溶血相关基因缺失降低鳗弧菌感染花鲈的致病性

为阐明毒力因子溶血素对鳗弧菌感染花鲈过程中发挥的作用,实验以花鲈为研究对象,通过对花鲈幼鱼分别注射5.0×10^(5)CFU鳗弧菌野生株和缺失株△vah1-vah4-rtxA,评估了溶血相关基因缺失对花鲈的感染能力、花鲈各组织的病理变化情况以及免疫响应的影响。结果显示,花鲈感染野生株后的LD_(50)为2.103×10^(5)CFU/mL,感染缺失株△vah1-vah4-rtxA后LD_(50)为1.837×10^(6)CFU/mL,溶血相关基因缺失使鳗弧菌毒性降到原来的11.44%;鳗弧菌主要定植在花鲈的肠道和鳃中,溶血相关基因缺失降低鳗弧菌在花鲈体内的定植能力,同时降低对鳃和肠道的损伤程度;转录组分析表明vah1、vah4和rtxA缺失后,头肾组织的差异表达基因显著富集到造血细胞谱系、抗原处理和呈递、细胞黏附分子、肠道免疫网络的IgA生产等免疫通路,并用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对表达水平进行了验证。研究表明,溶血相关基因缺失降低了鳗弧菌感染花鲈的致病能力。研究结果有助于进一步了解鳗弧菌的致病机制,并为开发花鲈抗弧菌免疫增强剂或减毒疫苗提供依据。

澳洲龙纹斑养殖过程中主要疾病诊断及其防治

澳洲龙纹斑是从澳大利亚引进的一种淡水养殖的鱼类新品种,其肉质鲜嫩,营养丰富,商品经济价值高。但澳洲龙纹斑对养殖条件要求严格,特别是在其养殖过程中发生的各种鱼病要注重防治。澳洲龙纹斑常见病害主要为寄生虫病、细菌性疾病、真菌性疾病和病毒性疾病。通过对澳洲龙纹斑上述常见病害的临床症状、病原及其流行特性进行分析,提出针对性的诊断方法与有效防治技术。

重金属离子与消毒药物对澳洲龙纹斑幼鱼的急性毒性

为了获知重金属离子与消毒药物对澳洲龙纹斑幼鱼的急性毒性浓度,选用硫酸铜、硫酸锌、氯化镉、硝酸铅4种重金属化合物与二氧化氯、聚维酮碘、高锰酸钾、甲醛、食盐5种消毒药物,通过调配不同浓度,对澳洲龙纹斑幼鱼进行急性毒性试验,采用静水法测定9种消毒药物及重金属离子对澳洲龙纹斑幼鱼每隔24h的LC50(半数致死浓度)、LC100(绝对致死浓度)和SC(安全浓度)。结果表明,硫酸铜、硫酸锌、氯化镉、硝酸铅、二氧化氯、聚维酮碘、高锰酸钾、甲醛、食盐对澳洲龙纹斑幼鱼的安全质量浓度(SC)分别为0.122 3、0.571 3、0.020 0、0.461 2、5.030 0、0.532 4、0.958 9、6.960 0、1.584 0mg·L^(-1)。综合分析认为,4种重金属化合物与5种消毒药物对澳洲龙纹斑的急性毒性的大小顺序为:氯化镉>硫酸铜>硫酸锌>聚维酮碘>高锰酸钾>硝酸铅>食盐>二氧化氯>甲醛。

不同药物对澳洲龙纹斑幼鱼小瓜虫病的治疗效果

小瓜虫病是澳洲龙纹斑鱼人工养殖过程中威胁最大的病害,特别是在幼鱼阶段,致死率高达100%。通过两组药物治疗方案,对比和分析治疗澳洲龙纹斑小瓜虫病的效果。结果表明,试验组药物治疗方案(鱼康乐+氟苯尼考+盐酸土霉素药物制剂+活性腐殖酸钠)防治小瓜虫病鱼的鱼苗成活率高达93.3%,而参照组药物(福尔马林+工业盐)防治小瓜虫病鱼苗存活率仅30.0%。试验药物的优化配方为:鱼康乐2g·t^(-1),氟苯尼考3g·t^(-1),盐酸土霉素药物制剂3g·t^(-1),活性腐殖酸钠0.8g·t^(-1)。

4种鳗鲡同工酶的比较研究

以日本鳗鲡(Anguilla japonica)、澳洲鳗鲡(A.australis)、欧洲鳗鲡(A.anguilla)和美洲鳗鲡(A.rostrata)成体为试验材料,应用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对4种鳗鲡的眼球、肌肉、肝脏、心脏和肾脏5种组织的8种同工酶(酯酶EST、乳酸脱氢酶LDH、苹果酸脱氢酶MDH、葡萄糖脱氢酶GCDH、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G6PD、醇脱氢酶ADH、超氧化物歧化酶SOD和谷氨酸脱氢酶GDH)进行比较研究。结果表明:GDH在5种组织中均没有表达,7种同工酶(EST、LDH、MDH、GCDH、G6PD、ADH、SOD)在4种鳗鲡均表现出很强的组织特异性。4种鳗鲡的同工酶谱表型非常相似,在同一组织中同工酶的存在位点、表达形态、活性等方面是类似的,但也表现出一定的种间差异性。应用酶谱差异指数D对4种鳗鲡进行聚类分析,结果提示日本鳗鲡和澳洲鳗鲡有较近的亲缘关系、而欧洲鳗鲡和美洲鳗鲡有较近的亲缘关系,这与4种鳗鲡的形态特征和生物学特征相吻合。

中草药验方对乏情母猪繁殖性能的影响

试验选择由卵巢机能失调、子宫炎、阴道炎为主要原因引起的乏情母猪,通过中草药制剂和西药促性腺激素进行催情治疗的效果比较。证实了中草药验方对乏情母猪具有较好的提高繁殖性能的作用。

三七总皂苷对大黄鱼抗变形假单胞菌感染能力的影响

为研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对大黄鱼(Larimichthys crocea)抗变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)感染能力的影响,首先通过体外试验测定PNS对变形假单胞菌的抑制效果,然后将PNS溶液腹腔注射体质量为20~30 g的大黄鱼,3 d后用浓度为1.02×10^(9)CFU/L的变形假单胞菌浸泡感染2 h,并测定感染前后全脾和后肾组织中的相对含菌量及TNF-α等免疫相关因子的表达水平。结果表明:质量浓度为50、25 mg/mL的PNS体外抑菌效果显著(P<0.05);PNS注射给药的大黄鱼(PNS组)在变形假单胞菌感染后8 d时的存活率较生理盐水注射组(对照组)高18.46%(P>0.05);变形假单胞菌感染后第4、8天,PNS组大黄鱼脾、后肾组织中的相对含菌量略低于对照组(P>0.05);PNS组脾组织TNF-α蛋白表达水平在感染变形假单胞菌前后均显著低于对照组(P<0.05),但其mRNA转录水平在感染后显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,PNS在体外对变形假单胞菌具有抑制效果,注射PNS能在一定程度上增强大黄鱼抗变形假单胞菌感染的能力,降低感染后脾和后肾组织中的菌量,调控TNF-α等炎症因子的表达,提高感染后的存活率。

中草药免疫增强剂对南美对虾血液生化指标的影响

该研究针对南美白对虾的生理特点,采用中医的辨证施治方法,选用具有补脾益气、消食导滞、催肥增重和增强免疫力等许多优点的中草药组方作为南美白对虾的中草药免疫增强剂。试验结果表明,饲料日粮中添加中草药免疫增强剂的南美白对虾比对照组增重明显,为了验证中草药免疫增强剂的作用原理,试验进行了南美白对虾实验组和对照组几种常见血液免疫生化指标的检测,发现用过中草药免疫增强剂的南美白对虾血液免疫生化指标几种常见体酶的活力有不同程度的提高,由此证实了中草药免疫增强剂对南美白对虾的免疫效果。

武夷山常绿阔叶林土壤微生物多样性的季节动态

为了解武夷山自然保护区常绿阔叶林土壤微生物群落特征和季节变化,采用Illumina Miseq高通量测序技术分析了土壤微生物多样性的季节响应。结果表明,武夷山常绿阔叶林土壤为典型的南方酸性土壤,有效钾、土壤温度四季内存在显著差异,其他理化指标均无显著差异。土壤中的微生物多样性比较丰富,已鉴定出23门206属细菌和2门17属的古菌。夏季反映细菌总数的Chao指数最高,但反映细菌多样性的Shannon指数比春季低0.21,夏季古菌的Chao指数和Shannon指数分别比冬季高21.7%和0.27%。4个季节共有的细菌和古菌分别占总数的83.1%和70.0%,说明武夷山常绿阔叶林土壤不同季节的核心微生物组成具有很好的稳定性。在门和属水平的聚类树分析表明,春季和冬季的细菌和古菌群落组成最为接近,而夏季与其他3个季节的差异最大。冗余分析和热图分析结果表明,土壤p H是决定和影响细菌和古菌多样性的主要环境因子,有效钾、有效碳和总氮对微生物群落组成均有很大的影响。因此,随季节变化武夷山常绿阔叶林土壤微生物多样性呈现出规律性变化。

不同供氮水平对叶菜型甘薯生理指标及叶绿体结构的影响

采用盆栽试验,设置6个氮素水平:每盆施尿素0(N0)、2.1(N1)、4.2(N2)、6.3(N3)、8.4(N4)、10.5(N5)g,研究不同氮素供应水平下福薯7-6叶片游离脯氨酸、可溶性蛋白质、相对质膜透性以及叶绿体超微结构的变化特征,探讨叶菜用甘薯对不同氮肥用量的响应。结果表明:氮肥使用不足以及施用过量均会导致福薯7-6叶片游离脯氨酸含量增加,可溶性蛋白质含量下降、质膜选择透性增大,叶绿体膨胀变形、双层膜模糊、基粒类囊体排列不规则。在本试验条件下,氮肥不足及施用过量均会对福薯7-6叶片产生胁迫,造成福薯7-6叶片的早衰及细胞膜透性的增加,同时对叶绿体超微结构造成伤害。

澳洲龙纹斑鱼种生长特性研究

在福建山区养殖条件下,进行澳洲龙纹斑Maccullochella peelii peeli鱼种的饲养试验。澳洲龙纹斑鱼种的平均体重和全长分别为(1.29±0.23)g和(4.56±0.30)cm;试验期水温22~28℃,投喂粗蛋白51.2%的商品饲料。经97d培育,澳洲龙纹斑鱼种的平均体重和全长分别达(12.84±1.30)g和(10.03±0.36)cm。澳洲龙纹斑鱼种体重和全长特定生长率分别为2.37%和0.81%;该鱼种体重与全长的最优回归方程为幂函数方程W=0.016L^(2.884)。以Gompertz非线性生长模型算得澳洲龙纹斑鱼种体重和全长生长拐点分别为11.8g和8.5cm,拐点日龄分别为170d和149d;全长生长拐点日龄的出现先于体重生长拐点。

澳洲龙纹斑生物学特征及其繁养殖技术研究进展

澳洲龙纹斑Maccullochellapeeliipeelii是原产于澳大利亚墨瑞河的一种经济鱼类,是澳大利亚乃至世界上品质优良及种群类型较大的淡水鱼类之一。近年澳洲龙纹斑已经引入中国并开始驯化开发。其作为一项新兴的水产养殖产业,给人们带来新的开发途径,但开发者也将面临许多新的技术问题,如何有效地人工繁殖,保障健康养殖与有效防控病害等。本文就澳洲龙纹斑的生物学特性、人工繁殖养殖技术、经济价值和养殖技术以及疾病防控等方面进行综述介绍,同时结合先期的养殖实践,提出若干发展对策与建议。

航天搭载后福橘(Citrus reticulata Blanco)茎尖无性系有丝分裂行为和细胞超微结构的变化

福橘(Citrus reticulata Blanco)茎尖经‘实践八号’育种卫星搭载后,经组织培养获得其再生植株,以此为材料,结合常规压片法与超薄切片技术,研究航天搭载对福橘当代无性系细胞有丝分裂行为及细胞超微结构的影响。结果表明:航天搭载对福橘茎尖具有诱变作用,所得13个诱变无性系中,有丝分裂过程存在不同程度的异常,其中‘08004’无性系植株的有丝分裂畸变率明显高于其他无性系:中期染色体数目异常畸变率为0.34%,落后染色体畸变率为0.69%,微核畸变率为0.86%;并且有丝分裂过程中纺锤体结构发生异常,可见C-形(0.17%)或S-形纺锤体(1.20%),细胞发生多极分裂(1.03%)。绝大多数航天搭载当代无性系的细胞超微结构正常。‘08004’无性系植株叶肉细胞超微结构呈现细胞程序性死亡(PCD)典型特征:细胞核内染色质凝集;叶绿体类囊体结构解体;出现自体吞噬小体;细胞液泡化并发生质壁分离,最终形成凋亡小体。PCD过程中,线粒体保持其结构完整性,直至PCD末期才发生结构变化。

含嗜水气单胞菌气溶素的免疫刺激复合物的制备及其对欧洲鳗的免疫效果

将嗜水气单胞菌气溶素(AerA)基因定向连接到pET32a(+)表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析表明,硫氧还蛋白-气溶素融合蛋白(Trx-AerA)表达量占重组菌总蛋白量的65.5%。将上述融合蛋白与商品化的QuilA混合,分别添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇获得Trx-AerA ISCOMs。其中同时添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇组蛋白回收率最高为10.46%,仅添加QuilA组蛋白回收率为1.82%,两者差异显著(P<0.05)。分别采用Trx-AerA、Trx-AerA ISCOMs、Trx ISCOMs经腹腔注射免疫欧洲鳗,免疫30 d后,每个实验组取5尾实验鱼采集血清,按1∶200稀释通过ELSIA法检测抗体水平,同时采用菌数为2.0×106CFU的嗜水气单胞菌ZN1株进行攻击,测定免疫效力。结果显示:Trx-AerA免疫组相对保护率为0%(3/15),Trx-AerA ISCOMs免疫组为83.3%(13/15),Trx ISCOMs免疫组为50%(9/15);3个免疫组针对气溶素的特异性抗体水平OD450值分别为0.19,0.52,0.36,Trx-AerA ISCOMs免疫组、Trx-AerA免疫组显著高于Trx ISCOMs免疫组(P<0.05)。结果表明影响嗜水气单胞菌免疫效果的除了气溶素的抗体水平外,ISCOMs等也能够增强非特异性免疫保护应答。

史氏鲟鱼鱼籽营养成分分析及评价

通过研究史氏鲟鱼鱼籽中主要营养成分的含量,利用蛋白质营养的化学评估,为鲟鱼鱼籽的深加工提供参考,为鲟鱼资源的开发及综合利用提供科学依据。采用常规测定方法分析史氏鲟鱼鱼籽中的营养成分。检测结果显示,史氏鲟鱼鱼籽中粗蛋白含量为26.00%;18种氨基酸含量为25.21%,其中必需氨基酸的含量为10.16%,占氨基酸总量的40.30%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为67.51%,第一限制氨基酸为色氨酸,其氨基酸评分为92;不饱和脂肪酸占脂肪酸总量的62.8%,EPA和DHA共占10.3%;矿物质含量丰富,尤其是Fe、Zn,达22.07mg/kg和18.00mg/kg。因此,史氏鲟鱼鱼籽具有高蛋白、低糖的特点;蛋白中氨基酸种类齐全,配比合理;含有丰富的矿物质和不饱和脂肪酸,是一种值得大力开发研究与推广的优质资源。

澳洲龙纹斑肌肉氨基酸的分析研究

为研究不同生长阶段的澳洲龙纹斑肌肉氨基酸组成的动态变化,同时探讨并比较处于商品鱼阶段的澳洲龙纹斑、石斑鱼、鲟鱼肌肉氨基酸的组成与含量变化,以期推广澳洲龙纹斑的养殖技术与引导消费,本研究通过氨基酸自动分析仪检测澳洲龙纹斑亲鱼、商品鱼、幼鱼以及石斑鱼商品鱼、鲟鱼商品鱼中肌肉氨基酸含量,系统分析了澳洲龙纹斑不同生长阶段氨基酸组成的变化规律,同时比较了不同种类商品鱼氨基酸组成的含量。结果表明:3种不同生长阶段的澳洲龙纹斑氨基酸总含量最高为商品鱼70.96%、其次为幼鱼69.24%、亲鱼最低为65.36%(以干基计算),在氨基酸组成中亲鱼和商品鱼的比例较为接近,而幼鱼的氨基酸组成比例则有所变化,在必需氨基酸中,其EAA/TAA值则比亲鱼以及商品鱼低2%左右,而在非必需氨基酸中,EAA/NEAA比值又高于亲鱼与商品鱼2%左右;澳洲龙纹斑、石斑鱼、鲟鱼3种商品鱼肌肉中甜味氨基酸和鲜味氨基酸的含量之和均超过50%(澳洲龙纹斑57.17%,石斑鱼57.68%,鲟鱼57.85%),其反映了3种商品鱼肉质味道鲜美度是处在同一等级上;同时,澳洲龙纹斑商品鱼(E/T比值为40.34、E/NT比值为67.62)符合WHO/FAO提出的E/T应为40%左右和E/NT应为60%以上的参考蛋白质模式标准。

小瓜虫对澳洲龙纹斑不同生长阶段苗种的感染与致病性研究

为了解澳洲龙纹斑苗种人工感染小瓜虫的情况,本研究以小瓜虫感染3种生长阶段鱼体(平均全长分别为1.2 cm、2.3 cm和10.7 cm),记录其达到全部致死时间(LT_(100)),分别为10 d、13 d和13 d;半数致死时间(LT_(50))分别为6.4 d、8.8 d和6.7 d;最高感染强度分别为168个、150个和1 450个小瓜虫。分析表明其小瓜虫感染率、感染强度和死亡率与感染天数均呈显著正相关(p<0.01)。相同感染天数的澳洲龙纹斑驯食前和驯食期鱼苗小瓜虫感染强度差异不显著,鱼种阶段的小瓜虫感染强度则显著高于鱼苗阶段(p<0.01)。澳洲龙纹斑鱼苗阶段感染小瓜虫初期呈随机分布,随后均为聚集分布;鱼种阶段感染小瓜虫均呈聚集分布。Logistic模型可很好拟合澳洲龙纹斑苗种小瓜虫感染强度、感染率和死亡率曲线;感染率拐点出现时间均早于感染强度和死亡率拐点时间。本研究结果为澳洲龙纹斑苗种培育中防控小瓜虫病提供了实验依据。

氮磷钾缺乏对薯蔓并长期甘薯生物量累积、养分吸收与分配及其品质的影响

田间小区试验通过不同施肥处理,研究氮磷钾配比对甘薯生物量累积、养分吸收与分配及其品质的影响。结果表明:薯蔓并长期甘薯的块根及茎叶在全素(NPK)处理下均能获得较大的生物量累积,块根中的养分含量也相对较高。与全素(NPK)相比,氮、磷、钾缺乏不同程度地影响了甘薯块根及茎叶的生物量累积,其中氮磷钾均缺乏(CK)影响最大,氮肥其次;缺氮显著影响了甘薯块根中氮的吸收,显著增加了甘薯各器官钾元素的吸收,对各器官磷的吸收影响不显著;缺磷显著降低了甘薯块根中氮和钾的含量,而缺钾增加了甘薯块根中氮的吸收,但对甘薯各器官的磷含量影响不显著。另外,氮、磷、钾缺乏降低了甘薯块根中的养分含量,作为一种淀粉类作物,淀粉含量在氮磷钾均缺乏(CK)情况下最低,其次是缺氮处理,但缺氮与缺磷和缺钾处理相比无明显差异。以上结果表明,除氮磷钾均缺乏情况,缺氮对薯蔓并长期甘薯的生长及块根中的养分含量影响最大。

鉴别史氏鲟性别的两种创伤手术比较分析

对鉴别史氏鲟性别的2种创伤手术——穿刺技术和腹腔外科手术进行比较、分析,结果表明,穿刺技术虽然比腹腔外科手术迟一年鉴别出史氏鲟鱼性别,但穿刺技术具有愈合伤口更早、日增重量更多和成活率更高的优点,建议鲟鱼养殖业者优先选择穿刺技术用于史氏鲟性别的鉴别。