JSRV衣壳蛋白单克隆抗体的制备及免疫学鉴定

经纯化的JSRV-CA融合蛋白乳化后免疫Balb/c小鼠,四免后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合.最终获得了三株稳定分泌单克隆抗体的细胞系.同时,分段克隆绵羊肺腺瘤病毒ca基因并构建原核表达质粒,在E.coliBL21中诱导表达.以获得的三株抗JSRV-CA蛋白的单克隆细胞分泌的McAb为一抗,应用Western blot对分段表达的CA蛋白进行肽探针扫描,初步鉴定了三株单抗识别的线性表位,并应用非竞争性ELISA法测定了三株单抗的功能性亲和常数.为建立特异性的病原诊断方法、分析CA蛋白的功能及疫苗设计奠定了基础.

PRRSV NC株ORF3基因的克隆、序列分析及表达

为原核表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF3基因,本研究根据GenBank登录PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF3基因序列,利用Primer 6.0软件设计合成一对特异性引物,经RT-PCR扩增得到了大小为765bp的片段。将扩增的ORF3基因截短为495bp和750bp片段分别克隆于原核表达载体pGEX-KG中,在IPTG的诱导下进行Gp3重组蛋白的截短表达,经western blot检测证实表达的2种截短重组蛋白均具有良好的与抗体的反应活性,从而为进一步研制新型疫苗提供了实验依据。

羊Ⅱ型肺泡上皮细胞的分离培养及鉴定

为改进羊肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离和培养技术,本研究采用IgG黏附法结合磁化树脂微粒法分离纯化了山羊肺泡Ⅱ型上皮细胞,碱性磷酸酶染色检查表明Ⅱ型细胞占90%以上,台盼蓝染色活细胞为95%以上。羊肺泡Ⅱ型上皮细胞分离纯化方法的建立,为今后体外分离培养绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的探索性工作奠定了基础,也为研究肺纤维化及肺癌发病机理等重大课题提供了重要的技术支持。

一例犬肾上腺皮质机能亢进的诊断与治疗

犬肾上腺皮质机能亢进多发于中老年犬。通过病史询问、临床检查、低剂量地塞米松抑制试验、ACTH刺激试验以及实验室检查、影像学检查进行了诊断,并应用药物治疗,收到良好疗效。本文探讨了犬肾上腺皮质机能亢进的诊疗方案,为该病的临床治疗提供了借鉴。

一起奶牛流行热的诊断和防治

本文就一起牛流行热的诊断和治疗作了报道,分别从流行病学特征、临床症状、病理变化、动物接种、实验室诊断、鉴别诊断及临床治疗与防控等方面做出了详尽阐述。为该病的诊断和防控提供了有益的参考。

猪弓浆虫病的诊治与虫体分离

江西某农场的猪场种猪和肥猪几乎同时暴发以高热为特征的疫病 ,病理变化主要为淋巴结出血、肿大 ,脾脏、肝脏肿大 ,肺炎 ,心脏出血。肺门淋巴结触片见多量弓浆虫滋养体 ,病猪血清的弓浆虫抗原、抗体均为阳性。接种病料的小鼠于接种后 2 5天死亡 ,分离出一株弓浆虫。因此诊断该猪场种猪和肥猪暴发的疫病为弓浆虫病 ,并推测本次弓浆虫病的病原来自饲料中的鱼粉。

钼镉联合胁迫对山羊肾脏细胞凋亡相关基因表达的影响

本研究以波尔山羊为实验动物,旨在观察钼镉联合胁迫对山羊肾脏细胞凋亡相关基因表达的影响。选用63头健康波尔山羊随机分成7组,每组3个重复,选用七钼酸铵([(NH4)6Mo7O24·4H2O])作为实验钼源,氯化镉(Cd Cl2)作为实验镉源,按每kg山羊体质量添加钼、镉对照组(Mo 0 mg/kg+Cd 0 mg/kg),低镉低钼组(Mo 15mg/kg+Cd 0.5 mg/kg),低镉中钼组(Mo 30 mg/kg+Cd 0.5 mg/kg),低镉高钼组(Mo 45 mg/kg+Cd 0.5 mg/kg),高镉低钼组(Mo 15 mg/kg+Cd 1.0 mg/kg),高镉中钼组(Mo 30 mg/kg+Cd 1.0 mg/kg),高镉高钼组(Mo 45 mg/kg+Cd1.0 mg/kg),实验期50 d。并于当天、第25、50天每组各剖杀3头山羊取肾组织进行相关实验,观察不同剂量钼、镉对山羊肾脏细胞凋亡相关基因表达等的影响。结果显示,与对照组相比,在实验第25、50天时,实验组山羊肾脏bcl-2 mRNA表达量下降(P<0.01),bax mRNA、caspase-3 mRNA和cytc mRNA表达量上升(P<0.05或P<0.01);山羊钼镉联合胁迫导致肾线粒体抗氧化功能降低、自由基含量升高,导致细胞促凋亡基因表达量上升,抗凋亡基因的表达量下降,提示钼镉联合胁迫对山羊肾脏有明显损伤。

小型犬桡尺骨骨折的PRCL-S5型锁定骨板固定术诊疗

小型犬尤其是玩具型犬的桡尺骨远端骨折的治疗属于临床上的一大难题。治疗过程中需要考虑的问题有很多,如骨折不愈合、延迟愈合、骨髓腔堵塞、应力遮蔽和应力集中等。使用PRCL-S5型锁定骨板对小型犬桡尺骨远端进行内固定治疗,结合适当的术后护理措施,恢复良好。对常用的内固定方案进行了比较分析。

一例奶牛流行热的诊治

近日江西某奶牛场的奶牛突然暴发以高热、流泪、流涎、鼻漏、呼吸困难和跛行为临床特征的疾病,经诊断为牛流行热。该病又称三日热、暂时热,是由牛流行热病毒引起的牛的一种急性、热性传染病,该病病程较短,预后良好,

鸭CYP7_α1基因克隆、序列分析及组织表达研究

旨在克隆鸭胆固醇7α羟化酶1(CYP7α1)基因,并进一步探讨该基因的结构与功能,揭示其组织特异性表达规律。本研究以樱桃谷鸭为材料,运用同源序列克隆结合RACE技术,对鸭CYP7α1基因的cDNA全长进行克隆,并对其进行生物信息学分析及组织表达的研究。结果表明:鸭CYP7α1基因cDNA全长2 351bp,最大开放阅读框(ORF)1 539bp(114～1 652bp),共编码512个氨基酸;鸭CYP7α1氨基酸与鹅的同源性最高(97.5%),其次是鸡(92.8%)、人(67.3%)、猪(66.5%)、兔(65.7%)、大鼠(65.5%)、小鼠(65.5%)和牛(65.1%);经预测鸭CYP7α1蛋白可能含有1个P450超家族结构域;鸭CYP7α1基因在肝脏中呈高丰度表达,在其他9个组织中均未检测到或检测到少量表达,表明该基因的表达具有组织特异性。

锌添加水平对断奶仔猪生产性能及免疫机能的影响

探讨锌添加水平对断奶仔猪生产性能及免疫机能的影响。选用21日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪30头,按体质量和性别随机分成3组(Ⅰ～Ⅲ组),每组10头,分别饲喂基础日粮添加氧化锌(以锌量计)Ⅰ组100 mg/kg(对照组)、Ⅱ组1 000 mg/kg、Ⅲ组2 000 mg/kg,预试验7 d,正式试验42 d。结果表明:(1)平均日增重和日采食量,试验0～14 d,Ⅲ组显著高于Ⅰ组(P<0.05);试验15～28 d,Ⅱ、Ⅲ组显著或极显著高于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01),试验29～42 d极显著低于Ⅰ组(P<0.01);试验0～28 d,高锌可降低料重比(P<0.05),试验29～42d,料重比Ⅱ、Ⅲ组显著高于Ⅰ组(P<0.05);(2)脾脏、胸腺指数Ⅱ、Ⅲ组极显著高于Ⅰ组(P<0.01);(3)淋巴细胞转化率OD值:第14天时,Ⅱ、Ⅲ组显著高于Ⅰ组,第28天时,各组间差异不显著(P>0.05);第42天时,Ⅰ组极显著高于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.01)。猪瘟抗体水平Ⅱ、Ⅲ组极显著高于Ⅰ组(P<0.01)。这表明高锌能提高断奶仔猪生产性能及免疫机能。

绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因表面蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

在E.coli BL21中诱导表达含有绵羊肺瘤病毒囊膜表面蛋白(SU)重组质粒pGEX-4T-1-SU,表达的GST融合蛋白经纯化后用佐剂乳化,作为抗原免疫BALB/c小鼠,并进行细胞融合、克隆化、ELISA法初步筛选抗SU单抗。最终获得了3株抗SU的单抗,为深入探讨JSRV的分子生物学特性及研制诊断试剂盒打下了基础。

过瘤胃γ-氨基丁酸包被材料优化及其对肉牛热应激状态下生产性能的影响

旨在筛选一种过瘤胃γ-氨基丁酸(RP-GABA)的复合包被材料配方,并探讨在热应激环境下,肉牛生长性能与RP-GABA的剂量关系。设计3种包被配方,以1%,2%,3%丙烯酸树脂Ⅱ为包衣材料制备RP-GABA,人工模拟牛瘤胃及小肠进行过瘤胃保护试验及过小肠释放试验,以评价三种配方的生物利用度;以最高生物利用度的包被方法制备RP-GABA(GABA含量为50%),按每千克体质量为8、16、24、32 mg/d的剂量添加于基础饲粮中。结果表明,瘤胃液处理24 h,保护率分别为49.95%、79.94%、85.35%;肠液处理8 h,释放率分别为88.24%、70.51%、89.55%。配方Ⅲ包被γ-氨基丁酸具有最高的生物利用度,其抗热应激效果表明。与对照组相比,试验组牛日增重均有显著升高(P<0.05),其中以添加量为16 mg/kg的效果最为显著,平均日增重提高28.30%(P<0.05),料重比降低24.62%(P<0.05),但采食量无显著差异(P>0.05)。配方Ⅲ包被γ-氨基丁酸对夏季锦江黄牛抗热应激的效果最为突出,同时锦江黄牛添加纯GABA的剂量为每千克体质量约7.5~10.0 mg/d为宜。

日粮锌源和锌水平对断奶仔猪血清及组织铜、锌沉积的影响

探讨日粮锌源和锌水平对断奶仔猪血清及组织铜、锌沉积的影响。试验选用21日龄"杜×长×大"三元杂交的断奶仔猪40头,按体重和性别随机分成4组(Ⅰ～Ⅳ组),每组10头猪。分别饲喂添加氧化锌(以锌量计)Ⅰ组(对照组)100 mg/kg、Ⅱ组3 000 mg/kg和蛋氨酸锌(以锌量计)Ⅲ组100 mg/kg、Ⅳ组300 mg/kg相同的基础日粮,预试验7 d,正式试验42 d。结果表明:添加不同锌源和锌水平均能提高断奶仔猪血清锌水平,降低血清铜水平,但高锌3 000 mg/kg氧化锌使血清锌显著上升(P<0.05);高锌会降低脾脏、淋巴结、十二指肠和肾脏铜含量,提高肝铜含量。这表明高锌日粮能增加断奶应激仔猪体内锌水平,降低部分组织中铜含量。

细菌素及其应用的研究进展

细菌素是细菌自身生产的一类杀菌物质,由基因编码、核糖体合成,是自然界中细菌用于调节自身菌群结构的一类重要活性物质。细菌素的来源广泛、结构多样,对各种动物致病菌都具有高效抑杀作用,这些特点为细菌素开发成为一种新型抗菌药物提供了可能。作者对近年来在细菌素生物学特征的发展、分类更新及其应用研究等进行了综述,希望能为中国新型细菌素类动物药物的开发提供参考。

日粮锌源和添加水平对断奶仔猪组织锌及粪便排泄锌含量的影响

试验选用21日龄"杜×长×大"三元杂交的断奶仔猪40头,按体重和性别随机分成4组(Ⅰ～Ⅳ组),每组10头猪。分别饲喂添加氧化锌(以锌量计)Ⅰ组(对照组)100 mg/kg、Ⅱ组3 000 mg/kg和蛋氨酸锌(以锌量计)Ⅲ组100 mg/kg、Ⅳ组300 mg/kg的基础日粮,预试验7 d,正式试验42 d,结果表明:高锌3 000 mg/kg氧化锌使肝脏、肾脏和十二指肠锌含量极显著升高(P<0.01),十二指肠和肝脏锌含量Ⅳ组显著高于Ⅰ、Ⅲ组,脾脏、淋巴结锌含量各组间差异均不显著(P>0.05);高锌日粮可使断奶仔猪粪便中锌排泄浓度显著增加,易造成环境污染,日粮添加相同剂量锌的蛋氨酸锌组猪粪便中锌排泄量低于氧化锌组。