Sysmex XE-5000血液分析仪体液模式筛查肿瘤细胞价值的评价

目的：评价Sysmex XE-5000体液模式研究参数即高荧光强度有核细胞计数（HF-BF＃）筛查浆膜腔积液肿瘤细胞的临床应用价值。方法收集本院2009年6月至2010年7月疑似恶性浆膜腔积液患者，记录积液常规白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、HF-BF＃结果；运用受试者工作特征（ROC）曲线评价HF-BF＃鉴别积液性质的能力。结果共纳入疑似恶性积液患者89例，其中良性积液组（57例）与恶性积液组（32例）；恶性积液组HF-BF＃与RBC明显高于良性积液组（P＜0．05），2组间WBC数差异无统计学意义（P＝0．151）；ROC曲线分析显示，HF-BF＃曲线下面积（AUC）为0．671（95％可信区间0．563～0．767），当cut-off为24个/μL，敏感性（Sen％）为56．25％、特异性（Spe％）为77．19％、阳性似然比（＋LR）为2．47、阴性似然比（- LR）为0．57；相关分析显示， HF-BF＃与WBC、RBC呈正相关，分别为（r＝0．453，P＜0．0001，r＝0．346，P＜0．0001）。结论 Sysmex XE-5000体液模式研究参数HF-BF＃在筛查积液肿瘤细胞未显示出良好价值，因此，对仪器出现异常报警标本应人工复核。

XE-5000血细胞分析仪血小板计数性能评价

目的评价Sysmex XE-5000血细胞分析仪对血小板（PLT）的检测性能。方法对XE-5000分别用电阻抗法和荧光法对血小板计数进行精密度、线性测试及干扰试验进行评估,并与显微镜计数法作对比试验。运用SPSS12.0对数据进行分析。结果平均批内精密度为PLT-I 1.30%、PLT-O 1.40%;批间精密度为PLT-I1.87%、PLT-O2.39%;携带污染率范围为PLT-I 0.00%~1.32%、PLT-O0.00%~1.17%;平均为PLT-I 0.44%和PLT-O0.33%;在线性稀释试验中低、中、高值与理论值的相关系数（r）分别为,PLT-I 0.991、0.997、0.997,PLT-O0.997、0.998、0.992;在RBC碎片干扰试验中,PLT-O对低值样本显示出较强的抗干扰能力（t=1.14,P〉0.05）,PLT-I与PLT-O测定血小板结果与PLT-M结果相关性良好。结论 Sysmex XE-5000对血小板计数具有精密度好、抗干扰能力强、重复性好、检测速度快等优点,是常规实验室测定血小板的较理想仪器。

胱抑素C与随机尿微量清蛋白/尿肌酐比值对原发性高血压病早期肾损害的诊断价值

目的探讨血清胱抑素C(CysC)与尿微量清蛋白/尿肌酐(UmAlb/UCr)比值对诊断原发性高血压(EH)早期肾损害的临床价值。方法以83例EH患者为EH组、38例体检健康者对照组,同时测定血清CysC、UmAlb、UCr含量,计算UmAlb/UCr比值。结果 EH患者血清CysC含量、UmAlb/UCr比值高于对照组(P<0.05),EH患者各亚组间的比较差异也有统计学意义(P<0.05);血清CysC、UmAlb/UCr联合检测诊断EH患者肾损害的灵敏度为91.43%、特异度为97.67%、阳性预测值为94.12%、阴性预测值为96.55%。结论血清CysC及UmAlb/UCr联合检测可提高对EH患者早期肾损害的诊断灵敏度,具有临床实用价值。

自然流产患者封闭抗体检测及免疫治疗临床研究

目的检测自然流产患者体内封闭抗体(BA)水平,观察应用淋巴细胞疗法后的受孕率与成功分娩率,为临床治疗自然流产积累数据。方法用ELISA法检测486例复发性自然流产患者治疗前BA水平,选择 BA阴性者用分离的配偶淋巴细胞进行皮内注射免疫治疗,治疗结束后复查BA,并随访妊娠结局。结果 486例患者治疗前BA阳性率为12.1%(59/486),其中132例BA阴性者经淋巴细胞免疫治疗3次治疗后共转阳103例,治疗1、2、3、4次后的合计转阳率分别为7.5%、39.4%、74.2%和77.8%。经过免疫治疗后,BA转阳患者的受孕成功率和成功分娩率分别为100.0%和79.6%,4次治疗后BA维持阴性患者的受孕率和成功分娩率分别为75.8%、50.0%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论淋巴细胞免疫治疗能使BA显著转阳,且能提高患者的妊娠成功率、成功分娩率,分娩后的母婴之间并未见明显不适或其他副作用。

乳酸菌同源重组载体的构建与鉴定

目的:构建乳酸菌同源重组载体,实现外源基因在乳酸菌中的整合型表达。方法:根据乳酸菌L.lactisMG1363全基因组中ThyA基因序列设计引物,PCR扩增乳酸菌基因组中ThyA基因起始密码上游及终止密码下游约1000bp的基因序列,将获得的目的基因依次克隆至载体pMUTIN4中,以琼脂糖凝胶电泳检测目的条带,以双酶切技术、DNA测序予以确证。结果:琼脂糖凝胶电泳结果显示,目的基因成功扩增,双酶切及DNA测序结果证实,成功构建了同源重组载体pThyA-up-down。结论:乳酸菌同源重组载体pThyA-up-down为实现外源基因在乳酸菌中的非抗性、整合型表达奠定了基础。

乳酸菌同源重组载体的构建与鉴定

【目的】构建乳酸菌同源重组载体,实现外源基因在乳酸菌中的整合型表达。【方法】根据乳酸菌L.lactis MG1363全基因组中ThyA基因序列设计引物,PCR扩增乳酸菌基因组中ThyA基因起始密码上游及终止密码下游约1000bp的基因序列,将获得的目的基因依次克隆至载体pMUTIN4中,以琼脂糖凝胶电泳检测目的条带,以双酶切技术、DNA测序予以确证。【结果】琼脂糖凝胶电泳结果显示,目的基因成功扩增,双酶切及DNA测序结果证实,成功构建了同源重组载体pThyA-up-down。【结论】乳酸菌同源重组载体pThyA-up-down为实现外源基因在乳酸菌中的非抗性、整合型表达奠定了基础。

血浆降钙素原在尿路感染诊断中的应用

目的探讨血浆降钙素原（PCT）在上、下尿路感染中的诊断应用价值。方法用双抗夹心免疫发光法对35例健康体检者、60例确诊尿路感染患者测定血浆降钙素原，同时检测C-反应蛋白（CRP）和记录尿细菌培养结果，通过受试者工作特性曲线（ROC曲线）分析各诊断指标的曲线下面积（AUC），确定各指标最佳临界值（Cutoff）、敏感度（Sen％）、特异度（Spe％）。结果上尿路感染组血浆PCT、CRP浓度分别为（2．06±1．87）ug／L、（26．77±17．39）mg／L，下尿路感染组血浆PCT、CRP浓度分别为（0．30±0．23）ug／L、（14．7±9．87）mg／L，上尿路感染组血浆PCT、CRP明显高于下尿路感染组（P〈0．05）。ROC曲线显示，PCT、CRP的AUC分别为0．899，0．713，PCT以临界值为≥0．5ug／L时，其敏感度为86．7％，特异度为83．3％，CRP以临界值≥15．0mg／L时，其敏感性为70％，特异性73．3％。结论PCT诊断上尿路组的敏感度和特异度比CRP高，在鉴别上、下尿路感染中有一定的诊断应用价值。

C—反应蛋白在急性心肌梗塞诊断中的应用

目的：本文旨在评价C－反应蛋白（CRP）定量检测对急性心肌梗塞（AMI）患者早期诊断的价值。方法：用免疫比浊法对20名健康体健者，20列AMI患进进行血清CRP检测，同时测定肌酸激酶同工酶（CK－MB）、心肌肌钙蛋白T(cTnT），并对其中4例AMI患者（胸痛发作1h内入院）作动态观测。结果：20名健康体验者血清CRP、CK－MB、cTnT浓度分别为（3．148±0．65）mg/L、（12．8±2．5）U／L）、（0．2±0．1）μg/L，20例AMI患者血清浓度分别为（18．85±6．2）mg/L、（95±81．5）U／L、（2．8±2．0） μg/L，阳性率分别为98％、83．4％、85．1％、4例动态观察患者1h内入院时血清中CRP浓度开始升高（14．12±2．5）mg/L，所升高峰值时间比CK－MB、cTnT时间早（P＜0．01）。结论：CRP可作为急性心肌梗塞早期诊断的血清标志物。

4种幽门螺杆菌抗体检测试剂盒筛查幽门螺杆菌感染的性能研究

目的评价4种幽门螺杆菌抗体试剂盒筛查幽门螺杆菌感染的能力,为临床选择诊断方法提供依据。方法以14 C-尿素呼气试验作为参比对照方法,选取3种基于胶体金免疫层析原理、1种基于颗粒增强胶乳浊度测定法的幽门螺杆菌抗体试剂盒为评价试剂盒,对114例研究对象进行检测,用χ2检验进行统计学处理。结果与参比方法对比,4种评价试剂盒间对幽门螺杆菌感染诊断的灵敏度为8%～60%,特异度为64%～81%,一致性为46%～68%,差异有统计学意义(P<0.05);4种评价试剂盒相互之间的一致性为61%～72%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 4种幽门螺杆菌抗体检测试剂盒对幽门螺杆菌感染的筛查有一定作用,多种方法联合检测更佳。

130例血培养病原菌分布及药敏分析

目的了解2009年1月～2010年10月期间本院住院病人血液细菌培养分离菌株的构成及其药敏情况,提示分离菌株的耐药变迁,为临床用药提供依据。方法采用BD BACTECTM91 20/9240全自动血培养仪对1430份血培养进行检测,采用Bio Merieux-ATB系统鉴定细菌,K-B纸片扩散法进行药物敏感试验,应用WHONET5.4软件分析血培养标本中所分离病原菌分布及药敏结果。结果 1430份血标本中,培养阳性130份,检出率为9.1%,其中革兰阳性球菌占38.5%,以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌为主;革兰阴性杆菌占57.7%,以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主;真菌占3.8%,以白色念珠菌为主。药敏结果显示:64.3%的大肠埃希菌为产ESBLs株,66.7%的凝固酶阴性葡萄球菌为MRCNS,47.1%的金黄色葡萄球菌为MRSA。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南100%敏感;葡萄球菌属对万古霉素、替考拉宁100%敏感,其它抗生素均有不同程度的耐药。结论血培养阳性以革兰阴性菌为主,病原菌分布较广、耐药性较强,临床上应重视血液感染菌株的分布特点,并根据药敏结果合理用药,有效地控制感染,减少耐药菌株的产生。

南海区婴幼儿腹泻病轮状病毒感染临床流行状况调查

目的探讨南海区婴幼儿腹泻轮状病毒感染流行状况,为防治提供依据。方法回顾性分析2002～2004年门诊、住院腹泻患儿采用酶联免疫法(ELISA)检测粪便轮状病毒的资料结果。结果3年中803例腹泻患儿检出轮状病毒457例,阳性率56.9%,其中2002年113例,阳性率63.5%(113/178),2003年240例,阳性率63.2%(240/380),2004年104例,阳性率42.4%(104/245),发病季节以每年10、11、12月及来年1月为主。结论南海区婴幼儿腹泻病病原以轮状病毒感染为主,一年四季都有发生,但流行期在10月、11月、12月及来年1月的秋冬季节,发病高峰期在11、12两个月。

不同FDPs及D-D试剂盒检测结果一致性及FDPs/D-D的临床价值分析

目的分别比较6种D-二聚体(D-D)试剂盒和4种纤维蛋白(原)降解产物(FDPs)试剂盒之间的一致性,并探索FDPs/D-D的临床价值。方法根据D-D水平将400份血液标本分为D-D>500ng/mL组和D-D<500ng/mL组,各200份。检测所有标本中D-D和FDPs水平;分析不同FDPs及D-D试剂盒检测结果一致性;比较不同试剂盒检测FDPs/D-D的差异,并分析FDPs/D-D在不同临床科室标本中的分布。结果 6种D-D试剂盒的检测结果呈正相关,以上海太阳生物科技公司和日本积水生物公司D-D试剂盒的检测结果相关性最高,重庆博士泰与法国思达高、法国梅里埃VIDAS D-D试剂盒的检测结果相关系数在0.7以上;6种DD试剂盒检测结果与临床检测结果不一致的标本有21份,排除类风湿因子、抗动物抗体、嗜异性抗体和钩状效应的干扰。4种FDPs试剂盒检测结果呈正相关,但是与D-D试剂盒检测结果相比,数据较为分散,回归方程的斜率和截距偏大。4种试剂盒检测FDPs/D-D的结果差异有统计学意义(P<0.05);除了中国南京普瑞柏生物科技有限公司试剂盒检测FDPs/D-D的结果在不同科室标本间差异有统计学意义(P<0.05),其他试剂盒检测FDPs/D-D的结果在不同临床科室标本间差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同FDPs及D-D试剂盒检测结果一致性较好,尚未发现FDPs/D-D的临床价值。

南海区婴幼儿腹泻病轮状病毒感染临床流行状况调查

目的探讨南海区婴幼儿腹泻轮状病毒感染流行状况,为防治提供依据。方法回顾性分析2002～2004年门诊、住院腹泻患儿采用酶联免疫法(ELISA)检测粪便轮状病毒的资料结果。结果三年中803例腹泻患儿检出轮状病毒457例,阳性率先56.9%,其中2002年113例,阳性率63.5%(113/178),2003年240例,阳性率63.2%(240/380),2004年104例,阳性率42.5%(104/245),发病季节以每年10、11、12月及来年1月为主。结论南海区婴幼儿腹泻病病原以轮状病毒感染为主,一年四季都有发生,但流行期在10月、11月、12月及来年1月的秋冬季节,发病高峰期在11、12两个月。

耐甲氧西林葡萄球菌及产超广谱β-内酰胺酶细菌流行状况及耐药性分析

目的调查耐甲氧西林葡萄球菌及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的流行状况及耐药性,为临床提供诊疗依据。方法对2011年3月-2012年5月所有病原菌进行鉴定及药敏试验,按CLSI 2010年推荐方法对葡萄球菌属进行耐甲氧西林检测,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测。结果检出金黄色葡萄球菌342株、凝固酶阴性葡萄球菌254株,耐甲氧西林检出率分别为38.3%、69.7%,耐甲氧西林菌株对利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素100.0%敏感,对喹奴普汀/达福普汀、莫西沙星、呋喃妥因的耐药率<20.0%,对其他药物耐药性高;916株大肠埃希菌和514株肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为59.0%、34.8%,产ESBLs菌株对碳青霉烯类、阿米卡星及部分β-内酰胺酶抑制剂复合剂类敏感性较高,对其他药物耐药性高;外科、内科、ICU是各种耐药菌株流行的重要病区。结论耐甲氧西林葡萄球菌、产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发生率高,耐药严重,及时监测耐药菌株的流行状况及耐药性指导临床诊疗行为,有效预防控制医院感染。

服用华法令抗凝患者血栓弹力图参数与常规凝血标志物关系研究

华法令是香豆素类药物,广泛应用于心脏瓣膜病、房颤、静脉血栓的治疗,在美国,FDA2004年的华法令处方有3100万[1]。抗凝治疗是一把双刃剑,抗凝不足容易导致血栓性事件的发生,而抗凝过量则易于导致出血,甚至危及生命,所以在二者之间取得良好的平衡是临床治疗关键所在。华法令主要抑制维生素K依赖的凝血因子2、7、9、10的羧化,使之不能转变为具有生物活性的凝血因子而发挥抗凝效用,这些因子对临床凝血项目凝血酶原时间(prothrombin time,PT)的影响显著,故而服用华法令的患者常常检测PT以及由此计算而来的国际标准化比值(international normalized ratio,INR)来评估治疗是否适当。INR的出现校正了市场上不同检测试剂间的不一致,美国胸科医师学会指南[2]版明确了不同疾病不同的INR治疗目标。

基于双Taqman探针实时荧光PCR技术的HLA-B*5801基因检测方法建立与应用

目的建立一种基于Taqman探针实时荧光PCR技术的HLA-B*5801基因检测方法;调查佛山地区HLA-B*5801基因阳性携带率。方法根据HLA-B*5801等位基因外显子2和3的基因序列设计引物和Taqman探针,建立一种实时荧光PCR检测方法,与商业试剂盒和Sanger测序进行对比检测性能评价。选取健康体检男女样本各200例,采用本方法检测并调查分析本地区汉族人群HLA-B*5801基因携带率。结果本研究建立的HLA-B*5801实时荧光PCR检测方法与2种商业试剂盒和Sanger测序的检测结果相符性为100%;佛山地区汉族人群男女HLA-B*5801基因携带率分别为8.5%和11.5%,差异无统计学意义(P=0.48)。结论本研究建立的双Taqman探针HLA-B*5801基因检测方法操作简单、结果准确,可应用于常规检测。