Taqman探针实时定量PCR检测猪伪狂犬病毒

选取猪伪狂犬病毒(PRV)基因组中gE基因,设计特异性引物和Taqm an探针,利用实时定量PCR来定量检测PRV。利用PCR技术扩增猪伪狂犬病毒gE基因80 bp片段,并克隆到pMD18-T载体上,阳性重组质粒命名为pgE80。pgE80质粒进行10倍系列稀释,作为荧光PCR检测的标准模板,定量拷贝数,并绘制标准曲线。以提取的PRV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(PRRSV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)的DNA作为模板,进行特异性检测。该实时定量PCR方法,标准曲线斜率为-0.37,R2=0.992,可以检测到20个拷贝数。PRV能被扩增出S型荧光曲线,而其它病毒均未能扩出。用PRV强毒肌肉注射仔猪,定量PCR比普通PCR更能灵敏而特异地检出呼吸道排毒和血液带毒。建立的实时定量PCR方法可用于临床样品快捷、准确、方便地检测。

探寻传统村落保护与公共媒介的互动——以《人民日报》相关报道为例

2012年国家住房和城乡建设部、文化部、财政部、国家文物局发出《关于开展传统村落调查的通知》,在全国范围内开展传统村落的调查,全面收集掌握我国传统村落的数量、分布、种类、价值等信息,同年12月国家公布了第一批国家传统村落名录,共646个。传统村落凝结着时代的记忆,承载了历史文化传承的功能,是民族文化的瑰宝,但随着中国城市化进程的加快,传统村落迅速消亡,在此种时代背景下,应运而生了传统村落保护与研究这样一个新兴的学科领域。这样一个新兴领域的出现,引起了新闻媒介的关注,通过新闻媒介的框架建构和传播,该话题逐渐变为了社会议题,进而被公众关注和重视,而社会的聚焦和介入又成为传统村落保护和研究的重要影响因素。