糖尿病肝脏病变中GLUTs和SIRTs表达水平的研究

目的:研究糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肝脏组织及高糖培养下的人肝细胞系LO2中葡萄糖转运体(glucose transporters,GLUTs)和沉默信息调节因子(silent information regulators,SIRTs/sirtuins)的表达情况。方法:(1)选取雄性SD大鼠20只,随机分为正常对照(normal control,NC)组和DM组。DM组大鼠禁食12 h后给予一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ;60 mg/kg)建立DM模型;NC组大鼠一次性腹腔注射等体积的柠檬酸缓冲液。每2周用血糖测试仪检测大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)和体质量。饲养12周后,1%戊巴比妥钠麻醉大鼠,取材,检测相关血液生化指标;计算肝脏指数;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和过碘酸-席夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色观察肝组织病理形态学变化;油红O染色检测肝组织脂质积聚情况;Western blot检测大鼠肝脏组织中GLUTs和SIRTs蛋白表达水平。(2)将LO2细胞在不同葡萄糖浓度中培养48 h后,用光镜观察LO2细胞形态;CCK-8法检测各组细胞活力;Western blot检测高浓度葡萄糖下细胞中GLUTs和SIRTs蛋白表达情况。结果:(1)与NC组相比,DM组大鼠精神萎靡,体质量明显下降,FBG显著升高,肝脏指数显著增加;HE染色显示,DM大鼠肝组织近中央静脉和血窦扩张充血,肝细胞轻度水肿,少量炎症细胞散在浸润;油红O染色显示,DM大鼠肝细胞内弥漫分散红色脂肪小滴;PAS染色显示,DM组大鼠中央静脉区肝细胞内有多量浅紫色圆形小滴弥漫分布于细胞浆内;Western blot结果显示,DM组GLUTs蛋白表达高于NC组,SIRTs蛋白表达低于NC组(P<0.01)。(2)在细胞水平,CCK-8实验结果显示,随着葡萄糖浓度的增加,LO2细胞的活力先增强后减弱:与25 mmol/L葡萄糖组比较,50 mmol/L葡萄糖组细胞活力增强(P<0.01),75、100和125 mmol/L葡萄糖组细胞活力无显著差异(均P>0.05),150、175和200 mmol/L葡萄糖组细胞活力显著减弱(均P<0.01),故后续以150 mmol/L为高糖干预条件。Western blot结果显示,在高糖干预下,细胞中GLUTs和SIRTs表达与动物实验结果一致。结论:高浓度葡萄糖能够造成SD大鼠肝脏损伤,减弱人肝细胞系LO2的活力,而且能够使大鼠肝脏组织和LO2细胞中GLUTs表达升高,SIRTs表达降低。因此,GLUTs和SIRTs家族成员有可能是糖尿病肝损伤的靶蛋白。

葡萄糖转运蛋白GLUT1/4和Sirtuins在糖尿病大鼠视网膜中的表达

目的 探讨葡萄糖转运蛋白GLUT1/4和Sirtuins在糖尿病大鼠视网膜中的表达。方法 取8周龄健康雄性SD大鼠20只随机分为正常对照组和糖尿病组,糖尿病组大鼠按照60 mg·kg^(-1)的剂量采用一次性腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型,正常对照组大鼠注射等量的溶剂。每隔2周检测大鼠体重和血糖。造模后12周,应用彩色多普勒超声检测大鼠视网膜中央动脉(CRA)血流参数;使用戊巴比妥钠麻醉大鼠后摘取眼球,采用HE染色观察大鼠视网膜组织的病理变化,免疫组织化学染色、Western blot和qRT-PCR分别检测大鼠视网膜中GLUT1/4和Sirtuins mRNA的表达情况。结果 造模后12周,与正常对照组相比,糖尿病组大鼠CRA的收缩期峰值流速和舒张末期流速均显著降低(均为P<0.001);阻力指数和搏动指数无明显改变(均为P>0.05)。造模后12周HE染色结果显示,正常对照组大鼠视网膜组织各层结构清晰,细胞排列紧密、规则,未发现明显的病理改变;糖尿病组大鼠视网膜组织厚度变薄,各层界限模糊,结构紊乱,细胞数量减少。造模后12周免疫组织化学染色结果显示,在大鼠视网膜中,GLUT1主要位于视网膜色素上皮层,GLUT4位于神经节细胞层、内丛状层及光感受器层;Western blot检测结果显示,糖尿病组大鼠视网膜中GLUT1及GLUT4蛋白相对表达量均低于正常对照组(均为P<0.05),糖尿病组大鼠视网膜中SIRT1-SIRT7蛋白相对表达量均低于正常对照组(均为P<0.05)。qRT-PCR检测结果显示,与正常对照组相比,糖尿病组大鼠视网膜中的SIRT1-SIRT7 mRNA相对表达量均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论 糖尿病可引起大鼠视网膜组织中GLUT1/4和Sirtuins的表达发生改变,GLUT1/4和Sirtuins可能参与了DR的发生与发展。

DON毒素和硒对软骨聚集蛋白聚糖硫酸化修饰的影响

目的研究大骨节病(Kashin-Beck disease,KBD)可疑致病因子脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和补硒对软骨细胞外基质聚集蛋白聚糖(aggrecan)硫酸化修饰的影响。方法应用体外单层培养C28/I2人软骨细胞,采用MTT法测定不同浓度DON和不同作用时间下的细胞增殖活性,通过Real-time PCR和Western-blot法分别检测加DON毒素或补硒后软骨细胞的aggrecan、PAPS合成酶2(PAPS synthetase 2,PAPSS2)、PAPS转运体1(PAPS transporter 1,PAPST1)、N-乙酰氨基半乳糖胺-4,6-硫酸转移酶[carbohydrate(N-acetylgalactosamine 4-sulfate 6-O)sulfotransferases 15,CHST15]以及芳基硫酸酯酶B(arylsulfatase B,ARSB)mRNA和蛋白的表达水平。结果 DON毒素可抑制C28/I2软骨细胞系的增殖活性,在DON毒素作用下aggrecan、PAPSS2、PAPST1和CHST15的mRNA和蛋白质表达水平降低,ARSB mRNA和蛋白质表达水平升高,加硒可在一定程度上改善这种状况。结论 DON毒素对软骨细胞的增殖有明显的抑制作用,细胞对毒素有一浓度和时间的依赖性;DON毒素可通过改变aggrecan硫酸化修饰相关酶类的表达水平影响软骨蛋白聚糖的硫酸化。

氟对骨形成和矿化的作用受遗传因素的影响

目的本实验以牙釉质对氟具有不同敏感性、近亲交配的3个小鼠品系(A/J:易感品系;SWR/J:中度易感品系;129P3/J:抗性品系)逐级增加氟剂量(0、25、50、100μg/L),证明对这些小鼠皮质骨及松质骨力学性能有不同影响。方法研究采用了微型计算机断层摄影、小连接体分析、静态组织形态测定、反向散射电子(BSE)成像、X射线粉末衍射等方法对3个品系小鼠骨的形成、骨的显微结构、矿化作用和显微硬度值等相关指标分别进行了测定。结果3个品系小鼠在最大氟剂量时其骨形成有显著增加;随F^-剂量增加,小鼠骨矿化程度无显著提高,只有SWR/J品系小鼠在50、100μg/L剂量时其椎体松质骨的矿化不均一程度明显降低;3个品系除129P3/J品系自身晶体较小外,随F^-剂量增加3者晶体的宽度都显著增加;F^-处理对三品系皮质骨和松质骨的显微硬度值无任何影响。结论氟作用对3品系骨微结构无显著影响,类骨质形成的增加和矿化不均一程度的降低都支持F^-离子延迟新骨矿化的理论;晶体宽度随F^-剂量的增加而增加的现象证实了早期的研究结果,并与大多数骨力学性能的降低相关;骨中F^-的增加可能影响了骨基质蛋白的性质,妨碍了骨晶体在微晶体面的生长抑制和有机-无机相界面间的结合;129P3/J抗性品系存在较强的有机-无机相界面,可能会降低微晶体的生长速率,故该品系自身骨晶体最小,受氟作用影响不显著。

论大学生艺术团的功能与建设

大学生艺术团是大学生文艺人才的精英组合,是大学校园文化的重要载体,在繁荣校园文化,发挥育人作用中具有多种功能。大学生艺术团以其特有的生机和活力,在校园文化建设中发挥着独特的、不可替代的作用,也在校内外各种文化艺术交流与演出中承担着重要任务。重视和加强大学生艺术团建设,更好地发挥其在校园文化和提高学生综合素质能力方面的作用,已势在必行。

论大学生艺术团的思想政治教育模式

大学生艺术团是高校大学生文艺人才的精英组合,艺术团的整体思想素质状况对全校学生具有直接的辐射和影响作用,大学生艺术团的思想政治教育急需成熟的工作模式。从干部队伍建设、日常训练熏陶、活动过程引导、理论教育点拔、自觉精神感染五个方面可以有效建设大学生艺术团的思想政治教育模式。

论大学生礼仪教育四要素

礼仪是人类文明的产物,是人们进行交往时的行为规范与准则,是一个人思想水平、文化修养、交际能力的外在表现,是精神文明的重要组成部分,是社会文明程度、道德风尚和生活习俗的反映。大学生礼仪教育现状需要深入有效开展礼仪教育。从培养礼仪情感、丰富礼仪知识、训练礼仪技能、维护礼仪环境四个要素方面来深入探讨大学生礼仪教育。

Rubric在“生物化学”思维导图笔记评价中的应用

“生物化学”是医学各专业的一门重要基础课程,具有涵盖内容庞杂、概念复杂抽象的特点,因此,一些学生对知识点的理解和记忆难度较大,容易产生畏难情绪。思维导图能够梳理知识体系,方便学生对知识点进行归纳,但是由于性质所限,思维导图并不能详细阐述知识点。Rubric作为形成性成绩评价工具,可以指导学生以思维导图为课堂笔记,对知识点进行自主整理,并进行互相评阅,应用客观数据及时反馈思维导图的应用效果。Rubric在学生思维导图笔记中的应用增加了学生之间的相互交流,促进了学生自主学习的能力,提高了教学效果。

思维导图在生物化学教学中的应用

以宁夏医科大学2020级临床医学专业2个班的本科生为研究对象,分为对照组和实验组。对照组采用传统教学模式,实验组采用思维导图教学模式(课前学生利用思维导图预习,课堂上教师利用思维导图讲解,课后学生用思维导图复习总结),教学后对两组学生的主观评价(调查问卷)及客观评价(期末考试成绩)进行统计学分析。实践表明,思维导图教学模式能收到良好的教学效果,值得在生物化学教学中推广和实施。

论师范性与中学教师继续教育培训

师范性是教师教育的特点与要求。中学继续教育培训中突出师范性,应从设置优化合理的课程体系,建设高素质高能力的师资队伍,创设良好的人文环境几个方面入手。

T-2毒素对软骨细胞整合素表达的影响及硒的拮抗作用

目的研究T-2毒素和硒对软骨细胞整合素mRNA表达的影响,探讨T-2毒素和硒与大骨节病发病的关系。方法体外单层培养C-28/I2软骨细胞,用MTT法测定细胞在不同浓度T-2毒素和不同作用时间下的增殖活性,通过Real-time PCR法检测软骨细胞在加T-2毒素或补硒后整合素α1、α2、α3、β1、β3、β5等10种亚基的表达情况。结果 T-2毒素可抑制C-28/I2软骨细胞系的增殖活性,在T-2毒素作用下软骨细胞系中整合素的表达谱有显著变化,其中显著上调的整合素亚基有αv和β1,下调的亚基有α2、α5和β5,加硒可在一定程度上拮抗这种改变。结论 T-2毒素对软骨细胞增殖有明显的抑制作用,而硒能通过拮抗整合素的表达而发挥对软骨细胞的保护作用。

NIV毒素对软骨细胞骨架蛋白的影响及硒的拮抗作用

目的利用C-28/12软骨细胞系进行体外单层培养,研究KBD可疑致病因子雪腐镰刀菌烯醇和硒对软骨细胞骨架蛋白中肌动蛋白和波形蛋白的影响。方法用Real-time PCR法检测细胞中肌动蛋白和波形蛋白mRNA的表达;用Western-blot方法检测细胞中肌动蛋白和波形蛋白蛋白的表达。结果①肌动蛋白在毒素组和毒素加硒组均表现为随着毒素浓度的升高mRNA的表达逐渐升高;毒素组肌动蛋白蛋白的表达量随着毒素浓度的升高而逐渐降低,毒素加硒组蛋白的表达量与相应的毒素组相比较,可显示出硒的拮抗作用。②波形蛋白PCR的结果:毒素组表现为随着毒素浓度的增加有下降的趋势,毒素加硒组表现为随着毒素浓度的增加有逐渐升高的趋势;波形蛋白Western-blot的结果:毒素组表现为随着毒素浓度的增加蛋白的表达逐渐下降,毒素加硒组表现为随着毒素浓度的增加有升高的趋势。结论 NTV毒素对肌动蛋白和波形蛋白mRNA和蛋白的表达有影响。

整合素-肌动蛋白信号转导通路与骨关节炎

骨关节炎(包括大骨节病)是一种慢性、进行性疾病,以关节软骨的退行性改变为特征。关节软骨的退行性改变主要表现为软骨细胞的变性坏死和细胞外基质平衡的破坏。细胞外基质-整合素-细胞骨架蛋白组成粘着斑,将软骨细胞和细胞外基质有机的连接起来,介导细胞内外的信号传导。而这其中整合素-肌动蛋白信号通路是重要的一条传导通路,整合素在软骨细胞表面的表达可以影响软骨细胞以及细胞外基质的代谢,介导软骨结构的完整性和功能的调控。

慢性镉中毒对小白鼠肾脏的损害

对１０３只慢性镉中毒小鼠的肾脏用光镜和电镜进行组织学观察。结果表明全肾组织细微结构均有程度不等的病理形态改变，受损部位以肾小体和近曲小管为主。受损程度可分轻重两型，并且与给镉量和给镉时间长短有关。

整合素与软骨功能间的关系

整合素是广泛分布在细胞表面的异源二聚体受体,介导细胞与细胞及细胞与胞外基质间的粘附,此外整合素还参与细胞间信号通路转导。整合素能够调节软骨细胞的多种功能,包括基质重组、机械刺激反应、细胞增殖分化和细胞存活等。软骨细胞可表达多种整合素,包括α5β1、α1β1、α2β1、α3β1、α6β1、α10β1、αvβ3和αvβ5等。这些整合素在维持细胞正常功能及软骨相关疾病中发挥着重要作用,本文就整合素与软骨功能之间的关系加以论述。

间充质干细胞应用于软骨组织工程的研究进展

外伤、软骨变性或老龄化均可引起骨关节炎,软骨细胞修复能力较差因而治疗效果很不理想,为此人们开创了许多新型治疗手段。软骨细胞已广泛应用于软骨组织工程,但考虑到提取软骨细胞引起的供点坏死、软骨细胞易去分化及细胞寿命有限等,因此有必要引入间充质干细胞(MSCs)。近20年来,间充质干细胞成为结缔组织工程和再生医学关注的焦点,已是优化软骨组织工程的细胞来源,如应用于自体软骨移植(ACT)中。再生医学中,复合新发展的可植入支架,作为靶细胞或运载细胞的间充质干细胞被认为是一种理想的细胞来源。至今,动物模型中MSCs在软骨修复中取得很好效果,也是自体软骨细胞的替代细胞源,这种全新的方法还在不断研究中,但要实现临床应用还需更多的可行性研究。

湖南科技大学学生社团创新性活动调研分析

学生社团活动是高校社团建设发展的重要表现形式,日益成为高校校园文化活动建设的主力军。近年来,高校学生社团活动蓬勃发展,然而学生社团活动的开展多以传统型为主,如何开展创新性学生社团活动还有待进一步拓宽思路。

中西医结合治疗小儿重症肺炎30例

小儿重症肺炎指肺炎合并心力衰竭、呼吸衰竭、中毒性脑病或肝肾功能严重异常等,即肺炎合并有1个以上脏器衰竭者。1988年来,我们收治重症肺炎患儿56例,应用中西医结合方法治疗30例,取得较好疗效,现报告如下。

学习型机关的理论与实现途径初探

学习,是人类社会认识自然和社会、不断完善和发展自我的必由之路."知识改变命运,学习创造未来".党的十六大报告提出,要"形成全民学习、终身学习的学习型社会,促进人的全面发展".

客观结构化考试在中医医学生中应用初探

应用客观结构化临床考试(OSCE)、引入标准化病人(SP)对2010届中医临床专业毕业生进行临床技能评估,围绕OSCE考核方法、过程、SP的应用特点、学生的考试成绩及工作建议作了较为全面的阐述和分析。文章认为,SP的应用具有不可替代的优点,OSCE对学生水平的评价具有公平性、可靠性。