梵净山保护区土壤放线菌分离及其次级代谢产物初步研究

为获得有开发潜力的放线菌活性菌株,利用GYM分离培养基对采自贵州省梵净山生态保护区采集土壤样品进行分离纯化与筛选,并采用菌块法测定了分离得到的178株放线菌对藤黄微球菌和枯草芽孢杆菌等测试菌的抗菌活性,同样培养条件小量发酵,发酵产物经乙醇抽提后进行活性复筛,并通过HPLC和质谱分析并与天然产物数据库比较分析。结果表明,分离得到的178株菌中,有41株菌对藤黄微球菌和枯草芽孢杆菌表现出不同程度的抗菌活性,其中3株菌有新的天然产物峰出现,其产物结构有待进一步解析。

赤水丹霞山土壤来源抗菌活性链霉菌的分离及放线菌素产生链霉菌Streptomyces sp.CSDX001发酵产物分析

分离、鉴定赤水丹霞地区土壤来源的抗临床耐药菌活性的链霉菌。采集赤水丹霞山区不同海拔的土样并利用多种培养基分离、纯化菌株。热酚法提取菌株基因组DNA,PCR扩增16S r RNA基因并测序后在线比对以确定其系统分类学地位。利用多种测试菌测试抗菌活性,通过HPLC和LC/MS分析菌株发酵抽提物并与数据库比较。分离得到菌株600株,其中59株链霉菌中有41株具有1种以上的抗测试菌活性。Streptomycetes sp.CSDX001具有抗耐药耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、抗耐万古霉素金黄色葡萄球菌、抗多药耐药鲍曼不动杆菌、抗枯草芽孢杆菌、抗藤黄微球菌、抗白色念球菌的活性,具有抗多种微生物的活性和产生多种新结构次级代谢产物潜力,可能是抗微生物新天然活性产物的重要来源。

赤水丹霞来源抗白色念珠菌放线菌分离及进化分析

目的分离、筛选抗白色念珠菌放线菌菌株,为开发微生物来源的抗白色念珠菌感染药物提供菌株资源。方法采集赤水丹霞山区土壤样品,利用不同的放线菌选择培养基分离、纯化单菌落。提取分离菌株基因组DNA,以细菌16S rRNA通用引物PCR扩增16S rRNA基因,产物测序并比对分析以确定分离菌株的分类地位。小量发酵产物进行抗白色念珠菌活性测试。结果筛选得到7株具有抗白色念珠菌活性的放线菌,其中6株为链霉菌,1株为地中海拟无枝酸菌。结论从赤水丹霞山区分离得到多株具有抗白色念珠菌活性的放线菌,可为开发微生物来源的抗白色链珠菌药物提供菌株来源。

贵州5种药用植物内生菌的分离及次级代谢产物研究

目的分离筛选具有抗菌活性及抗肿瘤活性的药用植物内生菌。方法采集贵州地道药用植物大黄、刺梨、杜仲、白芍和刺五加等5种组织材料,经表面消毒、无菌匀浆后,用改良的GYM培养基和TWYE培养基进行分离,利用耐药大肠杆菌、耐药金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌及白色链球菌等测试菌和稻瘟霉模型对分离菌株的发酵产物进行筛选,并通过HPLC对活性菌株发酵产物做进一步分析。结果分离得到植物内生菌180株,其中46株有不同程度的抗菌活性,占分离菌株总数的25.6%,58株菌有不同程度的抗稻瘟霉活性,占分离菌株总数的32.2%。结论 5种药用植物中内生菌种类极其丰富,且有活性的菌株所占比例较高,HPLC检测有新的紫外吸收峰,值得对其次级代谢产物进一步研究。可见贵州药用植物具有丰富的活性内生菌资源,有巨大的开发研究价值。