靶向Cdc6 RNAi抑制舌癌CAL-27细胞的增殖

【目的】应用RNA干扰技术,靶向抑制舌癌细胞中Cdc6的表达,观察舌癌细胞增殖、凋亡等改变,初步探讨下调Cdc6表达抑制舌癌细胞增殖的分子机制。【方法】实验分4组:空白对照组CON,阴性对照组NC,实验组KD1和KD2。应用前期构建的Cdc6的慢病毒载体,转染舌癌CAL-27细胞,通过Real time RT-PCR和Western blot法检测Cdc6 mRNA及蛋白的表达;以MTT法测定活细胞数并绘制细胞生长曲线;利用流式细胞仪观察细胞凋亡。【结果】慢病毒载体转染CAL-27细胞后,Real time RT-PCR和Western blot实验结果显示:舌癌CAL-27细胞中Cdc6的表达明显被抑制,相对NC组,KD1、KD2组对Cdc6基因敲减效率分别为55.60%和64.38%。蛋白表达分别降低44.44%和66.67%;细胞生长曲线表明,细胞生长明显减缓,KD1和KD2组细胞生长抑制率分别为33.68%和35.79%;流式细胞仪检测细胞周期显示:KD1组、KD2组两组细胞凋亡率较NC组均有显著上升,分别为57.55%和83.81%。【结论】靶向Cdc6慢病毒载体RNA干扰能有效抑制舌癌CAL-27细胞的DNA复制,阻止舌癌细胞的增殖。

白细胞介素-6在大鼠放射性口腔黏膜炎中的表达及意义

目的检测白细胞介素-6在大鼠放射性口腔黏膜炎组织中的表达水平,并探讨其在ROM中的作用。方法建立放射性口腔黏膜炎SD大鼠模型,切取舌组织,用免疫组化SABC法检测白细胞介素-6蛋白在黏膜炎组织中的表达部位及表达强度。结果成功地建立了SD大鼠放射性口腔黏膜炎动物模型;免疫组化结果显示:白细胞介素-6蛋白在ROM黏膜组织中广泛表达。结论放射性口腔黏膜炎组织有白细胞介素-6蛋白的表达,其表达与放射性口腔黏膜炎的严重程度有关。

CBCT在种植体周围炎和牙周炎诊断治疗中的应用研究

目的:探讨锥形束CT在种植体周围炎和牙周炎的诊断及指导其相关治疗过程中的辅助作用。通过与传统二维影像对比分析来了解锥形束CT在口腔临床疾病辅助诊断与治疗的特点,从而为临床的推广运用提供参考。方法:选择2010年5月～2012年3月在我院就诊的种植体或牙周炎的患者,对其进行常规临床检查,并用传统X线片与锥形束CT进行对比分析。所有病例有3名高年资医师和1名放射主管技师共同作出诊断。结果:锥形束CT和传统X线片在判断牙齿/种植体的近远中区域牙槽骨的缺损方面无统计学差异(P>0.05),而在评估牙齿/种植体的颊舌侧及根分叉处的牙槽骨缺损方面有显著性差异(P<0.05)。由于能分析判断牙槽骨骨密度的改变,锥形束CT不仅能够早期诊断种植体周围炎或牙周炎,还能够从三维方向早期观察了解其周围牙槽骨的形态学上的变化。

牵张成骨后皮罗序列征患儿的体质量变化

背景:牵张成骨能有效改善皮罗序列征患儿的气道梗阻,术后患儿生长发育抑制能得到明显改善,尤其表现在患儿体质量的增长方面,然而目前没有数据来评价早期牵张成骨后皮罗序列征患儿体质量增长的变化情况。目的:记录皮罗序列征患儿不同阶段体质量百分位数变化情况,并与单纯腭裂及未行牵张成骨皮罗序列征患儿进行对比,评估早期牵张成骨对患儿生长发育的影响。方法:收集广州市妇女儿童医疗中心2015至2018年收治的56例严重皮罗序列征患儿的临床资料,其中41例进行下颌骨牵张成骨术(牵张成骨组),分别记录5个时间点(出生、初次就诊、下颌骨牵张成骨术前、拆除牵张器及腭裂手术)的体质量。将患儿的体质量转化为体质量百分位数,利用统计软件制作患儿生长速度曲线图;按下颌骨牵张成骨术实施年龄,将患儿分成3组(<1个月、1-3个月、4-7个月),同时收集21例单纯腭裂(单纯腭裂组)及15例未行牵张成骨皮罗序列征患儿(未手术组)5个时间点的体质量百分位数资料,进行组间对比。所有患儿监护人对治疗方案均知情同意,且得到医院伦理委员会批准。结果与结论:(1)牵张成骨组患儿平均体质量百分位数从出生的34.4±23.0下降至下颌骨牵张成骨术前的13.1±15.3(P <0.001);拆除牵张器时体质量百分位数上升至28.2±24.1,与下颌骨牵张成骨术前相比差异有显著性意义(P <0.05);随访时的体质量百分位数上升至42.4±14.1,与拆除牵张器时比较差异有显著性意义(P <0.001);(2)在(10.6±2.6)个月随访时,牵张成骨组患儿体质量百分位数显著大于未手术组皮罗序列征患儿(P <0.001),单纯腭裂组与牵张成骨组差异无显著性意义(P> 0.05);(3)在第1次就诊时,手术年龄1-3个月组及4-7个月组体质量百分位数较<1个月组下降明显(P<0.05);(4)提示牵张成骨有利于减少皮罗序列征对患儿体质量百分位数增长抑制的影响,越早期手术,越有利于患儿体质量的增长。

口腔冲洗护理在舌癌手术后的应用

目的探讨舌癌术后口腔护理的方法。方法观察100例舌癌术后需口腔冲洗的患者冲洗后效果,评价患者口腔舒适度和清洁度,口腔冲洗的并发症。结果 95%的舌癌术后患者口腔清洁度良好,92%患者口腔舒适度改善明显,仅1例术后感染及伤口愈合不良的发生。结论口腔冲洗护理有利于清除口腔食物残渣,血迹及伤口渗出液,对于口腔清洁及湿润,预防创口感染有明显的效果。

实现生成性教学的教学策略

生成性教学如何实现？在参考已有的研究成果的基础上，结合笔者在实践中的探索与研究，总结出如下两种比较有效的策略。

鼻声反射在婴儿期软腭裂术后鼻咽气道测量的应用分析

目的:探讨鼻声反射测量(AR)测量婴儿期软腭裂术后鼻咽气道通气功能的价值。方法:分析2015年3月至2016年3月在广州市妇女儿童医疗中心口腔颌面外科完成软腭裂整复的41例不完全性软腭裂婴儿(6~9个月)的临床资料。术后3 d、1个月、6个月使用鼻声反射仪器测量鼻咽声反射参数,包括鼻咽腔最小横截面积(MCSA)、鼻咽腔最小横截面积到前鼻孔距离(DMCA)、鼻咽腔容积(NV)、鼻咽腔容积(NPV)。与45例同龄正常健康婴儿进行对比。结果:婴儿期软腭裂术后不同阶段的声反射鼻咽腔测量曲线与同龄人群相比,MCSA、NPV差异均有统计学意义(P<0.01),而DMCA、NV差异无明显统计学意义。术后不同时期比较,其中术后3 d的MCSA最小,术后1个月NPV随着鼻咽腔的深入逐渐变大。术后1个月的DMCA及MCSA和术后半年无统计学差异。结论:声反射鼻腔测量检查快速、无创,重复性好,可用于评估软腭裂婴儿术后不同阶段鼻咽气道变化状态,对鼻咽腔容积及横截面积进行定量诊断,了解腭裂术后鼻咽腔通气变化状况。

铜绿假单胞菌信号分子3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD的结合特性研究

目的制备纯化的人过氧化物酶体增殖物激活受体-配体结合域(PPARγ-LBD)肽段并观察铜绿假单胞菌信号分子N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)与PPARγ-LBD的结合强度。方法采用分子对接的方式预测3-O-C_(12)-HSL与PPARγ的结合位点。合成PPARγ-LBD基因序列并插入pET28b质粒,鉴定后通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组肽段,进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot分析。表面等离子体共振技术检测3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD的结合动力学参数。结果分子对接结果显示3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD区的Tyr473和Tyr327形成氢键,3-O-C_(12)-HSL末端柔性碳链与PPARγ-LBD区的Met329、Leu330等残基形成疏水结合。制备获得人PPARγ-LBD肽段,经SDS-PAGE及Western blot检测在25~35 ku有一条蛋白的印迹,与PPARγ-LBD分子质量一致。3-O-C_(12)-HSL与PPARγ结合的亲和力常数为1.65×10^(-4) mol/L,结合速率常数为1.06×10^(2)/ms,解离速率常数为1.75×10^(-2)/s。结论3-O-C_(12)-HSL与PPARγ-LBD功能区结合能力强于PPARγ特异性拮抗剂GW9662,为制备针对3-O-C_(12)-HSL的特异性靶向药物提供了实验依据。

依达拉奉预防大鼠放射性口腔黏膜炎的初步研究

目的探讨依达拉奉对放射性口腔黏膜炎(ROM)的预防作用及其可能机制,为ROM提供新的防治方法。方法通过一次性照射SD大鼠舌背30GyX线,观察阴性对照组大鼠与用药组大鼠舌背黏膜的变化,其中用药组大鼠在接受照射前30min给予腹腔注射依达拉奉20mg/kg。照射后每天上午8时、下午4时共2次观察各组大鼠的活动度,称取体重;通过HE切片、免疫组化的方法,比较用药组和阴性对照组SD大鼠ROM的严重程度。结果经一次性照射30GyX线后,阴性对照组大鼠与用药组大鼠均出现ROM;用药组大鼠较阴性对照组大鼠的活动度较好,体重下降程度、舌部溃疡均较轻,白细胞介素6的表达较弱。结论依达拉奉可以显著减轻ROM的程度,放射前应用依达拉奉是一种预防ROM的有效方法。

Furlow腭成形术治疗腭裂术后腭咽闭合不全的临床疗效

目的探讨采用Furlow腭成形术在腭裂术后腭咽闭合不全(velopharyngeal insufficiency,VPI)整复中的应用价值。方法 2015年8月—2017年1月,采用Furlow腭成形术治疗48例腭裂术后VPI患者。男29例,女19例;年龄4～17岁,平均6.1岁。不完全性腭裂16例,完全性腭裂32例;软腭裂16例,软硬腭裂32例。腭裂手术至该次手术时间为3～13年,平均5.9年。患者均伴有明显过高鼻音,且鼻漏气明显。电子鼻咽纤维内窥镜评估腭咽闭合程度均为Ⅲ级。记录手术时间、术中出血量,术前及术毕时分别测量腭总长度、软腭长度、咽腔深度、咽腭弓宽度,并计算手术前后差值。术后3个月,临床评估腭咽闭合程度,分为腭咽闭合完全(velopharyngeal competence,VPC)、边缘性腭咽闭合(marginal velopharyngeal inadequacy,MVPI)、VPI;摄头颅定位侧位X线片评价软腭及咽后壁关系,分为完全接触、点接触及无接触;电子鼻咽纤维内窥镜检查评估腭咽闭合程度(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级)。对腭总长度、软腭长度、咽腔深度、咽腭弓宽度手术前后差值的相关性采用Spearman分析;分别对软腭及咽后壁接触程度及腭咽闭合程度进行分组,对上述指标进行统计学分析。结果手术时间35～64 min,平均41 min;术中出血量3～10 mL,平均6 mL。患者均获随访3个月。术后3个月,临床评估腭咽闭合程度为VPC 34例、MVPI 7例、VPI 7例;头颅定位侧位X线片示,软腭与咽后壁完全接触30例、点接触11例、无接触7例;电子鼻咽纤维内窥镜检查示,腭咽闭合功能均有不同程度改善,Ⅰ级29例,Ⅱ级12例,Ⅲ级7例。手术前后腭总长度、软腭长度、咽腔深度和咽腭弓宽度比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,手术前后腭总长度差值与软腭长度差值成正相关(r=0.448,P=0.001)。VPC、MVPI、VPI组腭总长度、软腭长度、咽腔深度手术前后差值组间比较差异有统计学意义(P<0.05);咽腭弓宽度手术前后差值比较差异无统计学意义(P>0.05)。完全接触、点接触及无接触组腭总长度、软腭长度手术前后差值比较差异有统计学意义(P<0.05);咽腔深度及咽腭弓宽度手术前后差值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论采用Furlow腭成形术行腭裂术后VPI整复,可有效延长软腭,减小咽腔深度,恢复腭咽闭合的生理解剖形态,显著改善腭咽闭合功能。

婴幼儿下颌骨牵张成骨截骨线的选择

目的探讨在婴幼儿下颌骨牵张成骨术中截骨线的选择方法及其意义。方法回顾性分析2013年5月至2018年7月广州市妇女儿童医疗中心口腔颌面外科收治的208例婴幼儿下颌骨畸形患儿的临床资料,男131例,女77例,年龄8d至4岁,平均6个月。其中罗宾序列征162例,第一、二鳃弓发育不良37例,Treacher-Collins综合征2例,其他先天性畸形7例。在牵张成骨术中,根据患儿下颌骨畸形特征选择不同的截骨线:(1)对于下颌骨体部过短者,术中采用直线截骨线延长体部。(2)对于下颌骨升支过短者,术中采用折线截骨线延长升支。(3)对于下颌骨体部长轴与升支长轴夹角过大者,采用弧形截骨线改变下颌角角度。结果208例中采用直线截骨38例、折线截骨129例、弧线截骨41例。其中4例直线截骨患者出现乳牙胚损伤,6例直线截骨患者和2例折线截骨患者出现前牙区开,弧线截骨患者未出现牙胚损伤和关系紊乱。术后随访3个月至5年,平均6.2个月。所有患者截骨牵张区域愈合良好,未出现骨段坏死或者骨不连。结论应根据婴幼儿下颌骨畸形特征设计下颌骨牵张成骨术截骨线,可减少牙胚损伤、关系紊乱等并发症。