紫色野生樱桃李提取物抗氧化和降血糖活性研究及化学成分鉴定

野生樱桃李富含多酚类化合物,具有“雪域珍果”之称,但其抗糖尿病活性和主要成分不明。该文以紫色野生樱桃李(purple Prunus cerasifera Ehrh.,PPE)为研究对象,采用体积分数70%乙醇提取和溶剂萃取法提取和富集多酚类化合物,通过自由基清除能力、酶抑制能力、促进人肝癌细胞(HepG2细胞)葡萄糖消耗及抗糖基化能力实验评价醇提物和萃取组分的抗氧化和降血糖活性,通过液质联用技术鉴定主要化学组成。结果表明,PPE的乙酸乙酯相(ethyl acetate fraction,EAF)具有最高的总酚(219.27 mg GAE/g E)和总黄酮含量(165.58 mg QuE/g E),以及最强的ABTS阳离子自由基清除能力、α-葡萄糖苷酶抑制能力、抗糖基化能力和HepG2胰岛素抵抗细胞模型细胞葡萄糖消耗能力,其中α-葡萄糖苷酶抑制能力为对照品阿卡波糖的31倍。PPE的正丁醇相具有最高的DPPH自由基清除能力和二肽基肽酶-4抑制活性。采用高效液相色谱飞行时间质谱联用(HPLC-quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry,HPLC-QTOF-MS/MS)技术从EAF组分中鉴定出43个化合物,包括12个有机酸、9个酚酸、16个黄酮类化合物和6个其他化合物。因此,乙酸乙酯和正丁醇是萃取富集野生樱桃李中活性成分的适宜溶剂,酚酸和黄酮类化合物是PPE中的主要抗氧化和降血糖成分,研究结果可为PPE在降血糖营养食品或膳食补充剂方面的应用提供理论指导。

樱桃李多糖提取工艺优化及单糖组成与抗氧化活性测定

为确定樱桃李多糖的最佳提取工艺,比较热水提取法、酶解法和超声辅助法对多糖提取率的影响,通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察不同提取方式所得樱桃李纯化多糖(Prunus cerasifera pure polysaccharides,PCPPs)的微观结构。在正交试验确定复合酶质量比的基础上,采用单因素结合正交试验优化复合酶法提取樱桃李粗多糖(Prunus cerasifera crude polysaccharides,PCCPs)的最佳工艺为纤维素酶添加量2.0%、果胶酶添加量2.5%、料液比1∶35(g/mL)、酶解时间2.0 h、酶解温度55℃。以种植的紫果、红果和野生的紫果、红果为原料,将最佳提取工艺下得到的PCCPs经纯化、水解、衍生化后,采用液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)分析单糖组成。结果表明,4种樱桃李多糖均由甘露糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖6种单糖组成,但含量存在显著差异(P<0.05)。体外抗氧化试验表明,4种多糖均具有一定的抗氧化能力,其中种植紫果的抗氧化活性最强,对DPPH自由基和ABTS+自由基清除的IC_(50)值分别为0.04 mg/mL和0.21 mg/mL。

响应面法优化准噶尔山楂总三萜提取工艺及其纯化工艺研究

为了提高准噶尔山楂的高值化利用,以准噶尔山楂为原料,通过单因素实验、正交试验和响应面设计优化复合酶辅助提取准噶尔山楂总三萜的工艺,并对纯化工艺进行优化。结果表明,准噶尔山楂总三萜的最优提取工艺为纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶的添加量分别为4%、4%和2%,料液比为1:24 g/mL,温度51℃,pH为4.5,酶解76 min,此条件下准噶尔山楂总三萜的提取量为(36.570±0.332)mg/g,通过超声再次提取,总三萜的提取量达到(53.782±0.673)mg/g。纯化工艺为:上样液浓度为6 mg/mL,流速:1 mL/min,上样量:15 mL,洗脱条件为50 mL,70%乙醇,纯化后的准噶尔山楂总三萜的纯度可达29.93%,回收率为81.25%。以上结果说明复合酶法对准噶尔山楂总三萜的提取和采用大孔树脂纯化具有可行性且稳定性高。