啡。采用放射免疫法测定血浆CGRP和ET - 1浓度。结果 A组与B组在入院即刻和 10min后的血浆CGRP和ET - 1浓度均显著高于C组 (P <0 0 1) ;A组与B组在入院即刻的血浆CGRP和ET - 1浓度无显著性差异 (P >0 0 5 )。但 10min后 ,A组血浆CGRP浓度不仅显著高于B组 (P <0 0 1) ,且与入院即刻比较也显著增高 (P <0 0 1) ;与之相反 ,A组血浆ET - 1浓度不仅显著低于B组 (P <0 0 1) ,且与入院即刻比较也显著降低 (P <0 0 1)。结论 静脉注射吗啡能增加AMI患者血浆CGRP浓度 ,降低ET - 1浓度 ,从而发挥心肌保护效应。

吗啡对大鼠急性心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及其对心肌细胞凋亡的影响

目的 :探讨吗啡对急性心肌缺血 /再灌注损伤的保护作用和机制 ,以及对心肌细胞凋亡的影响 .方法 :SD大鼠70只 ,其中 4 0只随机分成 4组 :A组 (n =1 0 ,单纯缺血再灌注 ) ,B组 (n =1 0 ,吗啡预处理 ) ,C组 (n =1 0 ,吗啡 +纳络酮 ) ,D组 (n =1 0 ,正常对照 ) .其余 30只做心肌梗死面积测定 (A ,B ,C组各 1 0只 ) .实验动物采用戊巴比妥钠 (4 0mg/kg)ip麻醉 ,开胸 ,打开心包 ,穿线结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌缺血再灌注模型 .用免疫组织化学法检测心肌组织Bcl 2基因蛋白表达 ;用放免法测定血清中TNF α的含量 ,同时测定血清中肌酸磷酸激酶同功酶 (CK MB)的含量 ;用TTC法染色 ,用图像分析系统计算心肌梗死面积 (n =30 ) .结果 :与A组比较 ,B组梗死面积明显缩小 [(2 1 .8± 4 .5 )vs (37.5±5 .8) ,P <0 .0 1 ];Bcl 2基因蛋白表达明显增加 ( )vs (+) ;TNF α明显降低 [(0 .4 2± 0 .0 8)vs (0 .86± 0 .1 1 ) ,P <0 .0 1 ],CK MB明显降低 [(39374± 7885 )vs (5 85 1 1± 4 95 0 ) ,P <0 .0 5 ].结论 :吗啡预处理可抑制TNF α产生 ,并通过上调Bcl 2基因蛋白表达 ,抑制缺血 /再灌注后心肌细胞的凋亡 。

达肝素钠和肝素钠对小鼠毒性的比较

目的比较达肝素钠和肝素钠对小鼠毒性的差异。方法采用半数致死量(LD_(50))法测定两药对小鼠的急性毒性,达肝素钠设6个剂量组,最低剂量为2.54×10~5U·kg^(-1);肝素钠设5个剂量组,最低剂量为2.05×10~5U·kg^(-1);剂量间距均为1.25;达肝素钠和肝素钠干预L-929细胞48 h,CCK-8法检测细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC_(50)),达肝素钠设7个浓度,最低浓度为0.78×10~5U·L^(-1),肝素钠设6个浓度,最低浓度为0.39×10~5U·L^(-1);剂量间距均为2;采用碘化丙啶染色用流式细胞仪对L-929细胞进行细胞周期分析。结果达肝素钠和肝素钠对小鼠的LD_(50)分别为4.44×10~5和3.68×10~5U·kg^(-1);对L-929细胞的IC_(50)分别为1.42×10~6和3.54×10~5U·L^(-1)。L-929细胞经达肝素钠处理后,G_2/M期细胞百分率增加137.6%(P<0.01);经肝素钠处理后,G_0/G_1期细胞百分率增加33.8%(P<0.01)。结论达肝素钠对小鼠及L-929细胞的毒性均小于肝素钠,达肝素钠和肝素钠对细胞周期的影响分别阻滞在G_2/M期和G_0/G_1期。

X线透视下放置鼻空肠营养管的操作技术及应用价值

目的 探讨在X线透视下放置鼻空肠营养管的操作技术和应用价值.方法 对98例需要行肠内营养治疗的重症患者,在X线透视下放置鼻空肠营养管,并按照插管方法分为A组(X线透视下放置螺旋形鼻空肠营养管)和B组(X线透视下经超滑导丝辅助放置普通鼻空肠营养管),比较2组置管时间和成功率,两种方法互相补充以提高成功率.结果 96例患者成功置管,总成功率98.0％(96/98),置管时间为5～ 38min,平均(11.98±6.23)min.98例患者共置管113例次,A组完成62例次,通过幽门时间短于B组(P＜0.05);B组成功44人次,通过十二指肠空肠曲转角和到达空肠预定位置时间短于A组(P＜0.05),两种方法间成功率差异无统计学意义(P＞0.05).术后鼻肠管在位良好,患者耐受性好,肠内营养治疗过程顺利,无严重并发症.结论 在X线透视下放置螺旋形鼻肠管和在超滑导丝辅助下放置普通鼻肠管均是简捷、安全、经济、有效的方法,二者互相补充可以提高成功率.

药用辅料中不同来源溶血磷脂酰胆碱含量限值的合理性分析

目的:通过比较蛋黄来源及大豆来源溶血磷脂酰胆碱对红细胞影响的差异来评价目前药用辅料中不同来源溶血磷脂酰胆碱含量限值的合理性。方法:采用体外红细胞溶血试验及红细胞渗透脆性试验考察两种不同来源溶血磷脂酰胆碱对红细胞的影响。结果:蛋黄来源及大豆来源溶血磷脂酰胆碱红细胞溶血IC_(50)分别为0.0427mg·mL^(-1)、 0.0801mg·mL^(-1);二者在0.65%、0.60%、0.55%NaCl低渗盐溶液中引起的溶血率亦具有显著性差异,蛋黄来源溶血磷脂酰胆碱的溶血率明显高于大豆来源溶血磷脂酰胆碱。但红细胞凝聚试验结果表明,二者均未见引起红细胞凝聚。结论:两种不同来源的溶血磷脂酰胆碱致溶血能力具有显著性差异,建议应分别制定不同来源磷脂类产品中溶血磷脂酰胆碱的含量限值,以保证临床用药安全。

早期内镜联合肠内营养治疗重症急性胆源性胰腺炎的临床研究

目的探讨早期内镜联合早期肠内营养(EEN)治疗重症急性胆源性胰腺炎(SABP)的价值。方法选择行内镜治疗SABP患者60例,随机分成2组,观察组(n=30)发病48 h内行急诊内镜治疗并联合EEN,对照组(n=30)保守治疗或延期行内镜治疗,并联合静脉营养(TPN)。比较2组血淀粉酶恢复正常时间、白细胞数恢复正常时间、总胆红素恢复正常时间、腹痛缓解时间、肠功能恢复正常时间、并发症发生率、住院时间、住院费用以及血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸水平。结果观察组急诊ERCP成功率93.3%,EEN实施顺利;血淀粉酶恢复正常时间、白细胞数恢复正常时间、总胆红素恢复正常时间、腹痛缓解时间、肠功能恢复正常时间、并发症发生率、住院时间、住院费用组间比较,观察组均优于对照组(P<0.05);ERCP治疗1周和2周后TNF-α、CRP、PCT、IL-6、DAO和D-乳酸下降水平,观察组均优于对照组(P<0.05)。结论早期内镜联合肠内营养治疗SABP微创、安全、有效,能缩短住院时间,减少医疗费用。

地塞米松抑制慢性心衰大鼠心肌中内皮素信号通路的过度激活而改善心肌纤维化

目的:观察地塞米松对慢性心衰大鼠心肌中内皮素(ET)信号通路的过度激活与氧化应激的干预作用。方法:雄性SD大鼠,通过冠脉结扎6周造成慢性心衰模型。分为慢性心衰组、地塞米松组,另设假手术组作为阴性对照。地塞米松组动物在饮水中按1μg/mL的浓度给予地塞米松治疗。连续治疗6周后,取心脏进行Masson三色法染色,以检测心肌纤维化;RT-PCR法检测心肌组织中ETA受体、NF-κB和一氧化氮合酶(iNOS)的基因表达水平。结果:与假手术组相比,慢性心衰组大鼠心肌纤维化显著,地塞米松能有效改善心衰大鼠心肌组织的纤维化;心衰大鼠心肌组织中ETA受体、NF-κB和iNOS的基因表达水平明显上调,而地塞米松可使心衰大鼠心肌中ETA受体、NF-κB和iNOS的基因表达水平显著下调。结论:地塞米松通过下调ETA受体,抑制ET信号通路的过度激活和抗氧化作用,有效改善慢性心衰大鼠的心肌纤维化。

基质金属蛋白酶9与血浆脑钠素在大鼠急性心肌梗死后的表达

目的:研究急性心肌梗死(AMI)后血浆脑钠素(BNP)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达变化及相关关系,探讨血浆BNP浓度与AMI后左室重构的关系。方法:SD大鼠随机分为对照组、心肌梗死后1 d组、心肌梗死后1 w组、心肌梗死后2 w组、心肌梗死后4 w组。结扎大鼠冠状动脉前降支制作AMI模型。行血流动力学检测后,测定各组大鼠血浆BNP浓度及MMP-9,后处死大鼠,取心肌标本测定梗塞面积及心肌胶原含量。结果:心肌梗死各组较对照组左心室舒张末压均显著增加(P<0.05),平均动脉压、左心室内压最大上升和下降速率则显著降低(P<0.01);第4周组左心室湿重较其余各组明显增加(P<0.01)。心肌梗死各组BNP、MMP-9表达较同期对照组显著增加(P<0.01),MMP-9与BNP呈正相关(r=0.81,P<0.01);心肌胶原含量增加,与左心室内压最大上升和下降速率呈负相关。结论:心梗后BNP与MMP-9明显升高呈动态改变,并且与心室重构及心功能密切相关,心梗后BNP的迅速分泌可能是促进MMP-9表达的原因之一;心梗后同时测定BNP与MMP-9浓度对于判断心功能及心室重构从而间接判断预后有重要意义。

多非替利衍生物CPU228(V03)对大鼠心室肌细胞钙瞬变的调节

目的 :在β 受体激动情况下 ,研究多非替利衍生物CPU 2 2 8对电刺激触发心肌细胞的胞浆Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i)变化及钙瞬变动力学参数的影响。方法 :游离单个大鼠心室肌细胞 ,Fluo 3 AM负载 ,电刺激诱发心室肌细胞钙瞬变 ,定量测定心室肌细胞内Ca2 +浓度变化 ,异丙肾上腺素 (isoproterenol,ISO) 10 0nmol·L-1激动β 受体 ,观察CPU 2 2 81μmol·L-1对钙瞬变动力学参数、[Ca2 + ]i 及钙负荷水平的影响。结果 :CPU2 2 81μmol·L-1对大鼠心室肌细胞 [Ca2 + ]i 的影响不明显 (P >0 .0 5 ) ;ISO 10 0nmol·L-1显著升高大鼠心室肌细胞 [Ca2 + ]i 和细胞内钙负荷水平 ,缩短钙瞬变时程 ,并且增加钙瞬变的消除速率。CPU 2 2 81μmol·L-1显著抑制ISO的上述作用。结论 :在β 受体激动情况下 ,CPU 2 2 8可以降低心肌细胞 [Ca2 + ]i,使ISO改变的钙瞬变动力学参数恢复到正常水平。

复方地黄醇提物对糖尿病大鼠早期视网膜病及肾病并发症的干预作用

目的：研究复方地黄2种醇提取物对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠的早期视网膜病变及糖尿病肾病的干预作用。方法：腹腔注射STZ 60 mg·kg^-1建立糖尿病大鼠模型,4周后随机分组,5-8周3个治疗组分别每日给予氨基胍（100 mg·kg^-1）,复方地黄70%乙醇提取物（10 g·kg^-1）及复方地黄95%乙醇提取物（10 g·kg^-1）。8周后测定各组动物血清中血糖（G lu）、肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的含量,并测定肾组织中过氧化氢酶（CAT）活性、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）活性、一氧化氮（NO）和羟脯氨酸（HYP）含量;用RT-PCR测定视网膜PreproET-1和MMP-9 mRNA的表达。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠血清Cr及BUN的含量以及肾脏组织iNOS活性、NO和HYP含量均显著升高,肾脏组织CAT活性显著降低,视网膜Prepro ET-1 mRNA表达量显著升高,MMP-9 mR-NA表达量显著降低。复方地黄70%和95%乙醇提取物组的血糖虽然无明显降低,但上述异常指标均明显逆转,与阳性对照组氨基胍接近。结论：复方地黄70%和95%乙醇提取物均能改善STZ诱导的糖尿病大鼠早期视网膜病变及糖尿病肾病发生,药效与AGEs受体拮抗剂氨基胍相当。

内皮素受体拮抗剂抑制异丙肾上腺素诱导大鼠心肌细胞搏动加速及凋亡

观察内皮素受体拮抗剂CPU0213能否阻断异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)所致大鼠心肌细胞搏动加速及凋亡。分离大鼠心肌细胞。给ISO(10-7M)的同时给CPU0213(10-7、10-6、10-5M),并以普萘洛尔(10-6M)作为阳性药对照,观察各组心肌细胞的搏动次数。采用吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色法检测成年大鼠心肌细胞凋亡率的变化。普萘洛尔明显抑制ISO效应(P<0.001)。内皮素受体拮抗剂CPU0213明显抑制ISO所致的心肌细胞搏动和细胞凋亡,且呈浓度依赖性。大剂量CPU0213对ISO生物效应的阻断作用(P<0.001)与普萘洛尔相仿。内皮素受体拮抗剂CPU0213阻断ISO所致的心肌细胞搏动加速和增加细胞凋亡率等生物学效应,提示内皮素介导β-受体效应。

40例大面积脑梗死患者不同治疗方法分析比较

目的比较大面积脑梗死内科治疗和去骨瓣减压术治疗的疗效差异,并分析GCS评分与大面积脑梗死患者预后关系。方法40例脑梗死患者入院时均经头颅CT扫描和APACHEⅡ、APACHEⅢ、GCS评分,并予降颅压及系统支持治疗,其中18例内科治疗,22例作去骨瓣减压术。结果手术治疗22例中死亡13例,好转出院9例;内科治疗18例中死亡15例,好转3例。结论GCS评分≤5分的大面积脑梗死患者行去骨瓣减压术与保守治疗疗效差异无显著性,而GCS≥6分患者采取手术治疗预后较好。

神经退行性病变机制及其药物干预对策

综述神经退行性病变的特点和表现及其相关内源性物质 ,探讨该类病变机制及其药物干预对策。神经退行性病变可由多种因素造成 :脑内 β 淀粉样蛋白沉着导致阿尔茨海默病 ;皮层下区域病变导致帕金森病和Hunt ington病 ;另外 ,非特异性老年性脑内神经元病可变使神经元减少 ,导致老年性智力衰退 ;血管内皮细胞损害与脑神经元及脑功能有相关性 ;老年性血管内皮细胞中一氧化氮 (NO)生物利用度下降以及脑内某些脑区内一氧化氮合酶活性及NO异常上调与脑内神经元变性相关 ;老年人脑供血不足是由于舒血管物质减少而缩血管物质增多 ,使血管收缩及舒张功能改变所致 ,是造成脑内神经元逐年递减的一个重要因素。老年人的血管活性障碍与糖尿病病人有相似之处 ,亦是由于体内非酶糖基化产物的生成 ,使内皮细胞功能损害、内皮素 (ET1)及ONOO· -增多 ,最终导致氧化应激。以保护血管内皮细胞为主要靶点的药物治疗 ,可通过抗氧化应激、降低ET1水平、改善血管重构及多靶点作用 ,并结合节制饮食、加强锻炼等非药物治疗 ,可改善神经退行性病变 ,提高老年人的智力功能和生活质量。

药物对大鼠急性心肌梗塞后心衰发生与血浆脑钠素浓度的影响

观察药物治疗对大鼠急性心肌梗塞(AMI)后心衰的发生及血浆脑钠素(BNP)浓度的影响,并探讨了BNP浓度在评价药物疗效方面的作用.将24只大鼠随机分为对照组、单纯缺血组、药物治疗组.结扎除对照组以外大鼠冠状动脉左前降支后惊醒笼养,其中药物组在术后既开始药物灌胃治疗.于86天后处死大鼠,取血并测定血浆BNP浓度,同时摘取心脏测定心肌梗塞面积,结果,药物组血浆BNP水平及心肌梗塞面积较缺血组低(p<0.01;p<0.01).结论:药物治疗可以降低心梗后血浆BNP浓度及缩小梗塞面积,减少心梗后心衰发生,监测血浆BNP浓度可评价心梗后药物治疗是否获效.

尿酸、NLR、及A/G对结直肠癌诊断的应用价值分析

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是一种发病率及死亡率均较高的恶性疾病。据我国癌症中心公布的数据显示,2015年全国范围内CRC发病数为38.8万例,死亡数为18.7万例。研究证实早期治疗可显著提高患者术后生存率。结直肠疾病多遵循由腺瘤发展到癌的演变规律,此过程可长达10-15年,为早期识别CRC并进行干预提供了一个重要的“窗口期”。因此如何早期识别CRC则成为了一个具有重要意义的问题。

间充质干细胞外泌体促进糖尿病皮肤创口愈合的研究进展

中国糖尿病患病率高达11%以上,糖尿病会导致创口不愈合,糖尿病足等,为糖尿病患者带来巨大的身体和精神创伤。在糖尿病患者中,延迟创口愈合一直是一个主要的问题,约15%的糖尿病患者常常伴有不愈合溃疡的风险,据估计,这些难愈合性糖尿病皮肤创口的患者治疗成本每年约为100亿美元。由此可见,开展促进糖尿病皮肤损伤愈合的相关研究,对提高我国乃至世界的糖尿病患者生存质量、降低致残率有重要意义。