泽泻总三萜的抗炎活性研究

目的研究泽泻总三萜的体内、外抗炎活性。方法建立以脂多糖诱导的BV-2细胞炎症模型,采用ELISA法检测炎症因子IL-6的表达量,观察泽泻总三萜各剂量组的抗炎活性;建立以二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀、大鼠棉球肉芽肿2种炎症模型,以肿胀度为指标再评价泽泻总三萜各剂量组的抗炎活性。结果泽泻总三萜能有效抑制IL-6分泌,减轻小鼠耳廓肿胀及大鼠棉球肉芽肿胀程度。结论泽泻总三萜具有良好的抗炎作用。

泽泻三萜单体对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取活性的影响

目的观察泽泻三萜单体对3T3-L1细胞葡萄糖摄取活性的影响。方法用2-NBDG摄取测试法考察泽泻醇A、泽泻醇B、泽泻醇C、23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇C、泽泻醇L、16-羰基-泽泻醇A 8种泽泻单体对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响。结果泽泻醇A、泽泻醇C、23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇C、16-羰基-泽泻醇A表现出一定的促进3T3-L1细胞葡萄糖摄取作用。结论泽泻三萜单体具有促进葡萄糖摄取的活性,三萜类化合物是泽泻降血糖作用的药效物质基础。

泽泻滴丸的加速稳定性试验

目的对泽泻滴丸进行加速稳定性试验。方法按"新药稳定性试验"对滴丸剂质量稳定性考察的要求,对3批中试泽泻滴丸样品,在温度(40±2)℃、相对湿度(75±5)%的条件下,进行6个月的加速试验,考察其性状、鉴别、检查、含量、微生物限度的变化。结果各项指标符合新药加速试验的要求。结论泽泻滴丸的稳定性良好。

泽泻降糖活性提取物化学成分研究

目的研究泽泻Alisma orientalis根茎具降糖活性的提取物的化学成分。方法通过用泽泻水、醇提物干预高脂饮食诱导的小鼠胰岛素抵抗模型,从整体上观察泽泻提取物对小鼠糖耐量的影响,然后采用硅胶、ODS、制备液相等分离方法对具有降糖活性的醇提物进行分离,通过核磁共振和质谱等波谱数据鉴定化合物结构。结果对于高脂饲喂小鼠胰岛素抵抗模型,泽泻水、醇提物均可改善糖耐量。进一步从泽泻醇提物中分离得到16个化合物,分别鉴定为谷甾醇(1)、棕榈酸(2)、十七烷酸(3)、二十烷酸(4)、11-去氧泽泻醇B(5)、23-乙酰泽泻醇B(6)、23-乙酰泽泻醇C(7)、泽泻醇B(8)、24-乙酰泽泻醇A(9)、泽泻醇G(10)、24-乙酰泽泻醇F(11)、泽泻醇L(12)、泽泻醇C(13)、泽泻醇F(14)、泽泻醇A(15)、16-羰基-24-乙酰泽泻醇A(16);其中9种三萜类成分具有促进Hep G2细胞葡萄糖摄取活性。结论化合物3、4为首次从泽泻中分离得到,泽泻水、醇提物均可改善高脂诱导小鼠胰岛素抵抗,泽泻三萜类成分可能是其降糖药效物质基础之一。

泽泻提取物三萜类成分含量测定研究

目的：建立紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法测定泽泻提取物中三萜类成分含量。方法：采用紫外-可见分光光度法,以5%香草醛（用冰醋酸配制）-高氯酸显色,在555 nm波长处测定吸光度,计算泽泻提取物总三萜含量;应用高效液相色谱法同时测定泽泻提取物中12个三萜类成分,采用Ultimate XB-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,以乙腈-5%甲醇水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长208 nm。结果：紫外-可见分光光度法测定总三萜含量,以23-乙酰泽泻醇B计,质量浓度在5.9～15.6μg·mL^-1范围内与吸光度值呈良好线性关系（r=0.999 1）,平均加样回收率99.05%,RSD为2.3%;高效液相色谱法测定12个泽泻三萜类成分含量,在考察的浓度范围内,线性关系良好（r〉0.999 0）,回收率均在95.89%～99.33%范围内,RSD为2.0%～3.4%。泽泻提取物中12个三萜类成分的含量：泽泻醇A 5.71%～5.95%、泽泻醇B 3.47%～3.99%、泽泻醇C 2.53%～2.97%、泽泻醇G 3.07%～3.93%、泽泻醇L 3.65%～3.99%、23-乙酰泽泻醇A 2.39%～3.02%、23-乙酰泽泻醇B 10.56%～11.32%、23-乙酰泽泻醇C 9.44%～9.86%、16-羰基-23-乙酰泽泻醇A 0.63%～3.14%、16-羰基-24-乙酰泽泻醇A 1.08%～1.21%、11-去氧泽泻醇B 2.29%～2.85%、24-乙酰泽泻醇A 4.04%～5.02%。结论：经方法学验证,本文建立的紫外-可见分光光度法可以用于检测泽泻提取物中总三萜含量,高效液相色谱法可用于检测泽泻提取物中12个泽泻三萜类成分含量。

一测多评法测定泽泻中4种三萜类成分的含量

目的建立一测多评(QAMS)的泽泻多指标质量控制方法 ,并验证该方法在泽泻含量测定中应用的可行性和技术适应性。方法采用HPLC,以23-乙酰泽泻醇B为内参物,计算泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和泽泻醇B的相对校正因子,并利用该校正因子计算含量,同时与采用外标法测定4个三萜类成分的含量进行比较。结果建立的校正因子重现性良好,31批泽泻药材中4个三萜类的含量计算值与外标法实测值间(RSD≤3.52%)无显著差异。结论本实验所建立的一测多评法稳定、准确,可用于泽泻三萜类成分的质量控制。

UFLC同时测定泽泻中6种三萜类成分含量

目的：建立同时测定泽泻药材中23-乙酰泽泻醇C,泽泻醇A,24-乙酰泽泻醇A,泽泻醇G,泽泻醇B,23-乙酰泽泻醇B的UFLC含量分析方法.方法：采用Ultimate UFLC-AQ C18色谱柱（4.6 mm×100 mm,3μm）,流动相乙腈（A）-水（B）进行梯度洗脱,流速0.3 mL· min-1,二极管阵列检测器的检测波长为208,245 nm,柱温30℃.结果：23-乙酰泽泻醇C,泽泻醇A,24-乙酰泽泻醇A,泽泻醇G,泽泻醇B,23-乙酰泽泻醇B6个成分的线性范围分别为0.179 0～17.88（r=0.999 8）,0.500 0 ～100.0（r =0.999 7）,0.216 0～25.20 （r=0.999 6）,0.295 0～12.45 （r=1.000）,0.653 0～65.33（r=0.999 6）,0.393 0 ～ 78.32（r=0.999 8）mg·L-1;平均加样回收率分别为97.95％,96.70％,97.65％,96.01％,99.73％,100.3％.结论：建立的UFLC方法操作简便、快速、结果准确,适用于泽泻药材的质量控制.

HPLC-DAD-ELSD测定泽泻药材中4种三萜类成分含量

目的： 建立泽泻药材中23-乙酰泽泻醇C、泽泻醇A、泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇B 4个三萜类成分的HPLC-DAD-ELSD同时测定的定量分析方法。 方法： 采用Ultimate XB-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相乙腈-水（65：35），流速1.0 mL·min-1，二极管阵列检测器检测波长245 nm，蒸发光散射检测器的漂移管温度60 ℃，雾化器温度55 ℃，气体（氮气）压力20 psi，柱温30 ℃。 结果： 23-乙酰泽泻醇C、泽泻醇A、泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇B 4个成分的线性范围分别为1.869-29.90 mg·L-1（r=0.999 8），3.731-74.62 mg·L-1（r=0.999 7），8.653-138.4 mg·L-1（r=0.999 9），4.832-77.31 mg·L-1（r=0.999 5），平均加样回收率分别为98.78%（RSD 2.63%），98.05%（RSD 2.72%），98.26%（RSD 2.86%），97.65%（RSD 2.95%）。 结论： 建立的HPLC-DAD-ELSD定量分析方法简便、快捷、准确，可用于泽泻药材的多成分定量分析，为综合评价泽泻的质量提供一种新的技术手段。

泽泻总三萜提取纯化工艺的实验室试验及中试验证

以泽泻提取物中总三萜(1)和23-乙酰泽泻醇B(2)含量为评价指标;优化泽泻前处理、提取和纯化方法。所得最优工艺为:取过10目筛的泽泻粉末,用10倍量85%乙醇回流提取2次,每次1 h。所得提取液浓缩至每1 ml含0.5 g生药的溶液,取100 ml以2 BV/h(60 ml/h)的速度上D101大孔吸附树脂柱,上样完成后用水4 BV洗脱,再用6 BV 40%乙醇以4 BV/h的速度除杂,8 BV 80%乙醇以2 BV/h的流速富集1。实验室小试至50 kg规模的中试试验表明,该工艺稳定可行,所得提取物中1含量大于50%,得率约77%,2的含量约为8%。