孕期双酚A染毒对子代大鼠海马中诱导型一氧化氮合酶表达及活性的影响

[背景]现有研究表明双酚A(BPA)具有一定的神经毒性。一氧化氮(NO)是神经系统的重要逆行信使,其含量改变在神经毒性机制中发挥一定作用。当外源性化学物作用于机体时,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达与活性变化对于NO的生成具有一定影响。[目的]探讨孕期BPA染毒对各发育阶段子代大鼠海马中iNOS表达及活性的影响。[方法]将60只SPF级健康SD孕鼠随机分为对照组和0.05、0.5、5、50 mg·kg^-1·d^-1的BPA染毒组,每组12只。于妊娠期第5天(GD5)-GD19以灌胃的方式进行染毒,以玉米油为溶剂配制相应浓度的BPA试剂,对照组母鼠灌胃玉米油。于GD20每组各处死6只孕鼠,剥离胎盘,取胎鼠脑组织,分离海马;剩余6只孕鼠继续饲养,仔鼠于出生后第21天(PND21)断乳,分别于PND21和PND56时,每组取6只仔鼠,经乙醚麻醉后处死,取仔鼠的海马组织。计算GD20、PND21、PND56这3个发育阶段仔鼠脑组织脏器系数,采用试剂盒检测海马组织中的NO含量、iNOS活性,采用实时定量PCR法测定各组iNOSmRNA水平,通过Western blotting检测iNOS的蛋白表达。[结果]NO检测结果显示,GD20各BPA染毒组仔鼠海马组织中NO含量均低于对照组(均P <0.05);而PND21和PND56的各BPA染毒组仔鼠(除PND21的0.05 mg·kg^-1组外)海马组织中NO含量均高于对照组,但PND56的0.5、5、50 mg·kg^-1BPA组仔鼠海马中NO含量低于0.05 mg·kg^-1组(均P <0.05)。iNOS mRNA表达结果显示,各发育阶段的BPA组仔鼠海马中iNOS mRNA含量均高于对照组(均P <0.05);其中GD20的50 mg·kg^-1 BPA组仔鼠海马中iNOS mRNA含量低于0.5 mg·kg^-1组(P <0.05);PND21的0.5、5、50 mg·kg^-1 BPA组仔鼠海马中iNOS mRNA含量均低于0.05 mg·kg^-1 BPA组,5、50 mg·kg^-1组仔鼠海马中iNOS mRNA含量也低于0.5 mg·kg^-1 BPA组(均P <0.05);PND56的5 mg·kg^-1 BPA组仔鼠海马中iNOS mRNA含量高于0.05、0.5 mg·kg^-1组,而50 mg·kg^-1组的iNOS mRNA含量低于5 mg·kg^-1组(均P <0.05)。iNOS蛋白表达结果显示,各发育阶段的0.5、5、50 mg·kg^-1 BPA组仔鼠海马中iNOS蛋白相对表达量均高于对照组和0.05 mg·kg^-1 BPA组(均P <0.05),其中GD20的50 mg·kg^-1 BPA组仔鼠海马中的iNOS蛋白相对表达量也高于5 mg·kg^-1组(P <0.05);各发育阶段对照组和0.05 mg·kg^-1BPA组iNOS的蛋白相对表达量相比较,差异无统计学意义(均P> 0.05)。而iNOS活性的检测结果显示,GD20的50 mg·kg^-1 BPA组仔鼠海马中iNOS活性高于对照组及其他各剂量BPA组(均P <0.05);而各BPA染毒组的PND21和PND56仔鼠海马中iNOS活性均高于各自对照组,其中PND21的0.5 mg·kg^-1 BPA组仔鼠海马中iNOS活性也高于0.05 mg·kg^-1组(均P <0.05)。[结论]孕期BPA染毒可促进不同发育阶段仔鼠海马组织中iNOS的基因及蛋白表达,增加iNOS酶活性,该过程在孕期BPA染毒所致仔鼠出生后NO含量升高以及由于NO含量升高所可能导致的神经毒性损伤中发挥一定作用。