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基于冬凌草全长转录组的TIFY基因家族鉴定与表达分析
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作者 练从龙 兰金旭 +3 位作者 杨晶凡 李晶晶 杨灏 陈随清 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期290-301,共12页
【目的】TIFY蛋白是茉莉酸(JA)信号通路的关键调节因子,在植物生长发育、非生物胁迫以及次生代谢产物的积累中具有显著的调控作用,揭示冬凌草(Isodon rubescens)的TIFY基因可为冬凌草的抗逆性改良育种和次生代谢产物合成研究提供理论依... 【目的】TIFY蛋白是茉莉酸(JA)信号通路的关键调节因子,在植物生长发育、非生物胁迫以及次生代谢产物的积累中具有显著的调控作用,揭示冬凌草(Isodon rubescens)的TIFY基因可为冬凌草的抗逆性改良育种和次生代谢产物合成研究提供理论依据。【方法】基于冬凌草三代全长转录组序列,通过生物信息学方法对冬凌草TIFY基因家族进行鉴定和分析,并采用RT-qPCR技术分析其在不同组织中的表达特性。【结果】(1)成功从冬凌草中鉴定出12个TIFY家族基因成员;(2)理化性质分析表明,其氨基酸长度124~378 aa,分子量13924.89~39692.38 Da,等电点5.05~9.69;除IrTIFY10蛋白为稳定蛋白,其他均为不稳定蛋白;IrTIFYs蛋白的亚细胞定位均在细胞核,均为亲水性蛋白,且不含信号肽。(3)结构分析表明,IrTIFY家族蛋白成员无跨膜结构,二级结构中含量最多的结构类型为无规则卷曲;且含有多个磷酸化位点。(4)密码子偏好性分析结果表明,IrTIFY基因家族密码子偏好性较弱,稍倾向于使用以A或U结尾的密码子。(5)启动子元件分析表明冬凌草TIFY家族成员中存在多个光响应元件、激素响应元件和逆境响应元件等,但不同成员之间的元件存在差异。(6)进化树分析表明,冬凌草TIFY家族12个成员分为PPD(IrTIFY2)、ZML(IrTIFY3/8/10)、TIFY(IrTIFY7/12)和JAZ(IrTIFY1/4/5/6/9/11)4个亚家族,进化上与同为唇形科的丹参(Salvia miltiorrhiza)亲缘关系最近。(7)RT-qPCR分析结果显示冬凌草TIFY家族12个成员在不同组织中的表达量均表现为叶>茎>根,且大部分成员存在显著差异。【结论】TIFY基因家族在冬凌草的生长发育过程中可能发挥重要的调控作用,并且可能参与调控冬凌草次生代谢产物的合成,为进一步深入研究冬凌草TIFY基因家族的功能奠定基础和提供了思路。 展开更多
关键词 冬凌草 TIFY基因家族 生物信息学分析 表达分析
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茜草种子质量检验方法与分级标准研究
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作者 李文文 郭凯华 +4 位作者 练从龙 兰金旭 刘荣崴 孙永彬 陈随清 《种子》 北大核心 2024年第5期146-156,共11页
参照《中国农作物种子检验规程》,对茜草种子的质量检验方法进行研究,以期为制定科学合理的茜草种子分级标准提供依据。种子质量测定采用百粒法,千粒重为11.6139 g;茜草种子浸种时间设为11 h;种子水分测定采用种子粉碎高温(130±2)... 参照《中国农作物种子检验规程》,对茜草种子的质量检验方法进行研究,以期为制定科学合理的茜草种子分级标准提供依据。种子质量测定采用百粒法,千粒重为11.6139 g;茜草种子浸种时间设为11 h;种子水分测定采用种子粉碎高温(130±2)℃处理;种子萌发时发芽床选用沙子;冷冻处理作为茜草种子的前处理,在20℃下,24 h全黑暗作为茜草种子发芽时的光照条件;采用TTC浓度0.3%,染色时间12 h,染色温度35℃,可较好测定种子的生活力,快速检测茜草种子发芽潜力。 展开更多
关键词 茜草 种子 质量检验 分级标准
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荔枝古树胚性愈伤组织LcCu/Zn-SOD3基因启动子的克隆及功能验证 被引量:5
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作者 练从龙 卢秉国 +4 位作者 赖钟雄 冯新 林玉玲 陈裕坤 张梓浩 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期16-22,共7页
以荔枝古树"宋荔"胚性愈伤组织为材料,采用接头染色体步移法,分离获得LcCu/Zn-SOD3启动子片段长度为1 426bp,命名为ProLcCSD3(GenBank登录号:KF672186.1)。生物信息学分析表明,该启动子含有多个逆境应答元件、激素应答元件、... 以荔枝古树"宋荔"胚性愈伤组织为材料,采用接头染色体步移法,分离获得LcCu/Zn-SOD3启动子片段长度为1 426bp,命名为ProLcCSD3(GenBank登录号:KF672186.1)。生物信息学分析表明,该启动子含有多个逆境应答元件、激素应答元件、胚乳特异表达元件,且可能受WRKY和MYB等转录因子调控。通过双酶切方法,以ProLcCSD3替换载体pCAMBIA1301上的CaMv35S启动子,构建了重组质粒p1301-proLcCSD3-GUS,并成功转化农杆菌EHA105和GV3101。注射烟草的瞬时表达分析表明,该启动子片段可以驱动下游报告基因表达。转化拟南芥分析表明,该启动子驱动的下游GUS可以在拟南芥的根、茎、叶中表达,且可响应NaCl、PEG-6000、ABA、MeJA和损伤等非生物胁迫。研究表明,荔枝古树LcCu/Zn-SOD3可能参与多种非生物胁迫应答和激素信号转导途径。 展开更多
关键词 荔枝古树 胚性愈伤组织 Cu/Zn-SOD3 启动子 功能验证
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荔枝古树胚性愈伤组织Fe-SOD成员基因克隆及生物信息学分析 被引量:3
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作者 练从龙 赖钟雄 +2 位作者 卢秉国 林玉玲 冯新 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期74-81,共8页
为了解Fe-SOD在荔枝古树胚性愈伤组织保存中的分子机制,选择荔枝古树"宋荔"花药诱导而来的胚性愈伤组织为试验材料,采用同源克隆和RACE方法,获得荔枝Fe-SOD的两个转录本和基因组序列,并对该基因组的内含子进行分析。克隆获得... 为了解Fe-SOD在荔枝古树胚性愈伤组织保存中的分子机制,选择荔枝古树"宋荔"花药诱导而来的胚性愈伤组织为试验材料,采用同源克隆和RACE方法,获得荔枝Fe-SOD的两个转录本和基因组序列,并对该基因组的内含子进行分析。克隆获得长1 285 bp含有完整开放阅读框的荔枝Fe-SOD核酸序列,其编码1个含有250个氨基酸的蛋白质,将该序列命名为LcFe-SOD7a。生物信息学分析结果表明:该蛋白为稳定的、亲水的、含跨膜结构域的偏酸性蛋白质,定位于微体(过氧化物酶体)和细胞质,具有多样的磷酸化位点。LcFe-SOD7a基因组序列长2 284 bp,含7个内含子,其中第4个内含子较长,达920 bp。同时还得到其中的1条内含子驻留型可变剪接基因,该可变剪接基因提前终止,仅编码207个氨基酸的蛋白质,将该可变剪接基因命名为LcFe-SOD7b。 展开更多
关键词 荔枝古树 胚性愈伤组织 Fe—SOD 克隆 可变剪接 生物信息学分析
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不同处理对兰州百合子球根系生长的影响 被引量:2
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作者 郝瑞杰 练从龙 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2013年第2期105-108,共4页
为研究不同处理对兰州百合子球根系生长的影响,以兰州百合子球为试验材料,对不同处理下子球根数和根长进行了测定分析。结果表明:腐殖土/沙子(1∶1)是适宜百合子球基生根系发生的基质;栽培深度为子球高度2倍时能获得较多的基生根,栽培... 为研究不同处理对兰州百合子球根系生长的影响,以兰州百合子球为试验材料,对不同处理下子球根数和根长进行了测定分析。结果表明:腐殖土/沙子(1∶1)是适宜百合子球基生根系发生的基质;栽培深度为子球高度2倍时能获得较多的基生根,栽培深度与地平齐时可获得较长的根系;NAA溶液处理能促进子球生根,合适的NAA溶液浓度在1∶1 000到1∶500之间;轻划子球鳞茎盘能够提高基生根系的发生,其处理结果极显著高于对照处理;兰州百合子球根数与根长在生长过程中都表现出快-慢-快-慢的规律。 展开更多
关键词 兰州百合 子球 根系 根数 根长 生长规律
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龙眼MEE70/MSI1基因DlMEE70-1a及其可变剪接体DlMEE70-1b的分离及其在体胚发生过程中的表达分析 被引量:1
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作者 卢秉国 练从龙 赖钟雄 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期59-67,共9页
MEE70/MSI1是拟南芥母性效应胚胎滞育基因,在植物胚胎发生过程中具有重要作用。采用RACE技术获得龙眼MEE70-1a(登录号KC492117)及其可变剪接体MEE70-1b(登录号KC492118)c DNA序列,克隆MSI1g DNA(登录号KC492126)序列。生物信息学分析预... MEE70/MSI1是拟南芥母性效应胚胎滞育基因,在植物胚胎发生过程中具有重要作用。采用RACE技术获得龙眼MEE70-1a(登录号KC492117)及其可变剪接体MEE70-1b(登录号KC492118)c DNA序列,克隆MSI1g DNA(登录号KC492126)序列。生物信息学分析预测Dl MEE70-1a和Dl MEE70-1b均为亲水不稳定的酸性蛋白,主要定位于过氧化物酶体和细胞核,各含有4和1个WD-repeat结构域。MEE70-1a和MEE70-1b在体细胞胚胎发生过程实时荧光定量PCR分析结果表明,Dl MEE70-1a和Dl MEE70-1b表达趋势以心形胚为界,除了Dl MEE70-1b的不完全胚型紧实结构(ICp EC)到球形胚(GE)阶段之间,都表现出先降后升的趋势;胚性愈伤组织(EC)时期两者表达量一致且最高;心形胚(HE)时期,两者表达量一致且最低,另Dl MEE70-1b在不完全胚性紧实结构(ICp EC)表达量与心形胚基本一致。这2个表达剂量是胚胎发生的重要保障,心形胚(HE)后,Dl MEE70-1a被再次激活转录促进胚胎正常发育。从Dl MEE70-1a和Dl MEE70-1b的理化性质、WD重复结构域数量、亚细胞定位以及表达量和趋势,可以推测Dl MEE70-1a需要Dl MEE70-1b的协同来调控龙眼胚胎发育。 展开更多
关键词 龙眼 体胚发生 MEE70/MSI 母性效应 可变剪接 qPCR
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胡杨PePEX11基因参与调节盐胁迫下拟南芥的抗氧化能力 被引量:8
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作者 姚琨 练从龙 +4 位作者 王菁菁 王厚领 刘超 尹伟伦 夏新莉 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期19-28,共10页
【目的】长期非生物逆境胁迫下,植物会产生过量活性氧并造成氧化损伤,过氧化物酶体能够通过清除活性氧来调节氧化还原平衡。PEX基因参与过氧化物酶体的生物发生和增殖,PEX11基因的过表达可促进过氧化物酶体增殖,对植物的抗氧化能力的提... 【目的】长期非生物逆境胁迫下,植物会产生过量活性氧并造成氧化损伤,过氧化物酶体能够通过清除活性氧来调节氧化还原平衡。PEX基因参与过氧化物酶体的生物发生和增殖,PEX11基因的过表达可促进过氧化物酶体增殖,对植物的抗氧化能力的提升具有重要意义。胡杨是研究木本植物中抗逆机制优良材料,本文旨在探究胡杨PEX11基因对非生物胁迫的响应。【方法】本研究首先以胡杨叶片cDNA为模板克隆获得PEX11基因,命名为PePEX11,并对PePEX11蛋白进行生物信息学分析,其次采用实时荧光定量PCR分析PePEX11在胡杨中的表达模式,同时构建植物表达pCAMBIA1301-35S::PePEX11转化拟南芥,最后检测盐胁迫条件下转PePEX11拟南芥的抗氧化能力。【结果】PePEX11基因cDNA全长543 bp,编码180个氨基酸,PePEX11蛋白具有多个跨膜结构域,在膜上发挥作用。实时荧光定量PCR分析表明,该基因在胡杨体的成熟叶中表达量最高,幼叶次之,茎中最少;胡杨PePEX11基因受盐胁迫上调表达。功能分析显示,在含有100 mmol/L NaCl的培养基上,转PePEX11基因拟南芥株系的根长均显著长于野生型;对盆土中的移栽后12 d的幼苗150 mmol/L NaCl盐处理2周,转基因株系表现为营养生长良好,耐盐性较强。超表达PePEX11基因能显著提高(P<0.05)拟南芥多种抗氧化酶的活性。DAB组织染色结果表明,转基因株系叶片中H_2O_2的含量明显少于野生型。【结论】本研究从胡杨中克隆PePEX11基因,并证明PePEX11能够提高拟南芥在盐胁迫下的抗氧化能力,提升耐盐能力。 展开更多
关键词 胡杨 PePEX11 拟南芥 抗氧化 盐胁迫
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胡杨bZIP转录因子PebZIP26和PebZIP33基因的克隆及功能分析 被引量:3
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作者 张影 练从龙 +3 位作者 段卉 路信 夏新莉 尹伟伦 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期18-30,共13页
bZIP(basic region/leucine zipper motif)是一类在真核生物中分布广泛的超大转录因子家族,参与调节植物的生长发育、衰老、激素调控、能量代谢、病原防御等过程。胡杨是研究抗逆分子机制的模式木本植物,但是关于胡杨的b ZIP功能迄今未... bZIP(basic region/leucine zipper motif)是一类在真核生物中分布广泛的超大转录因子家族,参与调节植物的生长发育、衰老、激素调控、能量代谢、病原防御等过程。胡杨是研究抗逆分子机制的模式木本植物,但是关于胡杨的b ZIP功能迄今未见研究报道。本研究从胡杨中克隆得到PebZIP26和PebZIP33两个转录因子的c DNA,经分析,分别编码439与371个氨基酸且PebZIP26与PebZIP33基因的表达受干旱、脱水及盐胁迫诱导。构建植物表达载体,利用农杆菌花序侵染法转化拟南芥,获得Ca MV35S:PebZIP26和Ca MV35S:PebZIP33超表达株系和空载体对照株系。在含有150 mmol/L Na Cl及300 mmol/L甘露醇培养基上,PebZIP26和PebZIP33超表达株系根长均长于野生型,叶片嫩绿,无发黄萎蔫现象;另外,对盆土中的幼苗进行21 d的干旱处理和盐处理,超表达PebZIP26及PebZIP33株系耐旱耐盐性较强,表现为胁迫环境中植株营养生长较好,株高显著高于野生型(WT)及空载体对照株系,干旱复水后,植株存活率为61%及48%,显著高于WT的9%及空载体对照的12%。超表达PebZIP26及PebZIP33株系相比于WT和abf1及tga1(拟南芥同源基因ABF1及TGA1突变体)气孔关闭对外源ABA处理更加敏感,且对氧化胁迫的抗性较强。综上所述,胡杨PebZIP26和PebZIP33转录调节因子可能通过调控气孔开度和活性氧水平及根的生长正向调节植物抗旱耐盐性,进一步丰富了木本植物b ZIP的基因功能认识,为遗传育种提供基因资源及理论依据。 展开更多
关键词 胡杨 Peb ZIP26 Peb ZIP33 拟南芥 抗旱 抗盐
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胡杨NAC转录因子PeNAC045基因的克隆及功能分析 被引量:2
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作者 张晓菲 路信 +3 位作者 段卉 练从龙 夏新莉 尹伟伦 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1-10,共10页
NAC(NAM、ATAF1/2和CUC2)域蛋白是植物特有的最大的转录因子家族之一,在调节衰老,细胞分裂,木质形成,生物和非生物胁迫等方面发挥重要作用。本研究从胡杨中成功克隆出与胁迫相关的基因,并命名为PeNAC045。测序结果表明,PeNAC045基因编... NAC(NAM、ATAF1/2和CUC2)域蛋白是植物特有的最大的转录因子家族之一,在调节衰老,细胞分裂,木质形成,生物和非生物胁迫等方面发挥重要作用。本研究从胡杨中成功克隆出与胁迫相关的基因,并命名为PeNAC045。测序结果表明,PeNAC045基因编码区长度为915 bp,编码304个氨基酸,与毛果杨PtrNAC045的氨基酸一致性为96.05%。对PeNAC045基因在NaCl和干旱胁迫下的表达情况进行了分析,PeNAC045基因的表达受高盐和干旱的强烈诱导。利用PeNAC045的cDNA全长构建表达载体pBI121-PeNAC045-GFP,测序确认后,将重组结构和阳性对照(空载体)分别转化野生型拟南芥(Col-0),进行亚细胞定位观察,结果显示PeNAC045-GFP融合蛋白定位于细胞核上,并由DAPI进行核染色标定。利用农杆菌花序侵染法将构建的表达载体pCAMBIA1301-Pe NAC045转化野生型拟南芥和突变体(ataf2),通过PCR鉴定,获得过表达植株及ataf2/PeNAC045回补株系。对各株系进行NaCl胁迫处理,分析PeNAC045基因的生物学功能。在150 mmol/L NaCl胁迫下,相比于拟南芥突变体和野生型植株,拟南芥PeNAC045过表达株系的萌发率降低,根长变短。此外,拟南芥PeNAC045过表达株系的株高明显低于其他株系,其在苗期对盐胁迫的敏感性增加。研究结果表明,在盐胁迫下,PeNAC045作为转录调节因子,负调控胁迫相关基因的表达。 展开更多
关键词 胡杨 PeNAC045 拟南芥 非生物胁迫 转基因 NACL
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文心兰OnCOBRA基因克隆及表达模式分析 被引量:2
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作者 李玲 赖钟雄 +2 位作者 陈裕坤 练从龙 林鹤延 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第8期1551-1558,共8页
以文心兰试管苗为材料,采用RT-PCR结合RACE法,克隆文心兰OnCOBRA基因的cDNA全长和DNA序列。结果表明:COBRA全长为1 601 bp,开放阅读框(ORF)为1 386 bp,共编码461个氨基酸;OnCOBRA的DNA序列共2 949 bp,且含有6个外显子和5个内含子。生物... 以文心兰试管苗为材料,采用RT-PCR结合RACE法,克隆文心兰OnCOBRA基因的cDNA全长和DNA序列。结果表明:COBRA全长为1 601 bp,开放阅读框(ORF)为1 386 bp,共编码461个氨基酸;OnCOBRA的DNA序列共2 949 bp,且含有6个外显子和5个内含子。生物信息学结果表明,OnCOBRA属于不稳定的疏水蛋白,具有信号肽、跨膜结构和CCVS保守区域,亚细胞定位于细胞膜中;与无油樟、玉米、籼稻、拟南芥等具有较高的同源性。系统进化树分析结果表明,文心兰OnCOBRA蛋白与玉米(ZmCOBRA)、无油樟(AtCOBRA)、籼稻(OsCOBRA)处于统一分枝,推测OnCOBRA基因是COBRA基因家族的成员。qPCR结果表明,OnCORBA为组成型表达,在成苗期表达量最高,在文心兰类原球茎时期表达量最低。 展开更多
关键词 文心兰 COBRA 克隆 生物信息学 qPCR
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气雾栽培研究进展及其在药用植物中的应用前景 被引量:5
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作者 练从龙 兰金旭 +2 位作者 王利丽 杨晶凡 陈随清 《中国现代中药》 CAS 2020年第3期461-465,共5页
气雾栽培是当前多学科结合下农业领域最先进的无土栽培模式,是未来农业发展的方向。本文综述了气雾栽培技术的组成系统、优缺点和三大科学研究方向(即气雾栽培类型研究、营养液研究和自动监控技术研究),结合药用植物栽培中的问题,探讨... 气雾栽培是当前多学科结合下农业领域最先进的无土栽培模式,是未来农业发展的方向。本文综述了气雾栽培技术的组成系统、优缺点和三大科学研究方向(即气雾栽培类型研究、营养液研究和自动监控技术研究),结合药用植物栽培中的问题,探讨了气雾栽培用于解决药用植物种植困境的优势。气雾栽培能够实现对药用植物的精准栽培,将有非常广阔的应用前景。 展开更多
关键词 气雾栽培 营养液 监控技术 药用植物
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基于转录组测序分析研究山橿根乙酸乙酯部位治疗胃溃疡大鼠的作用机理 被引量:3
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作者 纪宝玉 裴莉昕 +4 位作者 陈随清 练从龙 孙孝亚 付宇航 王炫璎 《中药材》 CAS 北大核心 2021年第10期2435-2440,共6页
目的:初步探讨山橿缓解胃溃疡大鼠作用的分子机制。方法:将大鼠随机平均分成正常对照组、模型组、山橿根乙酸乙酯部位组,观察各组中胃溃疡的表型,并对该3组采用转录组学技术,获得各组中差异基因表达情况,并筛选出参与山橿调控胃溃疡的... 目的:初步探讨山橿缓解胃溃疡大鼠作用的分子机制。方法:将大鼠随机平均分成正常对照组、模型组、山橿根乙酸乙酯部位组,观察各组中胃溃疡的表型,并对该3组采用转录组学技术,获得各组中差异基因表达情况,并筛选出参与山橿调控胃溃疡的基因表达信号通路。结果:在山橿给药后,胃溃疡的面积明显低于模型组。高通量测序结果的GO富集分析表明胃溃疡的产生和山橿对胃溃疡的治疗过程中,涉及生物过程、细胞组分和分子功能中的多个方面,表明胃溃疡的形成与山橿对其的治疗是多组分、多基因相互作用的结果。KEGG富集结果表明,MAPK信号通路在参与胃溃疡的发生和山橿对其的治疗中起着重要的作用,其中Gadd45g基因可能作为其关键的一个靶点发挥作用。此外,胃溃疡的产生和山橿的治疗还与PI3K-αkt signaling pathway、Pathways in cancer等炎症相关信号通路有关。结论:本研究初步探讨了胃溃疡形成及山橿缓解胃溃疡大鼠的分子调控机制,为进一步解析山橿根乙酸乙酯部位治疗胃溃疡的分子机制研究奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 山橿 胃溃疡 转录组
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韭的本草考证 被引量:4
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作者 兰金旭 王静 +3 位作者 张飞 练从龙 詹志来 陈随清 《中国现代中药》 CAS 2020年第11期1879-1887,共9页
韭是中国古代治疗疾病的常用中药。为了明晰韭的应用历史,通过查阅历代本草书籍,从名称、基原、产地、入药部位、性味归经、功效和加工炮制等方面进行了梳理考证。韭在秦汉时期已有人工栽培,药用来源为韭及其同属近缘种。宋代种植广泛,... 韭是中国古代治疗疾病的常用中药。为了明晰韭的应用历史,通过查阅历代本草书籍,从名称、基原、产地、入药部位、性味归经、功效和加工炮制等方面进行了梳理考证。韭在秦汉时期已有人工栽培,药用来源为韭及其同属近缘种。宋代种植广泛,主流品种为韭Allium tuberosum Rottl.ex Spreng.。宋代及之前,以韭、韭根和韭菜子等部位入药,清代韭根使用减少,现代以韭菜子入药为主。宋明时期,韭的加工炮制方法增多,性味归经和功效增加。清代多沿用历代的记载。现代河南、安徽、山东等地韭菜子产量较高。建议加强韭的活性成分及其药理作用研究。 展开更多
关键词 韭菜子 本草考证
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平贝母特异性PCR鉴别方法研究 被引量:2
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作者 杨灏 陈随清 +1 位作者 练从龙 张雪雨 《中药材》 CAS 北大核心 2021年第7期1584-1589,共6页
目的:建立一种客观、准确、有效的平贝母位点特异性PCR鉴别方法。方法:收集平贝母及其他贝母材料,提取样品总基因组DNA,分析比对平贝母及其他贝母ITS片段,根据差异位点设计平贝母特异性引物,采用两步法进行PCR扩增,优化反应体系并对该... 目的:建立一种客观、准确、有效的平贝母位点特异性PCR鉴别方法。方法:收集平贝母及其他贝母材料,提取样品总基因组DNA,分析比对平贝母及其他贝母ITS片段,根据差异位点设计平贝母特异性引物,采用两步法进行PCR扩增,优化反应体系并对该方法进行耐受性和适用性考察。结果:建立了平贝母的位点特异性PCR鉴别方法:引物的序列为PB-Y1F:CGGGCGGACAATTTACTT,PB-Y1R:AGATAGAGAGCGGGCGTC;反应体系:2×Taq Plus Master Mix 12.5μL,上下游引物各1μL(10μmol),DNA模板1μL,ddH_(2)O 9.5μL;扩增程序:95℃1 min;95℃10 s,57℃25 s,30个循环;72℃15 s。平贝母均能扩增出约186 bp片段,其他贝母及阴性对照无条带,方法的适用性良好。结论:该实验设计的平贝母特异性引物专属性强,所建立的特异性PCR方法可以用于平贝母药材的准确鉴别。 展开更多
关键词 平贝母 中药分子鉴定 特异性PCR ITS
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枸橘生药学特征研究
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作者 兰金旭 郭晓凯 +2 位作者 练从龙 王锴乐 陈随清 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2586-2590,共5页
目的研究枸橘的生药学特征。方法采用性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别进行定性鉴别,按2015年版《中国药典》附录中的方法对水分、总灰分和浸出物进行检查,HPLC检测柚皮苷、新橙皮苷含量。结果药材性状、显微鉴别特征明显;16批样品的薄层... 目的研究枸橘的生药学特征。方法采用性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别进行定性鉴别,按2015年版《中国药典》附录中的方法对水分、总灰分和浸出物进行检查,HPLC检测柚皮苷、新橙皮苷含量。结果药材性状、显微鉴别特征明显;16批样品的薄层色谱斑点清晰;水分8.52%~12.12%,总灰分3.01%~5.37%,浸出物12.59%~16.84%,柚皮苷3.24%~7.60%,新橙皮苷1.28%~2.31%。结论该方法准确稳定,重复性好,可为枸橘质量标准制定提供依据。 展开更多
关键词 枸橘 性状 柚皮苷 新橙皮苷
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遥感技术在药用植物资源中的应用
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作者 兰金旭 张飞 +1 位作者 练从龙 李琛 《科技创新与应用》 2021年第29期167-170,共4页
近20年来,遥感技术在药用植物资源的调查、区划和动态监测中被广泛应用。随着遥感影像分辨率的提高,药用植物遥感影像解译技术水平和识别精准度也在逐步提高。由于药用植物的识别特征差异和卫星遥感技术的限制,目前遥感技术在药用植物... 近20年来,遥感技术在药用植物资源的调查、区划和动态监测中被广泛应用。随着遥感影像分辨率的提高,药用植物遥感影像解译技术水平和识别精准度也在逐步提高。由于药用植物的识别特征差异和卫星遥感技术的限制,目前遥感技术在药用植物中应用的种类偏少,应用范围较小。无人机遥感适用于分散、不规则局部区域药用植物的识别与动态监测,可以较好地补充卫星遥感技术的限制。高光谱遥感技术在药用植物中的应用处于探索阶段。建议建立卫星遥感技术和无人机遥感技术相结合的药用植物资源动态监测平台,实现药用植物资源蕴藏量的估算与预报,形成药用植物产量和品质动态监测的长期机制,促进药用植物资源的协调可持续发展。 展开更多
关键词 遥感技术 药用植物 无人机 高光谱遥感
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基于植物识别软件的药用植物学野外实习教学模式探索
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作者 练从龙 兰金旭 +3 位作者 谢小龙 陈随清 纪宝玉 苏秀红 《中医药管理杂志》 2024年第3期22-24,共3页
随着互联网技术的发展和智能手机的普及,基于手机、PAD等移动学习的模式极大地满足了学习者的个性化学习需求,如何更好地引导学生利用手机等移动设备进行自主学习是教育教学研究的热点。文章基于传统药用植物学野外实习模式的不足,分析... 随着互联网技术的发展和智能手机的普及,基于手机、PAD等移动学习的模式极大地满足了学习者的个性化学习需求,如何更好地引导学生利用手机等移动设备进行自主学习是教育教学研究的热点。文章基于传统药用植物学野外实习模式的不足,分析了当下智能手机植物识别APP在药用植物学野外实习中促进学生自主学习的可行性,结合当下以学生为主体、将学习的决定权从教师转移给学生的翻转课堂教学模式,提出了基于智能手机植物识别APP探索药用植物学野外实习翻转课堂教学模式。该模式对提高学生野外实习的自主性学习和教学的整体效果具有明显的促进作用,可为药用植物学野外实习教学模式的创新改革提供一定参考。 展开更多
关键词 药用植物学 野外实习 翻转课堂 植物识别APP
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地黄脱毒技术研究进展
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作者 闫品卓 安娜 +3 位作者 谢小龙 练从龙 刘晓玲 陈四清 《中医学报》 CAS 2024年第6期1236-1243,共8页
长期的无性繁殖,使地黄遭受病毒侵染而产生病毒病,导致药材产量和品质降低,严重影响地黄的临床疗效和经济效益。目前尚无有效特效药能治疗病毒病,对地黄病毒病的防控研究目前主要集中在脱毒种苗的培育上,脱毒苗在农艺性状、生理特性、... 长期的无性繁殖,使地黄遭受病毒侵染而产生病毒病,导致药材产量和品质降低,严重影响地黄的临床疗效和经济效益。目前尚无有效特效药能治疗病毒病,对地黄病毒病的防控研究目前主要集中在脱毒种苗的培育上,脱毒苗在农艺性状、生理特性、抗病性、产量及品质等方面与病毒苗相比具有明显优势。今后,可从地黄脱毒方法、地黄脱毒苗培养技术、基因型对植物脱毒和组织培养的影响、地黄人工种子的研制等方面更加深入地研究地黄脱毒技术。 展开更多
关键词 地黄 脱毒技术 地黄脱毒苗 地黄人工种子 地黄病毒病
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野生和栽培地黄特异性PCR鉴别方法研究
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作者 杨灏 佐々木陽平 +4 位作者 练从龙 杨晶凡 薛淑娟 王利丽 陈随清 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期2098-2103,共6页
目的:基于PsbA-trnH片段,利用测序技术寻找野生和栽培地黄此区域序列差异位点,为地黄野生和栽培种的分子鉴定提供依据。方法:提取地黄叶片的DNA,以PsbA-trnH序列通用引物进行PCR扩增,扩增产物经纯化后测序,利用MEGA 7.0软件比对寻找差... 目的:基于PsbA-trnH片段,利用测序技术寻找野生和栽培地黄此区域序列差异位点,为地黄野生和栽培种的分子鉴定提供依据。方法:提取地黄叶片的DNA,以PsbA-trnH序列通用引物进行PCR扩增,扩增产物经纯化后测序,利用MEGA 7.0软件比对寻找差异位点,基于差异位点设计特异性引物,采用两步法进行PCR扩增,优化反应体系并对此方法进行耐受性和适用性考察。结果:建立了野生和栽培地黄的位点特异性PCR鉴别方法:引物的序列为ZP1-F:TTT AGT ATT TAA TAT TTG AT,ZP1-R:CAA ATT CGA CTT TTT GCT GA;反应体系:2×Taq Plus Master Mix 12.5μL,上下游引物各1μL(10μmol/L),DNA模板1μL,ddH2O 9.5μL;扩增程序:95℃1 min;95℃10 s,39℃30 s,30×;72℃15 s。栽培地黄均能在100~200 bp之间扩增出2条条带,野生地黄无条带,方法的适用性和普适性良好。结论:本次实验所建立的特异性PCR鉴别方法可作为野生种和栽培种地黄鉴定准确而有效的分子方法。 展开更多
关键词 野生和栽培地黄 中药分子鉴定 特异性PCR PSBA-TRNH
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新冠疫情下药用植物学野外实习模式的探索与实践 被引量:3
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作者 兰金旭 练从龙 +3 位作者 罗晓铮 苏秀红 陈随清 董诚明 《中医药管理杂志》 2022年第13期23-25,共3页
药用植物学野外实习是重要的教学环节。在新冠疫情背景下,传统的集中式教学难以适应防控要求,文章通过对线上线下混合式药用植物学野外实习模式进行探索,提出了以任务驱动为中心,线上自学和线下指导相结合的混合式教学方式,将形成性评... 药用植物学野外实习是重要的教学环节。在新冠疫情背景下,传统的集中式教学难以适应防控要求,文章通过对线上线下混合式药用植物学野外实习模式进行探索,提出了以任务驱动为中心,线上自学和线下指导相结合的混合式教学方式,将形成性评价贯穿于实习全过程,较好地完成了疫情下的药用植物学野外实习教学任务。 展开更多
关键词 药用植物学野外实习 新冠疫情 混合式教学
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