JAZF1基因抑制对3T3-L1脂肪细胞糖、脂代谢的影响

目的探讨JAZF1基因抑制对3T3-L1脂肪细胞糖、脂代谢相关基因的影响。方法构建JAZF1小发夹RNA(shRNA)表达载体并转染3T3-L1细胞,实时荧光定量PCR(RT-QPCR)和蛋白印迹法检测JAZF1 mRNA和蛋白水平的表达;氢三放射示踪法检测3T3-L1细胞糖摄取率;蛋白印记法检测糖、脂代谢相关基因蛋白水平;油红O染色检测脂肪细胞甘油三酯(TG)含量变化。结果成功构建JAZF1-shRNA;转染脂肪细胞48 h后,JAZF1 mRNA和蛋白水平明显低于对照组(P<0.05);氢3放射性示踪法显示转染组葡萄糖摄取率明显降低(P<0.05);PPAR-γ蛋白表达升高(P<0.05),激素敏感脂肪酶(HSL)、内脏脂肪素(Visfatin)、胰岛素诱导基因-2(Insig-2)蛋白表达降低(均P<0.05);油红O染色显示JAZFl转染组细胞内脂质积聚明显,比对照组升高约25%(P<0.05)。结论 JAZF1基因抑制可减少基础糖转运,增加脂质与胆固醇合成,减少脂质分解并减少相关脂肪细胞因子的表达。

JAZF1过表达对糖异生及胰岛素信号通路的影响

目的:在课题组前期细胞研究结果的基础上构建锌指并列基因1(juxtaposed with another zinc finger gene 1,JAZF1)转基因动物模型并探讨JAZF1基因过表达对糖异生及胰岛素信号通路的影响。方法:将构建和制备的JAZF1基因片段,经显微注射到受精卵中,将受精卵移植入受体小鼠,产出后经鉴定和繁育得到较纯的JAZF1转基因小鼠。将8周龄转基因小鼠(Tg-JAZF1)和野生(wild type,WT)小鼠随机分为4组喂养:即普食(standard diet,SD)-WT组(n=6)、SD-Tg组(n=6)、高脂(high fat diet,HFD)-WT组(n=6)、HFD-Tg组(n=6)。各组小鼠喂养12周之后测定肝脏组织糖异生的关键基因葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G-6pase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)的m RNA和蛋白表达的变化。Western blot测定肝脏、肌肉、脂肪组织胰岛素信号通路蛋白磷酸化水平变化。结果:SD-Tg小鼠的m RNA和蛋白在肝脏、肌肉、脂肪组织中表达较SD-WT小鼠均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与WT小鼠比较,Tg-JAZF1小鼠肝脏PEPCK、G-6-Pase在SD喂养和HFD喂养条件下m RNA水平和蛋白表达水平均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);肝脏组织胰岛素信号通路蛋白磷酸化水平均增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:JAZF1转基因动物模型构建成功,JAZF1过表达能抑制肝脏糖异生关键基因表达,增加肝脏组织的胰岛素敏感性。

KLF14基因过表达对改善Hepa1-6小鼠肝癌细胞胰岛素抵抗的作用

目的探讨KLF14基因过表达对小鼠肝癌细胞Hepa1-6胰岛素抵抗的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-QPCR)检测KLF14基因m RNA在健康C57BL/6J小鼠各组织的表达分布情况;构建小鼠KLF14基因重组真核表达质粒p IRES2-EGFP-KLF14并转染Hepa1-6细胞,RT-PCR法检测KLF14基因m RNA的表达;Western印迹检测KLF14及p-AKT蛋白水平的表达。结果成功构建p IRES2-EGFP-KLF14质粒;转染肝癌细胞48 h后,KLF14 m RNA和蛋白水平明显高于对照组和空载组(P<0.01);转录水平上KLF14基因在小鼠体内普遍表达,其m RNA相对表达量由高到低依次为心脏、骨骼肌、肝脏、脂肪、小肠、肾脏、脑、肺、胃、脾、附睾;非转染组给予血清干预后,正常人血清处理组和糖尿病病人血清处理组无明显差异;而转染组给予血清干预后,糖尿病病人血清处理组p-AKT表达量较正常人血清处理组明显增加;在胰岛素刺激情况下,无论转染组或非转染组,给予PI3K抑制剂LY294002后,p-AKT表达受抑。结论 KLF14在C57BL/6J小鼠多种组织均有表达,提示其可能在维持正常生理功能中发挥一定作用;KLF14基因过表达可促进AKT的活化,并且其增加胰岛素敏感性的作用在糖尿病状态下较正常人更为明显。

痛泻要方合四逆散治疗腹泻型肠易激综合征疗效及安全性系统评价

目的 评价痛泻要方合四逆散治疗腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的有效性与安全性。方法 计算机检索PubMed,The Cochrane Library,Embase,Medline及中国知网(CNKI)、维普(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方(WanFang)数据库,检索时限为自建库起至2022年2月。收集痛泻要方合四逆散(试验组)对比化学药(对照组)治疗IBS-D的随机对照试验(RCT),提取数据,采用Cochrane推荐的偏倚风险评估工具和RevMan 5.3软件对纳入文献进行Meta分析。对纳入研究的痛泻要方合四逆散加减方中的药物按用药频次和药物功效进行分类,并统计使用频次。结果 共纳入10篇文献,涉及患者692例。Meta分析结果显示,试验组的总有效率[OR=3.88,95%CI(2.52,5.99),P <0.01],腹痛、腹胀、腹泻症状积分[MD=-0.27,95%CI(-0.33,-0.21),P <0.01],大便次数、大便性状、体倦乏力症状积分[MD=-0.21,95%CI(-0.32,-0.10),P <0.01]均显著优于对照组。痛泻要方合四逆散加减方中共括20味中药,使用频次较高的6味中药为柴胡、白芍、白术、防风、陈皮、甘草;按药物功效可分为8类,使用频率最高的为补虚药(34.67%),其次为理气药(25.33%)。结论 痛泻要方合四逆散治疗IBS-D的疗效良好,能显著改善患者的腹痛、腹胀、腹泻、大便次数增多、体倦乏力等症状。但其安全性需更多临床研究进一步验证。

早春辣椒留红—秋苦瓜高效种植模式

早春辣椒在江西省永丰县示范推广20多年，具有较好的经济效益。近年来，为使其种植效益进一步提升，我们通过生产实践发现，采用早春辣椒不采青椒而留红，而后轮作一季秋苦瓜，留红的辣椒上市早，秋苦瓜又错开了春夏苦瓜上市旺季，产量高效益好，取得了很好的经济效益和社会效益。

农业大棚技术在南方蔬菜种植中的改进和应用

南方地区降雨较多,4~9月气候高温高湿,季候风活动较为频繁。若直接采用北方温棚技术种植南方蔬菜,虽然可以避免蔬菜受到雨水冲刷,但是高温天气极容易使得大棚内气温上升,导致大棚蔬菜生产受到不良影响。

大健康产业背景下中药保健食品发展浅析

目的探讨大健康产业背景下中药保健食品的发展现状、应用优势、法律法规配套情况等。方法分析我国保健食品法律法规发展状况及中药保健食品开发应用近况,针对2014年至2019年获原国家食品药品监督管理总局(CFDA)批准的中药保健食品的种类、数量进行统计与分析,并对中药保健食品行业的合理发展提出建议。结果中药保健食品在大健康产业中一直占有较大的市场份额,整体趋势良好;增强免疫力、缓解体力疲劳的中药保健品市场占有率较高;改善睡眠、减肥、通便、改善记忆、缓解视疲劳、降血压、保护胃黏膜等中药保健品的开发力度亦呈上升趋势。结论大健康背景下,中药保健食品行业将面临更多机遇与挑战,建议加强"整体观"的应用,加强产品核心竞争力和功能评价体系研究,增强知识产权保护意识,促进中药保健食品产业更快、更好地发展。

永丰县水稻栽培管理存在问题及对策

为永丰县水稻生产提供参考,针对该县水稻生产实践中存在的用种量偏少、栽插密度低、购肥施肥不当、水分管控不合理、用药不科学、没有做到适期收获等问题,提出了增加用种量、合理密植、科学优化施肥、科学优化灌溉、适时用药、适时收获等对策。

水稻栽培技术措施对稻米品质的影响

文章分析了水稻栽培技术对稻米品质的影响,提出了提高稻米品质的措施,希望能够为我国水稻种植产业提供参考以及借鉴,保证水稻的产量以及质量,进而促进整个农业实现有效发展。

永丰藤蕹及其无公害高产栽培技术

永丰藤蕹又名水蕹，属农家优良地方品种，栽培历史悠久。其食用的嫩茎、叶是渡春淡和秋淡的主要绿叶蔬菜之一。具有采摘时间长、产量高、病害少、栽培管理简单等特点；食用方法多样，爽滑可口，深受生产者和消费者欢迎。永丰各地均有栽培，经济效益可观。也适应长江中下游及其以南地区种植。

JAZF1基因对3T3-L1脂肪细胞Akt和AMPK信号途径的影响

目的探讨JAZFl（juxtaposed with another zinc finger gene 1）基因对333一L1脂肪细胞蛋白激酶B（Akt）和AMP活化的蛋白激酶（AMPK）信号通路的影响。方法构建pGenesil—JAZFlshRNA重组质粒，转染3T3．L1脂肪细胞后分别用胰岛素或利拉鲁肽处理细胞。2．脱氧-^3H—D-葡萄糖掺入法检测细胞的葡萄糖摄取，Western印迹法检测各组细胞Akt和AMPK的磷酸化水平。结果成功构建的pGenesil-JAZFlshRNA重组载体转染333-L1脂肪细胞后下调JAZF1表达，使基础和胰岛素刺激的葡萄糖摄取降低33．6％和38．8％（均P〈0．05）。胰岛素或利拉鲁肽增加333-L1脂肪细胞Akt和AMPK磷酸化水平（均P〈0．05），JAZF1表达下调降低基础和2种激素刺激的Akt和AMPK活性（均P〈0．05）。结论JAZF1基因可能通过Akt和AMPK信号通路改善糖代谢。

成纤维细胞生长因子21表达下调对ApoE-/-小鼠肝糖异生相关基因及JAK2／STAT3信号转导通路的影响

目的探讨成纤维细胞生长冈子21（FGF-21）基因表达下调对ApoE基因敲除（ApoE-/-）小鼠肝脏糖异生相关基因表达的影响及其可能的分子机制。方法24只鼠龄8周的雄性ApoE。小鼠随机分为普食对照组（Nc组，n=6），普食＋pAd—shFGF-21组（NF组，n=6），高脂对照组（HC，n=6）和高脂＋pAd—swGF-21组（HF，n=6），各组小鼠均喂养16周。NC、HC组于15周末尾静脉注射Ad—shGFP空载腺病毒（浓度：1×^9／100μl／鼠），NF、HF组注射pad—shFGF-21重组腺病毒（浓度1×^9／100μl／鼠）。16周后取小鼠血浆和肝脏样本，测定空腹血糖、血浆胰岛素（Pins）和血脂水平；采用荧光定量PCR和Western印迹方法检测各组小鼠肝脏组织糖异生相关基因及JAK2／STA33信号通路mRNA和蛋白水平的变化。结果NF和HF组的空腹血糖、血浆胰岛素（Pins）、甘油三酯、总胆同醇及低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）水平均显著高于NC和HC组（P〈0．05或P〈O．01），而高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）水平显著下降（P〈0．05或P〈0．01）．．在普食与高脂饮食喂养条件下，FGF-21抑制组与相应对照组相比肝脏FGF-21mRNA水平分别降低76．6％和40．9％（均P〈0．05）；蛋白表达水平分别降低67．8％和49．6％（均P〈O．05）；B—klotho、FGFRI和FGFR3mRNA水平显著降低（均P〈O．05），糖异生相关基因葡萄糖-6-磷酸酶（G6pase）和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）mRNA和蛋白表达水平较对照组明显升高（P〈0．05），肝脏中SOCS3表达水平降低（P〈0．05）和磷酸化的STAT3、SOCS3蛋白表达量降低（P〈0．05）。结论FGF-21抑制ApoE。小鼠糖异生相关基因表达：其调控机制可能与JAK2／STAT3信号通路相关。

金属有机框架纳米酶在临床检测中的应用

酶作为天然的生物催化剂,在生物化学反应中发挥着重要的作用。由于天然酶受限其固有的缺点(稳定性低、成本高、储存困难等),具有催化活性的人工模拟酶应运而生。近年来,随着纳米材料迅速发展,仿酶催化纳米材料(纳米酶)逐渐受到研究者们的关注。纳米酶是一类具有类似天然酶活性的纳米材料,其制备过程简单、成本较低,有一定环境耐受性。然而大多数纳米酶类酶活性较低,稳定性相对较差,在生物分析应用中存在诸多困难。其中,金属有机框架(MOF)纳米酶具有高比表面积及孔隙率、活性位点均匀、较强的催化活性及稳定性等性质,且合成简单可控、成本低;此外,较天然酶而言,MOF纳米酶也以其独特的生物化学优势,在临床检测中发挥着巨大应用价值。本文主要基于MOF纳米酶的不同酶活性分类(过氧化物酶、氧化酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、水解酶),对其在核酸、蛋白质及小分子三大生物标志物在临床检测中的应用进行概述,并进一步展望了其在临床检测中面临的机遇与挑战,以推动MOF纳米酶的临床应用转化。

KLF14过表达促进肝细胞糖摄取的机制研究

目的观察Kruppel样因子14（KLFl4）基因过表达对肝细胞胰岛素信号通路以及AMP活化的蛋白激酶（AMPK）关键信号分子的影响，探讨KLFl4影响糖代谢的分子机制。方法建立KLFl4过表达的Hepal-6肝癌细胞模型，分为空载组、胰岛素组、KLFl4转染组和胰岛素＋KLFl4处理组，采用[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取法检测肝癌细胞对葡萄糖的摄取率。以Western印迹检测KLFl4过表达对胰岛素信号通路中各信号分子的磷酸化水平及磷酸烯醇式丙酮酸激酶（PEPCK）蛋白表达的影响。结果胰岛素处理Hepal-6细胞后，KLFl4转染组与未转染组相比，葡萄糖摄取率明显升高（P〈0．01）；胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底物（IRS）1、蛋白激酶B（Akt）、AMPK、CREB转录共激活因子2（TORC2）的磷酸化水平均明显增加（P〈0．01）；而且，糖原合成酶激酶3B的磷酸化水平亦明显增加，而PEPCK的蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论KLFl4过表达可能通过活化胰岛素InsR／IRS／Akt经典通路，从而改善肝细胞的胰岛素抵抗，且可能通过AMPK／TORC2／PEPcK信号通路抑制肝糖异生，并促进糖摄取和肝糖原的合成，从而改善糖代谢。

早稻施用生石灰的作用及方法

为提升耕地质量,实现化肥减量增效目的.近年来,江西省永丰县在早稻示范中推广了＂多施一斤石灰,增收一斤粮食＂的防酸化土壤改良技术,示范推广表明,早稻施用生石灰作用明显,增产效果较好.据该县瑶田、八江、七都等乡镇早稻测产结果,施用生石灰一般亩增产稻谷30~55 kg,增产4%~7.5%.