miR-21和miR-130b靶向性人工设计circRNA抑制肝癌细胞上皮间质转化

目的探讨人工改造的CDR1as(M-CDR1as)是否可通过特异性结合miR-21和miR-130b,体外抑制小鼠Hepa1-6肝癌细胞的上皮间质转化(EMT)。方法将CDR1as中miR-7结合位点替换为特异性结合mmu-miR-21或mmu-miR-130b的碱基序列。将小鼠Hepa1-6肝癌细胞分为对照组,空质粒组(NC)和M-CDR1as组。采用RT-qPCR检测Hepa1-6细胞内M-CDR1as的水平及其对靶miR-21和miR-130b水平的影响。利用RT-qPCR和Western blot法检测各组肝癌细胞中EMT相关Vimentin,E-cadherin及N-cadherin的mRNA水平和蛋白表达量。结果仅M-CDR1as组可在阈值以上检测到M-CDR1as。M-CDR1as组miR-21水平较对照组和NC组有所下降(P>0.05),M-CDR1as组miR-130b水平较对照组及NC组均明显下调(P<0.001)。Vimentin和N-cadherin mRN水平较对照组和NC组明显下降(P<0.01),E-cadherin mRNA较对照组和NC组明显升高(P<0.01)。Vimentin和N-cadherin蛋白表达量较对照组和NC组明显下降(P<0.01);而E-cadherin较对照组和NC组表达明显升高(P<0.01)。结论 M-CDR1as可通过结合吸附miR-21和miR-130b体外抑制小鼠Hepa1-6肝癌细胞的EMT。

尿毒症患者血脂和载脂蛋白的变化及临床价值

随着透析、肾移植、饮食疗法等治疗的广泛开展,肾脏病患者的生存期显著延长,但肾脏病本病及其治疗所致的并发症和代谢紊乱出现了明显上升的趋势。国内资料表明,尿毒症心脏异常占70％,尿毒症患者死于心血管并发症占62.5％。如何早期发现及预防肾脏病患者的心血管合并症,已成为临床工作中颇受关注的问题。我们通过观察尿毒症患者的血脂及载脂蛋白水平,探讨尿毒症合并心血管疾病的危险因素和脂质异常特点。 1

miR-21和miR-130b靶向性人工改造circRNA抑制原发性肝癌的肺转移

目的:人工改造小脑变性相关蛋白1反义转录物(CDR1as),通过同时结合肝癌细胞中癌基因miR-21和miR-130b,抑制肝癌的肺转移。方法:将CDR1as中miR-7结合位点替换为特异性结合mmu-miR-21或mmu-miR-130b的碱基序列,建立携带小鼠端粒酶逆转录酶(mTERT)启动子的M-CDR1as重组慢病毒。利用致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)和促癌剂四氯化碳(CCl4)诱导C57BL/6小鼠原发性肝癌模型。利用肝组织HE染色验证肝癌是否造模成功以及干预后肺转移情况。qRT-PCR检测干预后各组肿瘤组织内M-CDR1as的含量。结果:成功建立了C57BL/6小鼠原发性肝癌模型,qRT-PCR检测到仅治疗组肝癌组织M-CDR1as的表达,M-CDR1as重组慢病毒改善肝癌肺转移。结论:M-CDR1as体内可抑制肝癌的肺转移,有望成为肝癌治疗的新方向。