某院鲍曼不动杆菌感染的分布及耐药性分析

目的：分析上海中医药大学附属曙光医院2008～2013年临床住院患者标本分离的鲍曼不动杆菌分布特点及其耐药情况，为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采用全自动微生物分析仪 BD phoenix-100对该院2008年9月至2013年9月临床分离的鲍曼不动杆菌进行菌种鉴定和最低抑菌浓度（MIC）测定，对所有数据进行分析。结果自2008年9月至2013年9月，历年分离的鲍曼不动杆菌依次为128、173、350、282、186株，以2012整年抽样查得临床分离的鲍曼不动杆菌菌株主要来源于痰标本（155株，68．28％）；病房主要集中于重症监护病房（65株，28．63％），其次是呼吸科（47株，20．70％）、急诊留观（35株，15．42％）、中风老年科病房（24株，10．57％），患者也多见于60岁以上老年人。根据5年内数据，多种不同抗菌药物的耐药率普遍增高，特别是2011～2012年间上升趋势更明显，青霉素类抗菌药物呈全耐药性。对第3、4代头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物也表现普遍耐药。头孢菌素类（头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟）抗菌药物耐药率保持在75．00％～85．00％较高水平，喹诺酮类（环丙沙星、左氧氟沙星）与氨基糖苷类（庆大霉素、阿米卡星）抗菌药物耐药率也呈逐年递增态势；对β-内酰胺类复方制剂耐药率增长速度较快，如氨苄西林/舒巴坦从60．16％增长至83．33％。其中碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南、美洛培南耐药率增长幅度也非常明显，亚胺培南从25．20％上升最高到82．27％，并且检出率不断增加。舒普森由18．89％上升至80．00％，而唯一不同的是克里斯丁（多黏菌素 E）5年来一直保持低耐药率。结论鲍曼不动杆菌对各种抗菌药物的耐药性逐渐增强，多重耐药和泛耐药鲍曼不动杆菌分离率逐年增高，应警惕并高度重视该菌感染及耐药监测，以减少耐药菌株的产生和播散。

146例金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药分析

目的了解金黄色葡萄球菌(SA)对红霉素和克林霉素的耐药性,检测红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率及诱导耐药基因。方法采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的纸片扩散法,用头孢西丁纸片检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)并以红霉素、克林霉素双纸片法(D试验)分析红霉素对克林霉素诱导耐药表型,用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因。结果 146株SA中MRSA占57.5%。SA对红霉素及克林霉素同时耐药的有82株,占56.2%,红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的有34株,其中D试验阳性26株,红霉素诱导克林霉素耐药率76.5%。红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)中D试验阳性分别为80.0%和71.4%。克林霉素耐药菌株主要由erm基因决定,结构型耐药菌株主要耐药基因为ermA,诱导型耐药菌株的主要耐药基因为ermC。结论临床微生物实验室应加强对SA中克林霉素诱导耐药的检测,以指导临床医师合理选用大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物。

血清NGAL、Cys C和尿NAG联合检测在糖尿病肾病诊断中的临床意义

目的探讨血清中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）检测在糖尿病肾病（DN）诊断中的临床意义。方法选取2型糖球病患者（T2DM）76例，根据其尿液白蛋白排泄率（UAER）分成3组：正常白蛋白尿组（26例，UAER〈30mg／24h）、微量白蛋白尿组（25例，UAER为30～300mg／24h）、临床蛋白尿组（25例，UAER〉300mg／24h）；选择同期正常体检者40名作为正常对照组。检测所有对象的血清NGAL、CysC和尿NAG，分析检测结果与肾小球滤过率（GFR）的关系，采用受试者工作特征（ROC）曲线下面积评价3个指标对DN的诊断效率。结果微量白蛋白尿组和临床蛋白尿组血清NGAL、CysC和尿NAG水平均高于正常对照组（P〈0．05）；T2DM患者血清NGAL、CysC和尿NAG水平与GFR呈负相关[相关系数（r）分别为-0．85523、-0．76014、-0．70117，P均〈0．05]；3项指标中血清NGAL的ROC曲线下面积（0．862）最高，诊断效率最好。结论血清NGAL与GFR关系最为密切，可用于DN的早期诊断和监测。

医院感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型研究

目的分析医院不同科室来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株基因分型同源性,为控制MRSA医院感染流行提供科学依据。方法使用细菌基因组重复序列聚合酶链反应(REP-PCR)以及高级微生物基因分型系统(DiversiLab)细菌同源性分析技术对23株医院感染的MRSA进行基因分型。结果 23株MRSA分为4个基因型,A型、D型主要分布于急诊观察室,B型、C型主要分布于中医外科。结论中医外科存在以B型、C型基因型为流行株的MRSA医院感染爆发;REP-PCR技术和DiversiLab自动化细菌同源性分型技术可成为医院感染病原研究的有效手段。

青葙苷A抑制缺氧乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭能力的研究

目的探索中药青葙子中的齐墩果烷型三萜化合物青葙苷A(celosin A,CA)对缺氧人乳腺癌MDAMB-231细胞的抗肿瘤作用及其相关机制。方法CoCl2造模MDA-MB-231细胞缺氧状态,建立细胞体外缺氧的CA给药培养体系。采用细胞计数试剂盒(MTT)检测细胞活力,免疫荧光法观察细胞形态学和核凋亡变化。流式细胞术(FCM)法检测细胞凋亡比例;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell法检测CA对肿瘤细胞迁移和侵袭的抑制能力;Western blot实验检测缺氧相关蛋白表达水平和EMT标志蛋白表达水平。结果在缺氧状态下,高剂量的CA(20、40μmol/L)能抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,诱导肿瘤细胞核凋亡的形态学改变,并且能有效促进早晚期细胞的凋亡率(PI-Annexin V-FITC促凋亡率:20μmol/L:+6.09%;40μmol/L:+18.50%),有效抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、单核细胞趋化蛋白(MCP)、血管内皮生长因子(VEGF)表达;同时低剂量的CA(5、10μmol/L)能抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的Vimentin和N-cadherin因子的表达,并减少乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭细胞的数量(转移抑制率:5μmol/L,26.90%;10μmol/L,66.13%;侵袭抑制率:5μmol/L,23.71%;10μmol/L,75.00%)。结论CA能对缺氧乳腺癌MDA-MB-231细胞起到有效地诱导凋亡、抗肿瘤血管形成以及抑制侵袭与转移的作用。

两类常见病原菌异质性耐药现状调查及临床常规检测的必要性研究

目的研究两种常见病原菌的异质性耐药现状及其临床常规检测的必要性。方法2020年9月至2021年10月期间,在上海2家医院收集了360株大肠杆菌和120株金黄色葡萄球菌。通过K-B和PAP法对关键药物进行菌群异质性耐药分析。短周期和长周期培养分别定义为24~48 h和2~14 d。采用kappa统计法比较抗菌药物异质性耐药结果的一致性。结果金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的异质耐药率比较存差异有统计学意义(P<0.05);不同月份、不同医院的异质耐药发生率比较差异有统计学意义(P<0.05)。大肠杆菌菌株中CAZ和FEP的异质性耐药结果一致性较好,而CAZ和IPM以及FEP和IPM的一致性较差。结论通过延长培养时间,可以进一步检测到更多的异质性耐药细菌;在同类抗菌药物中,异质性耐药菌的检测结果可能存在一定的相关性;不同地区的临床微生物实验室应建立科学的细菌耐药性监测体系,至于哪种细菌需要作为常规检测取决于当地各类菌群异质耐药谱系的调查。

沙眼衣原体室间质量控制质控品的制备及其应用

目的制备可模拟真实临床样本的沙眼衣原体室间质量评价(EQA)质控品,以客观评价上海地区临床实验室沙眼衣原体检测能力。方法选用HELA-299细胞株培养沙眼衣原体血清型E,制备成沙眼衣原体EQA质控品,通过均匀性和稳定性验证后,用于上海市临床检验中心EQA计划。结果制备的沙眼衣原体EQA质控品均匀性和稳定性均通过验证。对上海市54家临床实验室进行EQA,有51家回报结果,所有回报结果的实验室EQA成绩均为100分。结论成功制备了可模拟临床样本的沙眼衣原体EQA质控品。上海地区临床实验室沙眼衣原体检测质量良好。

VISA/VRSA相关耐药进化史及耐药进化代价

金黄色葡萄球菌是最常见的临床病原菌之一,对医疗卫生机构构成重大威胁。1980年以来,万古霉素作为治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引起的严重感染的一线药物,成为治疗重症金黄色葡萄球菌感染的有效保障。然而,随着越来越多的万古霉素敏感减弱菌株在全球范围报道,研究人员和医生们开始担心万古霉素中度耐药性金黄色葡萄球菌(VISA)/耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA)是否也会暴发。该综述简单回顾了金黄色葡萄球菌耐药性的历史,并归纳了相关VISA/VRSA进化模式和相应的进化改变,提出如何更好地优化临床治疗策略。

肠道微生态平衡监测对妊娠高血压疾病的诊断价值

妊娠高血压疾病是孕产妇和婴儿病死率增高的主要原因。然而临床上对于该类疾病的病因和发病机制并不十分清楚,除了评估孕妇血压水平、蛋白尿、器官受累程度及胎儿情况之外,缺乏有效的实验室预防、监测及诊疗手段。而肠道菌群作为人体最大的微生态系统,相关研究成果已在各类疾病中显现出巨大的临床潜在价值。相比之下,肠道菌群与妊娠高血压疾病的研究相对滞后。由于孕妇体质、代谢等状况的特殊性,疾病与肠道菌群变换叠加的病理过程更为复杂。目前,相关研究虽有报道,但在两者相互关系、致病机制等方面分析并不完整、全面。本文对肠道微生态与妊娠高血压疾病的多项研究结果进行综述,并分析了妊娠高血压疾病的研究现状以及相关实验室监测指标的应用价值,探讨了肠道菌群作为妊娠高血压疾病新型标志物的可行性,为临床上对妊娠高血压疾病的诊断提供了新思路。

同源肿瘤克隆细胞蛋白表达和侵袭能力的异质性研究

目的:比较同源肿瘤细胞来源的不同单克隆表型差异。方法:采用极限稀释法,在悬浮培养条件下获取HCT116结肠癌细胞系的单个细胞,对每孔含单个的细胞进行扩增培养,获得子代单克隆,并以同样方法继续挑取单克隆,连续获得子三代克隆。根据单克隆形态特点,选取第三代的三株代表性的单克隆,采用Western blot和免疫荧光法比较其SOX2、EpCAM和Vimentin蛋白表达差异。采用放疗观察三株单克隆的Vimentin蛋白的动态变化,研究其放疗干预的时间异质性,Transwell体外侵袭实验比较克隆侵袭力的差异。结果:三株由单细胞扩增培养的同源第三代子克隆依然存在明显生物学差异。形态有明显区别的球形与不规则的克隆形态。不规则形态克隆更表现为SOX2低表达及Vimentin的高表达。并且在单个细胞水平上,同个单克隆群体内也存在个体细胞间蛋白的表达差异(Vimentin;EpCAM)。通过观察放疗前后Vimentin蛋白在不同时间点上的荧光强度,发现肿瘤单克隆细胞存在时间异质性。Transwell体外侵袭实验也显示三个同源克隆间存在明显的差异性。结论:同源的、连续单细胞扩增获得的第三代单克隆依然存在明显生物学差异,提示肿瘤内部异质性是其固有特征,并且在治疗干预下,也会引起肿瘤时间异质性的产生。

间歇式微波处理提取银杏愈伤组织黄酮的研究

以银杏愈伤组织为原料,通过单因素试验和响应面试验优化了间歇式微波处理提取黄酮的工艺条件。试验结果表明,响应面试验的最佳提取条件是乙醇体积分数48.09%,液料比值35 m L/g,微波时间84.44 s;验证性试验中此条件下的黄酮得率为17.207 mg/g,与预测值17.114 mg/g非常接近。