miR-361介导PI3K/Akt/Ca^(2+)通路对大鼠肥大细胞增殖情况及组胺与IL-4表达水平的影响

目的:探讨miR-361介导PI3K/AKt/Ca^(2+)通路对活化大鼠肥大细胞增殖情况及组胺与白细胞介素-4(IL-4)表达水平的影响。方法:将大鼠肥大细胞(RBL-2H3细胞)分为miR-361过表达组、miR-361抑制组、miR-361对照组和正常对照组,miR-361过表达组、miR-361抑制组、miR-361对照组细胞分别转染miR-361过表达、miR-361抑制及miR-361无义序列寡核苷酸片段,测定并比较各组细胞miR-361 mRNA、组胺、IL-4及PI3K/AKt/Ca^(2+)通路相关蛋白水平。结果:miR-361过表达组细胞miR-361 mRNA相对表达水平高于miR-361抑制组、miR-361对照组及正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CCK-8法检测结果显示,miR-361过表达组24、48、72 h细胞增值率均低于miR-361抑制组、miR-361对照组及正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测结果显示,miR-361过表达组细胞组胺和IL-4水平的表达水平低于miR-361抑制组、miR-361对照组及正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western印迹法检测结果显示,miR-361过表达组细胞p-AKT、AKT、p-PI3K、PI3K蛋白表达水平均高于miR-361抑制组、miR-361对照组及正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-361过表达可抑制大鼠肥大细胞的增殖,降低组胺与IL-4的表达水平,其作用机制可能与其能够提高PI3K/AKt/Ca^(2+)通路活性有关。

miR-361与慢性自发性荨麻疹患者血液炎症因子的相关性

目的探讨荨麻疹活动度评分及miR-361表达水平与慢性自发性荨麻疹患者血液中白细胞介素-4(IL-4)、免疫球蛋白E(IgE)和组胺(HIS)等炎症因子含量的相关性。方法选择2019年8月-2020年9月荨麻疹活动度评分大于3分的慢性自发性荨麻疹患者30例为观察组;选择同期健康体检者30例为对照组。两组均采用实时荧光PCR技术测定血清中miR-361 mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附试验测定两组血清中IL-4、IgE、干扰素-γ(IFN-γ)和HIS的含量;采用偏相关性分析观察组荨麻疹活动度评分及miR-361 mRNA表达水平与血液炎症因子含量的相关性。结果观察组miR-361 mRNA相对表达水平为9.83±2.40,对照组miR-361 mRNA相对表达水平为1.70±0.96,观察组miR-361 mRNA相对表达明显高于对照组,两组miR-361 mRNA相对表达差异有统计学意义(P<0.001)。观察组IL-4[(45.95±7.47)ng/L]、IgE[(156.70±28.49)IU/mL]、HIS[(8.75±2.46)nmol/L]水平均高于对照组[(14.25±4.39)ng/L、(38.80±7.00)IU/mL、(1.15±0.50)nmol/L](P<0.001);观察组IFN-γ[(25.86±9.26)ng/L]水平低于对照组[(66.89±7.04)ng/L](P<0.001)。偏相关性分析结果显示:观察组荨麻疹活动度评分与IgE(r=0.729)、HIS(r=0.537)含量呈正相关(P均<0.01);观察组miR-361 mRNA表达水平与IFN-γ含量呈负相关(r=-0.428,P<0.05);与IL-4(r=0.708)、IgE(r=0.628)、HIS(r=0.514)水平呈正相关(P<0.01)。结论慢性自发性荨麻疹患者血液中部分炎症因子水平与荨麻疹活动度评分存在相关性;miR-361在慢性自发性荨麻疹患者中表达升高,且与血液中炎症因子水平之间存在相关性,miR-361可能是慢性自发性荨麻疹潜在的生物标志物。