西红花苷对大鼠实验性高脂血症的影响及其机制研究

目的观察西红花苷对实验性高脂血症的影响并探讨其作用机制。方法采用高胆固醇饮食饲养SD大鼠2个月,造成高脂血症模型,观察西红花苷对大鼠血脂质的影响。此外体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞(SMC),以加高脂血清和加西红花苷等不同培养基分组培养,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应(MTT)法检测平滑肌细胞活性,以Western杂交检测p38MAPK磷酸化。结果西红花苷能明显降低血胆固醇,甘油三酯、LDL含量,升高HDL及其亚型含量。西红花苷可明显抑制高脂血清培养下SMC的增殖,其吸光度低于造模组。高脂血清组磷酸化p38MAPK的表达有所增加,加入西红花苷后可显著降低p38MAPK的活化,并能逆转高脂血清诱导的SMC增殖。结论西红花苷可有效地调整脂蛋白代谢,抑制SMC增殖,并通过抑制p38MAPK而使平滑肌细胞增殖减少,从而防治高脂血症、阻止动脉粥样硬化发生发展。

表没食子儿茶素没食子酸酯对小鼠油酸型肺损伤的保护作用

目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对油酸型小鼠肺损伤的保护作用,并探讨其作用机制。 方法 以油酸型小鼠为研究对象,利用光镜、电镜观察肺部形态学变化,称重法计算肺指数及湿/干重比(w/d),应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中TNF α含量及esternblotting法测定肺组织中p38MAPK的磷酸化程度。结果 EGCG可明显减轻油酸组小鼠肺组织病理学改变,降低肺指数及肺湿/干重比,降低血清中炎症因子TNF α的含 量,抑制肺组织中p38MAPK的磷酸化。结论 EGCG有明显的抗油酸型小鼠肺损伤的作用,其作用机制可能与抑制p38MAPK的磷酸化,并最终导致TNF α的合成与释放减少有关。

西红花苷对培养的牛内皮细胞内钙的调节作用

目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺（5-HT）、组胺（His）、过氧化氢（H2O2）所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含钙的Hank’s液中,5-经色胺、组胺、过氧化氢能明显升高静息状态的细胞内钙,增幅分别为280％、320％、285％。西红花苷1、10μmol/L对5-羟色胺、组胺、过氧化氢引起的钙增高有显著的抑制作用,并呈一定的剂量依赖性。0.1μmol/L西红花苷对细胞内钙升高无显著影响。结论 西红花苷抗动脉粥样硬化、高血压及炎症作用可能与其内皮细胞保护作用有关。

西红花苷对血管内皮细胞的保护作用研究

目的 研究西红花苷对过氧化氢所致牛内皮细胞 (BAEC)损伤的保护作用 ,并初步探讨其可能的作用机制。方法 利用过氧化氢刺激 BAEC,观察了西红花苷对细胞培养液内 MDA、SOD、L DH含量或活性的影响 ,并对细胞进行流式细胞分析和细胞内钙测定 ,观察了该药对细胞凋亡及胞内钙的影响。结果 西红花苷可剂量依赖性的减少 MDA生成 ,提高 SOD活性 ,阻止 L DH的外漏 ,还能抑制过氧化氢所致细胞内钙升高 ,减少细胞凋亡百分率。结论 西红花苷对过氧化氢所致 BAEC损伤有保护作用 ,其作用机制可能与其拮抗细胞内钙有关 ,值得在临床上推广应用治疗心血管疾病。

锌对大鼠精子头尾连接的保护作用研究

目的:观察微量元素锌在大鼠精子头尾连接中的作用。方法:利用相差显微镜研究大鼠睾丸附睾头、附睾尾、睾丸中的精子在SDS或SDS-EDTA中的头尾解离作用以及锌对其稳定百分率的影响。结果:睾丸、附睾头、尾的精子在SDS或SDS-EDTA中均有不同程度的解离,而睾丸精子解离率最高。EDTA能使附睾头、尾的精子解离率增加,但仍然有一定比率的精子可以对抗EDTA的作用而不发生解离反应,并且这种比率随着孵育时间的加长而有所增加。同时发现锌能可逆性地抑制这种解离反应的发生。结论;锌对精子头尾的连接有一定的保护作用,其作用机制可能与精子核染色质部位的巯基有关。

内毒素损伤和抗氧化剂的保护作用

内毒素休克是一个系统性炎症反应,主要由内毒素诱导的炎症因子所引发,活性氧和一氧化氮是内毒素血症发生过程中重要的调节因素。阐述了活性氧和活性氮在内毒素毒性机制中的地位和作用,并讨论了抗氧化剂对内毒素损伤的保护作用及其临床应用前景。

缺锌对雄性大鼠生殖系统影响的实验研究

:参照国外配方 ,制成缺锌饲料建立缺锌大鼠模型 ,研究缺锌对雄性大鼠生殖系统生长发育及其与精子质量的关系。结果表明 :缺锌组大鼠血清锌与睾酮显著低于其他各组 ,精囊腺、包皮腺、提肛肌的脏器指数、精子密度、活率、穿透力等均较其他组低。睾丸形态学观察发现 :睾丸间质细胞及各级生精细胞形态异常。

姜黄素对大鼠油酸型急性肺损伤的保护作用

目的:研究姜黄素对大鼠油酸型急性肺损伤(ALI)的保护作用,探讨其作用机制。方法:动物随机分为空白组、模型组、姜黄素组(剂量分别为5,10,20 mg.kg-1)、地塞米松组1 mg.kg-1。制备大鼠油酸型ALI模型,以动物肺功能测定仪测定动态肺顺应性(Cdyn)的变化,利用光镜观察肺部组织形态学变化,称重法计算肺指数及湿/干比(W/D),紫外分光光度法检测肺组织微血管的渗透性和支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素6(IL-6)和白介素10(IL-10)的含量。结果:姜黄素可明显抑制Cdyn降低,改善大鼠肺功能,降低肺指数及湿/干重比,降低肺渗透性,降低BALF中蛋白及TNF-α(250.4±21.6 vs 172.53±14.88,122.2±10.98,108.69±3.39)ng.L-1,IL-6(763.6±88.33 vs 207.41±15.55,172.13±21.91,142.92±4.32)ng.L-1的水平,提高IL-10(98.90±2.99 vs 208.44±16.30,218.43±6.23,252.70±20.58)ng.L-1的含量,减轻肺组织病理学损伤。结论:姜黄素对油酸型ALI具有保护作用,其可能机制为调节致炎因子与抗炎因子。

艾拉莫德对脂多糖激活大鼠肺泡巨噬细胞系TNFα产生及NF-κB活性的抑制作用

目的研究非甾体抗炎药艾拉莫德(T-614)对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞系(NR8383)前炎症反应因子TNFα基因表达、蛋白合成的影响及其对核因子κB(NF-κB)的作用。方法体外培养NR8383经T-614(13.4,26.7及53.4μmol.L-1)处理,LPS刺激后应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中TNFα的水平,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TNFαmRNA水平,ELISA法检测NF-κB的活性。结果T-614对LPS诱导的NR8383细胞TNFαmRNA水平和蛋白水平的上调有显著抑制作用,对NF-κB的转录活性也有抑制作用。结论T-614可能通过抑制LPS诱导的NR8383的NF-κB活性而降低TNFα的产生。

白藜芦醇对大鼠慢性阻塞性肺疾病的干预作用及其机制

研究白藜芦醇对大鼠慢性阻塞性肺疾病的作用及可能的机制。单次气管注射博莱霉素(BLM)及连续27d烟熏建立大鼠COPD模型,检测动脉血气参数变化、肺功能指标,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)含量,检测肺湿/干重(W/D)比值,观察组织病理学变化。实验发现,白藜芦醇能抑制大鼠COPD的PaO2的下降,升高FEV0.3/FVC的比值,降低BALF中ICAM-1的含量,降低肺W/D比值,减轻肺组织病理学损伤。结果提示,白藜芦醇对大鼠COPD具有干预作用,其作用机制可能与抑制炎症因子的释放有关。

西红花酸对心肌细胞氧化应激性损伤的作用

目的 :探讨西红花酸对心肌细胞氧化应激性损伤的效应。方法 :采用过氧化氢 (H2 O2 )诱导法制备大鼠培养心肌细胞氧化应激损伤模型 ,通过观察培养心肌细胞的形态 ,检测细胞培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)活性、细胞内丙二醛 (MDA)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性及培养细胞台盼蓝摄取率 ,反映西红花酸对该模型的影响。结果 :在本实验使用浓度范围内 ,H2 O2 损伤培养心肌细胞的作用呈浓度依赖性地增大 ;西红花酸则能减少该氧化应激细胞的形态学改变、降低培养液中LDH活性和胞内MDA含量、增加胞内SOD活性及减少细胞死亡数量。结论 :西红花酸对H2 O2 造成的培养心肌细胞氧化应激性损伤具有明显的保护作用。

西红花酸对过氧化氢诱发心肌细胞[Ca^(2+)]i改变的作用

目的 观察西红花酸对 H2 O2 诱发培养心肌细胞 [Ca2 + ]i改变的效应 ,并探讨其机制。方法 应用 Fluo- 3/AM荧光标记技术和激光扫描共聚焦显微镜 (L SCM)检测不同因素处理的单个培养心肌细胞 [Ca2 + ]i。结果H2 O2 呈浓度依赖性地使单个培养心肌细胞 [Ca2 + ]i增加 ,并不受细胞外环境是否存在 Ca2 +的影响 ,L-型 Ca2 +通道阻滞剂维拉帕米也不能完全中止 [Ca2 + ]i的增加 ;不同剂量的西红花酸则能减低 H2 O2 引发的单个培养心肌细胞[Ca2 + ]i增高的幅度。结论 西红花酸能明显抑制 H2 O2 诱发培养心肌细胞 [Ca2 + ]i增加的作用 ,可能与调整胞内钙库 Ca2 + 的释放和摄取、Ca2 + 内流等机制有关。

去甲丹皮酚衍生物的合成及其抗炎活性

去甲丹皮酚或丹皮酚分别与非甾体抗炎药(NSAIDs)阿司匹林、布洛芬和双氯芬酸偶联,合成了5个新的去甲丹皮酚衍生物(3a～3c,4b)和丹皮酚衍生物(5b),其结构经1H NMR,IR和HR-MS表征。二甲苯致小鼠耳肿胀试验结果表明,3和5均有较强的抗炎活性,与阴性对照对CMC-Na相比,表现出显著性差异(P<0.01)。

地胆草倍半萜内酯化合物体外抗肿瘤作用的研究

采用四甲基偶氮唑盐比色法和琼脂糖凝胶电泳法等研究地胆草倍半萜内酯化合物scabertopin（1）和isodeoxyelephantopin（2）在体外对SMMC-7721、Hela和Caco-2三种肿瘤细胞增殖的影响。发现这两个化合物在1～100 μM浓度内对三种肿瘤细胞增殖有显著的抑制作用，且呈一定剂量依赖关系。二者抑制SMMC-7721细胞增殖的IC50值分别为29.27和9.54 μM；抑制Hela细胞增殖的IC50值分别为22.19和25.39 μM；抑制Caco-2细胞增殖的IC50值分别为35.99和25.76 μM。时效性实验还显示2对Hela细胞增殖的抑制作用呈时间依赖关系。2浓度 100 μM作用Hela细胞48 h琼脂糖凝胶电泳显示明显的细胞凋亡“梯状”条带（DNA ladder），提示isodeoxyelephantopin抑制Hela细胞作用是通过诱导其凋亡。

西红花酸对H_2O_2诱发心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的影响

目的:探讨西红花酸对过氧化氢(H2O2)诱导的培养心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的作用。方法:通过光镜观察细胞形态、碘化丙啶(PI)染色法和流式细胞术相结合检测培养细胞凋亡率、免疫荧光染色法和流式细胞术相结合检测细胞中caspase-3、Bcl-2蛋白。结果:在本实验使用浓度范围内,各浓度H2O2组细胞形态明显改变、凋亡率明显高于正常对照组,1×10-4mol·L-1H2O2可使培养心肌细胞Bcl-2蛋白表达明显减少,而caspase-3表达明显增多;各剂量西红花酸组细胞形态学改变减少、凋亡率明显低于1×10-4mol·L-1H2O2组,细胞中Bcl-2蛋白减少幅度与caspase-3增加幅度均减小,且较高浓度(5×10-5mol·L-1)西红花酸组比较低浓度(5×10-7mol·L-1)西红花酸组作用也更明显(P<0.05)。结论:西红花酸能够减轻H2O2对培养心肌细胞的损伤性凋亡作用,可能与稳定细胞内凋亡相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2的功能有关。

灰绿葡萄孢发酵液中天然型脱落酸的分离纯化

对脱落酸产生菌灰绿葡萄孢 (Botrytiscinerea)发酵生产脱落酸的分离纯化工艺进行了初步探索。发酵液经过滤、浓缩、去杂、乙酸乙酯萃取、NaHCO3 反萃取、硅胶柱层析、结晶等步骤进行分离纯化可得脱落酸 ,测定总收率可达 39 7%。产品经光谱鉴定、旋光测定证实为天然型脱落酸 ,纯度在 98%以上。

氧化苦参碱对兔油酸型急性肺损伤的保护作用研究

目的:研究氧化苦参碱对急性肺损伤的保护作用并探讨其机制。方法:采用静脉注射油酸的方法复制家兔急性肺损伤模型。动物随机分为6组:正常组、模型组、地塞米松组和氧化苦参碱组(20,40,80 mg.kg-1)。实验期间记录动物呼吸频率,不同时间点行血气分析,并与注射油酸后3 h时收集支气管肺泡灌洗液(BALF)测定白细胞介素-8(IL-8)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1),实验结束测定肺干、湿重,计算湿/干重比,并行肺组织的病理学检查。结果:氧化苦参碱可明显减轻油酸模型组兔肺组织病理学改变,降低肺湿/干重比,升高PaO2/F iO2的比值,降低BALF中IL-8和ICAM-1的含量。结论:OMT能有效地保护油酸致家兔急性肺损伤,可能通过抑制细胞因子的过度生成从而达到肺保护作用。

卢帕他定干预兔油酸型急性肺损伤的研究

急性肺损伤(ALI)就是通常所定义的急性非心源性的水肿性肺损伤,是临床重症监护病人主要的死亡原因。本研究以油酸静注制备新西兰兔ALI模型,检测动脉血气参数变化,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白和血小板活化因子(PAF)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及白细胞介素-8(IL-8)的含量,检测肺湿/干重(W/D)比值,观察组织病理学变化。结果表明,卢帕他定能抑制兔油酸型ALI的Pao2的下降,降低BALF中PAF,ICAM-1和IL-8的含量,减少蛋白渗出,降低肺W/D比值,减轻肺组织病理学损伤。卢帕他定可明显改善兔ALI,作用机制可能与抑制炎症因子合成与释放有关。

西红花苷对平滑肌细胞增殖的影响及机制研究

目的 :探讨西红花苷对平滑肌细胞增殖的影响及作用机制。方法 :在体外培养牛主动脉平滑肌细胞 ,观察西红花苷对由 2 0 %新生牛血清及氧化性低密度脂蛋白 (Ox LDL)所致的血管平滑肌细胞增殖的作用 ,在鹌鹑饮食性动脉粥样硬化模型上观察了西红花苷预防性给药连续 9周对血清低密度脂蛋白 (LDL)和血清过氧化脂质 (LPO)的影响。结果 :西红花苷可抑制由 2 0 %新生牛血清及氧化性低密度脂蛋白 (Ox LDL)所致的牛主动脉血管平滑肌细胞增殖 ,西红花苷能显著降低血清低密度脂蛋白 (LDL)及血清MDA的水平。结论