维吾尔族妇女宫颈癌病理进程与Toll样受体9蛋白表达的关系

目的:Toll样受体9(Toll-like receptor-9,TLR9)是天然免疫受体之一,近期研究表明TLR9与多种上皮性肿瘤发生的早期行为密切相关。本研究拟从蛋白质水平观察宫颈上皮组织中TLR9表达变化与维吾尔族妇女宫颈癌病理进程的关系。方法:收集维吾尔族妇女宫颈炎、宫颈上皮内瘤变cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)患者的宫颈上皮石蜡包埋组织标本共97例,采用免疫组织化学方法检测各组织中TLR9蛋白表达水平。结果:TLR9蛋白在绝大部分宫颈炎患者的宫颈上皮细胞中不表达(88.2%)或弱表达(11.8%),但是随着宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的发生,表达水平逐渐上升,其阳性率依次为慢性宫颈炎(2/17,11.8%),CINⅠ(4/19,28.6%),CINⅡ(3/10,30.0%),CINⅢ(12/24,50.0%),CSCC(17/32,53.1%),5组之间比较差异有统计学意义(P<0.05),CINⅢ及CSCC与宫颈炎间的阳性率差异显著(P<0.05),但是CINⅠ和CINⅡ与宫颈炎间的差异无统计学意义(P>0.05),并且在CSCC中,不同肿瘤分化程度之间其TLR9蛋白阳性率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TLR9蛋白可能参与了宫颈癌的发生和发展的进程。

维吾尔族妇女宫颈癌早期与中晚期患者血浆蛋白质组的二维液相色谱比较分析

目的运用蛋白质二维液相色谱技术,分析维吾尔族妇女宫颈鳞癌患者血浆低丰度蛋白质组谱特征,寻找肿瘤临床早期和中晚期之间的血浆蛋白组差异。方法收集维吾尔族妇女宫颈鳞癌患者血浆标本共46例,其中临床分期为Ⅰ-Ⅱa的早期患者26例,Ⅱb-Ⅳ的中晚期患者20例;利用高丰度蛋白去除方法,制备血浆低丰度蛋白质组样品,经蛋白质二维液相色谱系统分析,研究不同宫颈癌临床分期患者血浆蛋白质组差异。结果建立了早期和中晚期宫颈鳞癌患者的蛋白质组差异图谱;以2倍以上的血浆蛋白质含量变化作为蛋白质峰组分的定量差异标准,并将宫颈癌早期患者设为对照,综合分析二组的有效蛋白组分,发现中晚期肿瘤患者血浆中5个低丰度蛋白组分含量明显上升,而10个组分下降。结论维吾尔族妇女宫颈鳞癌患者不同临床分期之间存在血浆低丰度蛋白质组差异,为进一步鉴定肿瘤演进过程特异的血浆标志蛋白提供了客观依据。

维吾尔族妇女宫颈鳞癌早期患者血浆低丰度蛋白质组差异图谱的二维液相色谱分析

目的:依托蛋白质二维液相色谱技术,建立维吾尔族妇女宫颈鳞癌早期患者特异性血浆低丰度蛋白质组图谱鉴别模型。方法:收集维吾尔族妇女血浆标本共48例,临床分期为Ⅰ～Ⅱa的宫颈鳞癌早期患者26例,慢性宫颈炎患者22例。分别制备血浆低丰度蛋白质组样品并通过蛋白质二维液相色谱系统(ProteomeLah^(TM)PF-2D)分离与鉴别分析。结果:确定了宫颈炎和早期宫颈鳞癌患者的基于蛋白质等电点和疏水性特征的血浆低丰度蛋白质组图谱,筛选出9个差异表达明显的蛋白位点,在宫颈鳞癌早期患者血浆中8个低丰度蛋白组分含量明显上升,1个组分含量下降。结论:建立了宫颈癌早期患者特异性血浆蛋白质组差异图谱鉴别模型,提示二维液相色谱技术作为一种高通量技术手段在血浆蛋白质组学研究中有很大的应用潜力。

宫颈病变进程中的SPARC蛋白表达及其临床意义

目的探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC）表达水平与宫颈病变进程的关系及其临床意义。方法收集宫颈炎、宫颈内上皮瘤样病变（CIN）及宫颈鳞癌患者的石蜡包埋组织标本107例,采用免疫组织化学SP法检测SPARC蛋白表达水平。结果 SPARC蛋白在宫颈间质细胞内表达,在宫颈炎的表达水平很低（23%）,随着CINⅠ~Ⅱ和CINⅢ病理进程呈梯度性增高（35%和61%）,在所有的宫颈癌标本中可以检出SPARC蛋白（100%）,宫颈炎组和CINⅠ~Ⅱ组之间的表达差异无统计学意义,其他各组之间的表达差异均有统计学意义（P〈0.05）。宫颈鳞癌中SPARC蛋白的表达差异与宫颈鳞癌的病理分化程度之间无统计学意义（P〉0.05）。结论 SPARC蛋白表达水平的上调可能是宫颈病变进程的分子标志,这为揭示宫颈癌发病机制及建立临床评估体系提供了重要依据。

血管紧张素Ⅱ-CaMK-CREB-CYP11B2和肾上腺素-PKA-CREB-CYP11B2途径在应激性高血压发病中的研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ-CaMK-CREB-CYP11B2和肾上腺素-PKA-CREB-CYP11B2途径在应激性高血压(SIH)发病中的作用。方法选取鼠龄在6～8w的SPF级雄性Wistar大鼠28只,适应性喂养7d后,按照完全随机法分为SIH模型组与正常组,每组14只。通过每天声光间断足底电、夹尾持续刺激12w构建SIH大鼠模型。采用放射免疫法检测SIH模型大鼠血浆血管紧张素Ⅱ含量,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测SIH模型大鼠血清肾上腺素含量,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫组织化学方法检测SIH模型大鼠肾上腺组织Creb、Nr4a1、Nr4a2、Cyp11b2基因mRNA表达和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平及醛固酮合酶(CYP11B2)蛋白表达水平的变化。结果与正常组比较,SIH模型组大鼠体质量增长明显缓慢,收缩压与舒张压均明显升高(P <0.05),血浆血管紧张素Ⅱ含量无明显变化(P>0.05),血清肾上腺素含量明显升高(P <0.05),肾上腺组织Creb基因mRNA表达水平明显上调(P <0.05),Nr4a1与Nr4a2基因mRNA表达水平有下调趋势(P>0.05),Cyp11b2基因mRNA表达水平明显上调(P <0.05);与正常组比较,SIH模型组大鼠肾上腺CREB磷酸化水平及CYP11B2蛋白表达水平明显上调(P <0.05)。结论SIH模型组大鼠肾上腺组织肾上腺素-PKA-CREBCYP11B2途径的激活是血液醛固酮含量增多、应激性高血压发病的原因之一。

慢性应激对卵巢早衰大鼠血清中E_2、FSH、LH及β- EP水平的影响

目的:通过检测慢性应激致卵巢早衰大鼠血清中E_2、FSH、LH、β-EP水平及观察卵巢组织形态以及激素水平的变化,探讨中药木尼孜其合剂对卵巢早衰的作用。方法:选用90只性成熟Wistar雌鼠,随机选取10只设为正常组(C组),其余80只为应激模型组,模型建成之后从中筛选出成卵巢早衰者分为POF模型组(POF组)及POF药物干预高、中、低剂量组,用ELISA试剂盒检测大鼠血清中E_2、FSH、LH、β-EP激素水平及观察卵巢组织形态变化。结果:木尼孜其合剂对慢性应激致卵巢早衰大鼠卵巢组织形态有一定的改善作用。与正常对照组比较模型对照组的E_2、β-EP激素水平明显降低(P<0.05), LH、FSH的水平显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,各药物干预药组上述指标均有不同程度的改变(P<0.05)。结论:慢性应激(湿、寒、光照)能够导致POF的发生,中药木尼孜其合剂有防治卵巢早衰的作用,其作用机制与能够改变血清中E2、β-EP、LH及FSH等激素水平有关。

慢性应激致卵巢早衰大鼠C3与CYP51蛋白表达水平比较

目的:制作慢性应激致卵巢早衰大鼠模型并用中药木尼孜其合剂进行药物干预,检测各组大鼠C3与CYP51蛋白表达,为治疗慢性应激型致POF提供依据。方法:选用90只性成熟Wistar雌鼠,随机选取10只设为正常组,其余80只为慢性应激模型组,模型建成之后从中筛选出成卵巢早衰者分为POF模型组(POF组)及POF药物干预高、中、低剂量组。用免疫组织化学技术检测卵巢中C3与CYP51蛋白表达。结果:C3蛋白主要表达在颗粒层细胞及卵泡液中,POF组大鼠较C组表达显著升高(P<0. 05),各药物干预组在不同程度上能够降低其表达; CYP51蛋白在各组主要表达在间质以及黄体中,POF组大鼠较C组表达显著下降(P<0. 05),各药物干预组在不同程度上能够降升高其表达。结论:慢性应激能够导致POF的发生;POF模型卵巢结构及形态的变化及炎性反应的出现可能是促进POF的重要因素之一;中药木尼孜其合剂可能通过下调C3蛋白、上调CYP51蛋白从而改善慢性应激型卵巢早衰大鼠的卵巢功能。

不同复合应激致卵巢早衰大鼠的SRB1、CYP2E1蛋白表达水平比较

目的比较卵巢早衰(POF)及中医寒邪、热邪复合应激大鼠的SRB1、CYP2E1蛋白表达水平,探讨其相互关系,为研究POF的发生、发展提供依据。方法选用50只性功能正常的雌性Wistar大鼠,随机分为POF组(A组)、热邪复合应激模型组(B组)、寒邪复合应激模型组(C组),以及2个正常对照组(N1组、N2组)。采用免疫组织化学法检测各组大鼠卵巢组织中SRB1、CYP2E1蛋白的表达水平。结果通过各组大鼠生物学表征的定性和定量指标,以及相关中医专家的断定确认模型复制成功。与N1组相比,A组和B组SRB1、CYP2E1表达升高(P<0.05)。与N2组相比,C组SRB1、CYP2E1表达升高(P<0.05)。A组与B、C组的SRB1、CYP2E1表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),B组与C组的SRB1、CYP2E1表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论西医POF、热邪和寒邪复合应激大鼠的SRB1、CYP2E1表达水平有不同程度的变化。寒邪、热邪导致的POF可能与体内胆固醇代谢异常及活性氧等物质的产生有一定联系。与寒邪复合应激相比,热邪复合应激大鼠更易发生POF。

PBL结合传统教学法在医学遗传学教学中的应用

目的:探讨PBL结合传统教学法在医学遗传学教学中的应用效果。方法:以新疆医科大学2010级口腔专业本科39名学生作为实验组,2009级口腔专业本科38名学生作为对照组。实验组在传统教学的基础上采用PBL教学法,对照组采用传统教学法。比较PBL结合传统教学法的实施效果。结果:实验组与对照组期末考试成绩和优秀人数比较,均有显著性差异(P<0.05)。结论:PBL结合传统教学法激发了学生对医学遗传学的学习兴趣,有利于培养学生自主学习能力和综合能力。

甲状腺乳头状癌组织中DAPK1与RARβ的表达及临床意义

目的:通过检测新疆地区甲状腺乳头状癌组织及甲状腺良性病变组织中DAPK1和RARβ的蛋白表达特点,探讨其在甲状腺乳头状癌发生发展中的意义。方法:采用免疫组织化学S-P法,检测DAPK1与RARβ在新疆地区38例甲状腺乳头癌、21例甲状腺良性腺瘤、13例桥本氏甲状腺炎、6例结节性甲状腺肿和6例癌旁正常甲状腺组织中的蛋白表达,并分析其与临床病理因素间的关系。结果:DAPK1在甲状腺乳头状癌中的阳性表达明显低于甲状腺腺瘤、桥本氏甲状腺炎、结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织(P<0.01);RARβ在甲状腺乳头状癌中的阳性表达明显高于在甲状腺良性腺瘤、桥本氏甲状腺炎、结节性甲状腺肿和癌旁正常甲状腺组织(P<0.01);DAPK1与RARβ在甲状腺乳头状癌中的表达与患者的年龄、性别、民族无明显相关关系(P>0.05)。结论:DAPK1可能参与了甲状腺乳头状癌的发生发展过程。检测DAPK1和RARβ的表达水平可作为判断甲状腺乳头状癌转移和预后的参考指标。

维、汉族妇女宫颈病变进程与雌激素受体1(ESR1)蛋白表达缺失的关系

以往的报道显示宫颈癌组织内的雌激素受体1(Estrogen Receptor 1,ESR1)基因启动子发生高度甲基化,并提示其基因表达水平可能下降或基因休眠。本研究从蛋白质水平观察ESR1表达缺失与宫颈病变进程的关系及其维、汉妇女族群差异。收集维吾尔族和汉族妇女宫颈炎、宫颈内上皮瘤样病变(Cervical Intraepithelial Neoplasia,CIN)I/II/III和宫颈鳞癌患者的福尔马林浸泡与石蜡包埋宫颈组织标本共180例,采用免疫组织化学方法鉴定ESR1蛋白表达水平。结果显示,ESR1蛋白在宫颈上皮和间质细胞均有表达,但是随着CIN和宫颈鳞癌的发病进程,其在上皮细胞内的表达逐渐发生缺失;ESR1蛋白表达缺失率在宫颈炎和CIN I组较低(22%),CIN II/III组明显升高(64%),宫颈鳞癌达到最高(76%),各组之间差异显著(P<0.01),但是在个体年龄之间无统计学差异(P>0.05)。维、汉妇女族群ESR1表达缺失率的变化趋势有共性,其族群差异也无统计学意义(P>0.05)。由此表明,ESR1表达缺失可能是宫颈鳞癌的早期预警指标,这为揭示该基因高度甲基化相关的表观遗传学机制提供了重要依据。

基于蛋白质组学技术筛查维吾尔族妇女宫颈癌前病变患者血浆蛋白预警标志物

依托蛋白质二维液相色谱和质谱技术,寻找与新疆维吾尔族妇女宫颈癌癌前病变高度宫颈鳞状上皮内瘤样变(HSIL)相关的血浆预警蛋白标志物,旨在对宫颈癌做到早期预防和诊断。收集维吾尔族HSIL(21例)和宫颈炎(22例)患者血浆标本并制备血浆低丰度蛋白质组样品,通过对蛋白质二维液相色谱系统的分离与鉴别分析,筛选出差异表达的组分,并运用质谱和生物信息学技术进行鉴定和功能识别分析。确定了宫颈炎和HSIL患者的基于蛋白质等电点和疏水性特征的血浆低丰度蛋白质组图谱,筛选出10个差异表达蛋白组分。结果表明,在HSIL患者血浆中3个低丰度蛋白组分含量明显上升,1个组分含量下降;而通过质谱技术鉴定出31种蛋白质,其中4种蛋白质与肿瘤进程密切相关,分别是代谢相关蛋白(APOA1)、信号转导相关蛋白(mTOR、EphA3)和免疫功能相关蛋白(HLA-DQB1)。本文针对维吾尔族妇女这一宫颈癌高发人群,展开癌前病变患者血浆低丰度蛋白组表达水平的研究,鉴定出多种差异表达血浆蛋白预警标志物,为本区宫颈癌的预防和早期鉴别诊断及癌变机制研究提供了依据。

维、汉族妇女宫颈病变中抑癌基因DAPK1、MGMT表达及其意义

目的:探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyl-transferase,MGMT)、死亡相关蛋白激酶(death associated protein kinase1,DAPK1)抑癌基因表达水平与宫颈癌前病变病理进程的关系及其族群差异。方法:收集维吾尔族和汉族妇女宫颈炎、宫颈内上皮瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈鳞癌患者石蜡包埋组织标本共218例,采用免疫组织化学方法检测MGMT、DAPK1蛋白表达水平。结果:DAPK-1阳性表达率在维、汉族妇女CINⅡ/Ⅲ和宫颈鳞癌中均明显降低,低于宫颈炎/CINⅠ(P<0.05);DAPK-1表达减弱与CIN、宫颈癌发生密切相关。MGMT在维、汉族宫颈病变病理进程中表达水平明显不一致,MGMT在汉族妇女宫颈炎/CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和宫颈鳞癌中的表达无递增或递减趋势;在维吾尔族妇女中阳性表达率随宫颈病变病理进程而升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DAPK1、MGMT基因的蛋白质表达水平变化与维、汉族妇女宫颈病变病理进程密切相关,为建立新一代族群和宫颈癌特异性早期诊断指标提供重要依据。