羟基磷灰石纳米粒子诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的研究

目的观察不同浓度的羟基磷灰石纳米粒子对肝癌SMMC-7721细胞作用的影响。方法将羟基磷灰石纳米粒子以不同浓度和时间作用于肝癌SMMC-7721细胞,采用MTT比色法观察细胞毒性;应用电镜技术及HE染色法观察凋亡细胞的形态;原位末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡率。结果羟基磷灰石纳米粒子以剂量依赖和时间依赖的方式抑制SMMC-7721细胞的生长,作用48h后的半数有效抑制浓度IC50值为179.8μg/ml。HE染色和透射电镜观察到凋亡特性的形态学改变。结论HAP抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导细胞凋亡,HAP也许会成为临床治疗肝癌的有效抗肿瘤药物。

巨细胞病毒感染对染色体畸变率的影响

用ＣＭＶ包涵体法确定个体ＣＭＶ感染，分别在人类生命期的三个不同阶段设ＣＭＶ感染阳性和阴性比较组。胚胎期以胚胎绒毛组织滋养层细胞染色体为观察指标，新生儿期和成年人期以外周血淋巴细胞染色体为观察指标，发现胚胎绒毛组织染色体ＣＡ率在ＣＭＶ感染阳性组显著高于阴性组（Ｐ＜０．０１）。而在新生儿期和成年人期的外周血染色体ＣＡ率检测中，ＣＭＶ阳性组和阴性组比较未发现显著差异。

Hp,Gc,ABO三个非连锁基因系统间双位点遗传平衡检验

检测了1033例佳木斯地区汉族人群中Hp、Gc、ABO3个基因系统的表型分布情况．当分别对这3个系统进行单位点遗传平衡检验时，均处于平衡状态．当在这3个基因系统间进行双位点遗传平衡检验时，则发现Hp－Gc双位点表型组合显著偏离Hardy－Weinberg期望值（P＜0．025）．本文又从配子不平衡角度，检测了Hp－Gc双位点间的相关性，结果X2r＝4．389，P＜0．05，表明Hp－Gc两个位点之间具有显著的相关性。

基础医学教育中的双语教学实践

本文阐述了对双语教学的理念、模式、可行性的认识,总结了佳木斯大学基础医学教育中开展双语教学工作的失败教训和成功经验,提出了将留学生教育与双语教学工作相结合的新见解。

一个Rett综合征家系MECP2基因突变分析及X染色体失活研究

目的:研究R ett综合征(RTT)患者的M ECP 2基因突变,探讨X染色体失活在RTT致病机制中的作用。寻找临床基因诊断R ett综合征的实验方法。方法:首先采集R ett综合征先证者及家系成员的外周血提取基因组DNA,聚合酶链式反应扩增RTT致病基因M ECP 2的3个外显子和3′UTR(3′端非翻译区),琼脂糖凝胶电泳和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离目的片段,PCR产物经纯化后直接测序。应用甲基化PCR(m ethy lation spec ific PCR,M SP)进行X染色体失活分析。结果:发现患儿M ECP 2基因的Exon3发生1个点突变C 473T(T 158M),该突变为新生突变。患儿与患儿母亲表现为非随机X染色体失活。结论:X染色体非随机失活在RTT的致病机制中发挥某种作用,C 473T(T 158M)点突变可作为典型R ett患者基因诊断的位点之一。

巨细胞病毒感染对染色体畸变率的影响

用 CMV 包涵体法确定个体 CMV 感染,分别在人类生命期的三个不同阶段设CMV 感染阳性和阴性比较组,胚胎期以胚胎绒毛组织滋养层细胞染色体为观察指标;新生儿期和成年人期以外周血淋巴细胞染色体为观察指标,发现胚胎绒毛组织染色体 CA 率在CMV 感染阳性组显著高于阴性组(P<0.01),而在新生儿期和成年人期的外周血染色体 CA率检测中,CMV 阳性组和阴性组比较未发现显著差异。

中国人汉族、朝鲜族和维吾尔族群体中Hp亚型的分布

采用改进的Claudio电泳分型法,调查了102例中国汉族,101例朝鲜族和67例维吾尔族人群中血清结合珠蛋白(Hp)亚型的分布状况。检查结果表明,在所调查的汉族和朝鲜族人群中只发现了Hp ls-ls,Hp 2-ls,Hp 2-2三种亚型,未见Hp α lF组分。而在维吾尔族人群中则发现了Hp αlF组分。本文认为,基因Hp α~1F在人类学研究中是一个重要的遗传标记。

父亲重度吸烟对胚胎绒毛细胞染色体畸变率的影响

对10例父母无吸烟习惯,10例父亲重度吸烟的胚胎绒毛细胞染色体畸变率进行研究,结果表明,父亲重度吸烟组染色体数目畸变率和结构畸变率同非吸烟组相比显著提高。

迷迭香精油诱导肝癌HepG2细胞凋亡后bcl-2和bax基因表达变化的研究

目的:探讨凋亡相关基因bcl-2和bax在迷迭香精油诱导肝癌HepG2细胞凋亡后表达的变化。方法:水蒸气蒸馏法提取迷迭备精油,GC-MS鉴定其成分。采用免疫组化法检测bcl-2蛋白和bax蛋白表达。结果:不同浓度的迷迭香精油处理细胞12、24、48 h后bcl-2蛋白的表达降低,bax蛋白的表达升高,与对照组比较均有显著性差异,并且均现时间和剂量依赖性。结论:迷迭香精油诱导肝癌HepG2细胞凋亡与凋亡调控基因bax表达增强,bcl-2表达减少有关。

五味子乙素联合顺铂诱导H22肝癌移植瘤细胞凋亡过程中caspase-3,8,9表达的研究

目的观察五味子乙素(schisandrin B,SchB)联合顺铂诱导H22荷瘤小鼠细胞凋亡过程中caspase-3,8,9蛋白表达变化。方法SchB和顺铂单独或联合作用于H22荷瘤小鼠,计算各组抑瘤率,用免疫组化法检测瘤组织中caspase-3,8,9蛋白表达。结果顺铂组、SchB组及联合治疗组抑瘤率分别为42.00%、36.40%和68.80%;联合组caspase-3,8,9阳性表达明显高于对照组和单纯用药组。结论联合组对H22荷瘤鼠实体瘤生长抑制作用较单独用药明显增强;联合组可能通过促进caspase-8和caspase-9表达,进而促进caspase-3表达诱导H22肿瘤细胞凋亡。

灵芝多糖对戊四氮活化海马神经细胞NF-κB变化的影响

目的:本文以新生大鼠的海马神经细胞为研究对象,通过体外培养新生大鼠海马神经细胞,观察神经细胞生长状况,制备细胞癫痫模型,检测灵芝多糖对癫痫大鼠海马神经细胞的NF-κB变化的影响,进一步探讨癫痫的发病机制及灵芝多糖的作用。方法:将体外培养海马神经细胞随机分为模型组、灵芝多糖处理组、对照组,用免疫荧光化学分析方法检测NF-κB表达的变化。结果:体外培养新生大鼠的海马神经细胞成功,在培养的第7 d,制备细胞癫痫模型,通过免疫细胞荧光化学反应证明戊四氮(PTZ)的作用使NF-κB核表达较灵芝多糖处理组和对照组明显增多,提示海马神经细胞被活化,灵芝多糖处理组较模型组NF-κB核表达少。结论:应用无血清培养基及联合阿糖胞苷培养方法,神经细胞生长良好,获得神经细胞的纯度达90%以上,为神经细胞相关的实验研究提供了良好的模型。灵芝多糖可能通过减少神经细胞内钙离子内流,从而间接抑制PTZ诱导的NF-κB活化,降低神经细胞的兴奋性,达到抗癫痫作用。

血管紧张素原基因多态位点AGT174与原发性高血压相关性的研究

本文采用ＰＣＲ、限制性酶切和电泳分型等方法，分别对９０例原发性高血压患者和１０９例正常人血管紧张素原基因多态位点ＡＧＴ１７４进行了检测，结果表明，高血压组中三种基因型的分布与对照组显著不同，提示该位点变异与原发性高血压的发生相关。

肝型脂肪酸结合蛋白与脂类转运

肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)是脂肪酸结合蛋白(FABPs)家族成员之一,与其他成员结构和功能方面有相同之处又有区别.L-FABP主要表达于肝脏组织和小肠,介导脂肪酸及多种疏水基团转运,涉及多种疾病的发病机制.多年来其转运机制备受关注,研究方法从体外到体内,从细胞分子水平到基因沉默动物水平.虽然L-FABP的转运机制研究越来越深入,但是仍需要进一步加强基础研究,揭示其调控脂类转运的机制.本文主要对L-FABP的特性、结构及体内研究现状作一综述.

迷迭香精油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的实验研究

【目的】研究迷迭香精油对体外培养Hela细胞生长的抑制作用。【方法】采用水蒸气蒸馏法提取迷迭香精油,气相色谱-质谱联用仪分析成份。以不同浓度的迷迭香精油作用于体外培养的Hela细胞,MTT法测定迷迭香精油抗肿瘤活性,透射电镜观察药物对细胞形态学的影响。流式细胞仪检测细胞凋亡率。【结果】MTT法证明迷迭香精油可显著抑制Hela细胞生长,抑制率与药物浓度正相关,呈现明显的量-效和时-效关系,细胞经药物作用48h后的IC50为0.0736mg/L,电镜下可观察到核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征。流式细胞仪可以检测到细胞凋亡。【结论】迷迭香精油可抑制Hela细胞的生长,诱导Hela细胞凋亡。

灰树花多糖对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

目的探讨灰树花多糖(PGF)对HeLa细胞的抑制作用和可能机制。方法采用MTT法研究灰树花多糖对HeLa细胞增殖的体外抑制作用,RT-PCR分析survivin和caspase-3 mRNA的表达。结果灰树花多糖以剂量依赖的方式抑制HeLa细胞的生长,RT-PCR表明caspase-3基因表达增强、survivin基因表达减弱。结论灰树花多糖诱导HeLa细胞凋亡的分子机制可能与上调caspase-3基因表达、下调survivin基因表达有关。

ACE基因I/D多态性与佳木斯地区汉族人群中老年原发性高血压的关系

目的探讨佳木斯地区汉族中老年人群血管紧张素转换酶(ACE)基因的插入/缺失(I/D)多态性与原发性高血压(EH)的关系。方法应用聚合酶链反应(PCR)、电泳分型等方法,检测佳木斯地区102例汉族人原发性高血压患者和107例正常对照组的ACE基因I/D多态性。结果正常对照组及原发性高血压患者的ACE基因I/D多态性Ⅱ、ID、DD基因型频率分别为0.3925、0.4299、0.1776和0.4313、0.4118、0.1569,I、D等位基因分布频率分别为0.6074、0.3926和0.6372、0.3628,两组间无显著差异。结论ACE基因I/D多态性可能与佳木斯地区汉族人原发性高血压病无关。

医学留学生教学管理的实践研究

伴随着高等教育国际化,我国医学留学生数量与日俱增。本文从办学指导思想、授课方式、师资、教材等多方面探讨教学管理模式。通过实践中逐步摸索,探索出了一条适合综合性大学的医学留学生办学之路。

荧光定量PCR技术原理及在分子诊断中的应用进展

聚合酶链式反应(polym erase chain reaction,PCR)可对特定基因进行扩增,因此被广泛应用于获取特定基因或基因片段及临床基因诊断等领域。聚合酶链式反应(PCR)技术发明至今已近20年了,近年来出现的荧光定量PCR(F lurogen ic Quantitative Polym erase Chain Reaction,FQ-PCR)实现了PCR从定性到定量的飞跃,它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具。