SK2和JPH2双基因重组真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

目的:构建SK2和JPH2双基因重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2,并检测其在转染后HEK293细胞中的表达。方法:以p CMV6-entry/SK2为模板,PCR扩增出SK2片段,通过BgⅢ/HindⅢ酶切位点克隆入真核表达载体p IRES-EGFP,将JPH2序列插入构建的SK2表达载体p IRES-EGFP-SK2,并通过酶切及测序鉴定。脂质体转染法将重组质粒p IRES-EGFP/SK2+JPH2转染HEK293细胞,采用Western blot法检测SK2通道蛋白和JPH2蛋白的表达。结果:构建的重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2经酶切和测序鉴定,证实插入的序列与Gen Bank中的SK2和JPH2基因序列完全相同。p IRES-EGFP/SK2+JPH2质粒转染HEK293细胞48 h后,SK2和JPH2蛋白均能成功表达。结论:成功构建了重组真核表达载体p IRES-EGFP/SK2+JPH2。

202例宫颈不典型上皮细胞病理分析

目的：分析阴道脱落细胞学结果为未明确诊断意义的不典型鳞状细胞（ASCUS）及不典型腺细胞（AGC）患者的组织学病理,为临床上治疗方法的选择提供依据。方法：对2000年11月-2006年7月就诊的202例阴道脱落细胞TBS分类检查结果为ASCUS（或AGC）的患者进行阴道镜检查并取活检。结果：196例ASCUS患者中,炎症72例,HPV感染71例,另有52例CIN未合并HPV感染。结论：阴道脱落细胞学结果为ASCUS的患者,其病理组织学检查范围广,应该在阴道镜下取活检明确诊断,宫颈管搔刮术结合阴道镜下取活检是被推荐作为AGC患者的进一步检查的方法。为临床治疗方法的选择提供合理的依据。

大鼠H9c2心肌细胞中SK2通道和JP2蛋白的表达及定位

目的:研究大鼠H9c2心肌细胞中SK2通道和JP2蛋白的表达及定位,探讨二者的相互作用。方法:采用Western blot检测SK2通道及JP2蛋白在H9c2细胞中的表达,免疫共沉淀鉴定JP2与SK2通道之间的相互作用,免疫荧光标记观察SK2通道和JP2蛋白在H9c2细胞的定位。结果:心肌细胞H9c2表达SK2通道及JP2蛋白,SK2通道和JP2蛋白可形成免疫复合物,SK2通道和JP2蛋白存在部分共定位。结论:心肌细胞H9c2中SK2通道与JP2蛋白存在相互作用。

灵与肉之争——裘德的弗洛伊德人格三重结构理论解读

托马斯·哈代在《无名的裘德》中塑造的悲剧人物裘德,敢于冲破传统道德观念和婚姻制度追求爱情,敢于挑战不公正的教育体制追寻学术理想。目前国内研究多从女性主义、生态自然观、伦理学等视角来分析文本和人物,本文从跨越文学和心理学的弗洛伊德三重人格结构理论视角,解读裘德人格三重结构的本我、自我、超我在现实中的冲突和变化下进行一场灵与肉的较量,最终由于人格结构失衡导致裘德由勇敢的挑战者沦为失败者。剖析裘德为迎合人们的道德标准和价值取向,既要成为现实的人,也要成为道德的人,最终只能压抑超我、迷失自我、放弃本我,选择死亡的成因。

由《午夜阳光》看文艺片青春元素的表达

文艺片属于电影的某一类型分支,是文学艺术影片的简称。文艺片中文学性和艺术性并存,这是其区别于商业电影的地方。对于文艺片来说,电影是第一艺术,其中集合了文字、图像与声音三种文学表现形式,所以文艺电影要求有很高的审美性。因此在保证电影艺术化表达的过程中,文艺片通常采用诸多不同类型电影表现形式,以此来丰富电影的创作内核。本文将以《午夜阳光》为例,对文艺电影作品中青春元素的表达进行系统性阐述。

茶文化视域下英美文学作品中的语言艺术

中国茶文化历史悠久,现如今世界文化的发展呈现出一种相互交融的态势,英美文化在世界文化领域占据着十分重要的位置,对于推动文化的发展与繁荣意义重大。而茶文化作为世界性的文化,我们对英美文学作品中蕴含的语言艺术进行赏析,将其与茶文化不断结合起来,在不同中寻找相同,不断探索文化的奥秘。

《丽塔·海华斯和肖申克的救赎》中哥特魅影的现实回归

美国通俗小说家斯蒂芬·金于1982年创作的中篇小说《丽塔·海华斯和肖申克的救赎》,是收于由四个故事组成的小说集《四季奇谭》里的首篇《春天永驻》中的故事。它既秉承了传统哥特小说的精髓,又创立了全新的现实哥特小说模式。斯蒂芬·金运用第一人称的叙事视角,从宗教主题、现实背景、哥特情节和冲突等方面,展现小说"回归现实"的基本特征。

湿度对铁皮石斛幼苗生长及光合作用的影响

为了探究湿度对铁皮石斛幼苗生长光合作用的影响，采用Li-6400便携式光合仪研究了2种湿度（80％以上和60％～70％）下不同温度和光照强度对铁皮石斛幼苗生长的影响。结果表明：当光照为240μmol／（m2·S）时，无论温度为25℃、20℃、15℃，铁皮石斛幼苗在湿度为80％以上时其光合速率值明显高于湿度为60％～70％的测量值；当温度为25℃，光照强度为360μmol／（m2·S）时，其在2种湿度条件下的光合速率变化并不明显；光照强度为120μmol／（m2·S）时，则表现为高湿度光合速率值明显比低湿度的大，且第二峰值也大。

不同温度和湿度条件下光照强度对铁皮石斛光合速率的影响

以铁皮石斛幼苗为试材,研究了在不同温度和湿度条件下光照强度对其光合速率日变化的影响。结果表明:在低温、低湿环境下,光照强度的变化对净光合速率的影响不是特别明显;在低温、高湿下,光合速率值随光照强度增加而增加;在高温、低湿下,光照强度越低其光合速率值反而越高,光照强度最强时其净光合速率值达到最低;当温度为20～25℃、湿度为80%以上、光照强度为240μmol.m-2.s-1时,铁皮石斛的净光合速率达到最大,为其生长的最佳条件。

人宫颈上皮内瘤变和浸润癌组织中树突状细胞及T细胞的免疫组织化学定量分析

目的研究人宫颈上皮内瘤变和浸润癌组织中树突状细胞和T细胞的数量、分布变化,为人宫颈癌的诊断和生物治疗提供实验依据。方法采用免疫组织化学和图像分析技术,测定人宫颈上皮内瘤变、宫颈浸润癌和正常宫颈组织中树突状细胞表型抗原CD1a、S-100及T细胞表面分化抗原CD3、CD8阳性细胞的数量、分布和表达强度。结果与人正常宫颈组织比较,宫颈上皮内瘤变中CD1+a、S-100+、CD3+、CD8+细胞数量增多(P<0.05),与组织分级呈正相关(P<0.05),抗体表达强度增高;宫颈浸润癌中4种抗体阳性细胞数量减少,与临床分期呈负相关(P<0.05),强度略有下降。结论人宫颈上皮癌前病变至浸润癌变过程中树突状细胞和T细胞数量及抗体表达强度发生变化,提示宫颈病变局部的免疫功能发生了改变。

慢性心衰大鼠心肌2型小电导-Ca^(2+)-激活K^+通道及Junctophilin 2表达的改变

目的:检测慢性心力衰竭模型大鼠心肌细胞膜2型小电导-Ca^(2+)-激活K^+(SK2)通道和Junctophilin 2(JP2)蛋白表达的变化,为人类心力衰竭机制的研究和针对性的治疗提供新思路。方法:10只健康成年SD大鼠随机分为假手术组(5只)和手术组(5只),手术组采用腹主动脉缩窄的方法制备慢性心衰模型,假手术组大鼠分离腹主动脉后不进行缩窄术。每周观察各组大鼠心电图的变化,称量大鼠的体重,之后杀死大鼠取心脏和肺称重,计算心脏重量指数和肺系数;提取心脏组织蛋白,用Western blot的方法检测心肌SK2通道和JP2蛋白的表达水平。结果:术后第8周,手术组大鼠心电图ST段抬高或T波高耸;并且与假手术组相比,手术组大鼠心脏重量指数和肺系数均显著增加;心肌组织SK2通道的表达显著增加,JP2表达下降(P均<0.05)。结论:慢性心衰模型大鼠心肌JP2蛋白表达减小,SK2通道表达增加。

液体悬浮培养诱导金钗石斛原球茎增殖的研究

以金钗石斛原球茎为实验材料,通过液体悬浮培养,研究金钗石斛原球茎的增殖和多糖成份积累进行了研究。结果表明:金钗石斛在B5培养基+1.0mg.L-1NAA,蔗糖浓度为3%,10%香蕉提取物上清液的液体培养基中增殖最佳,可溶性多糖成分累积相对较高。

温度对铁皮石斛幼苗生长期光合速率的影响

采用LI-6400光合仪对不同温度处理的铁皮石斛幼苗生长期的净光合速率进行测定。结果表明:在温度分别为25、20、15℃时,铁皮石斛的净光合速率均呈现出"双峰"曲线和光合"午休"现象;净光合速率峰值出现在09:00、15:00,且第1峰值远大于第2峰值;温度对铁皮石斛的净光合速率有明显的影响,在20℃时净光合速率最大,较有利于铁皮石斛的生长。

规模化猪场暴发塞内加谷病及SVV HN16株的分离鉴定

2016年3月,华南某猪场发生水疱性疾病。经实验室PCR诊断,排除FMDV后显示为SVV阳性。使用PK-15细胞进行病毒培养和传代,采用特异性的VP1基因引物扩增该片段,使用DNAMAN7.0和MEGA6.06软件进行同源性分析。结果表明,该病毒可以在细胞上成功繁殖,成功克隆了该病毒的VP1基因,序列长度为694 bp,并进行基因测序和遗传进化分析。序列同源性分析显示:该毒株与国内其他毒株亲缘关系较远,单独形成一个分支。表明该毒株为塞内加谷病毒的新成员,命名为SVV HN16。

铁皮石斛原胚体高效诱导、增殖及多糖含量累积的研究

本实验以铁皮石斛愈伤组织为研究材料。具体研究了不同的基本培养基、蔗糖浓度、香蕉提取物浓度及NAA浓度的变化等对铁皮石斛原球茎增殖及多糖含量累积的影响。研究结果表明:适中的无机盐浓度,NAA、适量椰子汁的浓度都有利于铁皮石斛愈伤组织的增殖生长;无机盐、NAA浓度的变化对多糖含量的累积变化不大,而椰子汁的浓度变化对多糖含量的变化影响较大。

沉默JP2基因对小鼠心肌细胞SK2通道的影响

目的:探讨心肌细胞JP2与SK2通道的相互作用。方法:构建靶向小鼠JP2基因的siRNA慢病毒载体(LV-JP2-RNAi-1、LV-JP2-RNAi-2),将其转染至小鼠心肌细胞,以转染空载体(LV-NC-EGFP)和未转染细胞(CtrlNC)作对照。采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测各组心肌细胞JP2 mRNA和SK2蛋白的表达。结果:转染48 h后,各组小鼠心肌细胞JP2 mRNA表达的差异有统计学意义(F=31.775,P<0.001),LV-JP2-RNAi-1、LV-JP2-RNAi-2组较Ctrl-NC及LV-NC-EGFP组细胞降低。小鼠心肌细胞感染LV-JP2-RNAi-2 72 h后,SK2通道蛋白表达被抑制。结论:沉默小鼠心肌细胞JP2基因可抑制SK2通道的功能。

基于精神分析批评视阈的英美文学教学模式探究

在经济全球化的时代背景下,中国各高校更重视英语的工具性。许多实用性强的专业和课程应运而生,而富于人文性的英美文学课程逐渐趋于边缘化,课程结构和教学模式面临严峻挑战。面对英美文学教材的晦涩、枯燥,教学方法陈旧、单一,教学设备落后等困境,本文采用一种新的研究范式,把精神分析批评理论植入英美文学教学实践,肃清英美文学教学过程中的问题和障碍,探索适合当前高校英美文学专业学生的教学模式,改变学生对英美文学课程的兴趣不浓厚的状态,突破教师难以实现对英美文学课程做到讲授全面透彻的窘况。

英美茶文化元素对英美文学作品创作的影响分析

茶文化起源于我国,随着文化的传播,我国茶文化开始传入到西方国家,随着茶文化在西方国家的发展,通过和当地文化的相互融合,进而形成了独特的英美茶文化体系。由此,本文就对英美茶文化体系进行了探讨,分析英美茶文化元素对英美文学作品创作的影响。