紫草素诱导淋巴系白血病细胞凋亡及其机制

目的观察紫草素体外对Jurkat T细胞和Raji B细胞白血病细胞增殖及凋亡的影响,探讨其可能分子机制。方法体外培养的Jurkat T细胞和Raji B细胞用(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0)μmol/L紫草素处理,MTT比色法检测紫草素对2株细胞的生长抑制率;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率;2',7'-二氯二氢荧光黄二乙酸酯(H2DCFDA)染色检测细胞中活性氧(ROS)的产生;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白的表达差异。结果紫草素对Jurkat T细胞和Raji B细胞均表现出较强的增殖抑制和凋亡诱导作用,且该效应呈一定的剂量依赖性和时间依赖性。紫草素可明显上调Jurkat T细胞和Raji B细胞Bax的表达,下调Bcl-2的表达,并能促进胞内ROS的产生。结论紫草素能通过诱导体外培养的Jurkat T细胞和Raji B细胞凋亡抑制其增殖,与降低Bcl-2/Bax比率及促进ROS的生成有关。

系统性红斑狼疮患者免疫细胞表面CD305表达及与发病的关系

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4^+CD45RO^+记忆T细胞的比例及其表面CD305的表达情况,探讨其在SLE发病中的意义。方法收集SLE患者20例为SLE病例组,另外选取年龄、性别相匹配的正常人10例为对照组。采集外周血,提取外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测外周血不同血细胞表面CD305的分布差异以及CD4^+CD45RO^+记忆T细胞在SLE患者的比例变化和其表面CD305的表达。应用单克隆抗体交联CD305进一步观察其对记忆T细胞活化功能的影响。结果 CD305在PBMC中均有表达,以单核细胞的表达最高,其次是B细胞、T细胞和树突状细胞。幼稚T细胞表面CD305的表达显著高于记忆T细胞。SLE患者外周血CD4^+ T细胞表面CD305表达下调,以记忆T细胞下调最为显著,但其阳性细胞比例数未见显著改变。交联CD305可以抑制CD3诱导的记忆T细胞活化。结论记忆T细胞表面CD305表达下调,介导记忆T细胞的异常活化参与SLE的发生发展。

系统性红斑狼疮患者调节性T细胞CD305表达降低且IL-10分泌减少

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性T细胞(Treg)的比例及其CD305的表达,分析CD305对Treg功能的影响。方法募集SLE患者25例及年龄、性别相匹配的正常人16例。提取外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测外周血Treg的数量以及其表面CD305的表达。应用5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)检测SLE患者Treg对初始T(Tn)细胞的增殖抑制功能。应用单克隆抗体交联CD305进一步观察其对Treg分泌白细胞介素10 (IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)的影响。结果与健康对照相比, SLE患者外周血Treg数量变化不明显,但增殖抑制功能显著降低。活动期SLE患者Treg表面CD305表达明显下调。交联CD305可以抑制Treg对Tn细胞的增殖抑制功能,减少IL-10的分泌,对TGF-β的分泌未见显著影响。结论 SLE患者Treg表面CD305下调抑制Treg功能,在SLE的发生发展中起一定作用。