雷奈酸锶对抗地塞米松诱导大鼠骨质疏松的作用

目的研究雷奈酸锶对地塞米松诱导骨质疏松大鼠的作用。方法30只雌性SD大鼠采用随机数字表法分为5组:空白组,骨质疏松模型组,雷奈酸锶高、中、低剂量组。5周后进行骨形态学及血清指标检测,同时考察不同浓度雷奈酸锶对成骨细胞的体外增殖影响。结果较模型组(38.00±2.36)μm,雷奈酸锶中、高剂量组的平均骨小梁厚度(48.50±4.05)μm、(52.00±4.44)μm明显升高(P<0.05),较模型组(189.90±19.27)μm,雷奈酸锶中、高剂量组的骨小梁间距(154.26±13.86)μm、(150.02±20.86)μm明显降低(P<0.05),表明雷奈酸锶的干预能明显改善骨显微结构指标。雷奈酸锶组高剂量较模型组大鼠血清白介素?6(IL?6)、骨性特异性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP?5b)、Ⅰ型胶原C端肽(CTX?I)明显降低(P<0.05),骨钙素(OCN)、25羟基维生素D(25?HVD)明显升高(P<0.05)。体外实验表明雷奈酸锶可促进成骨细胞增殖。结论雷奈酸锶可促进成骨细胞增殖,改善骨形态及多项血清指标,对激素性骨质疏松有一定治疗作用。

阿托伐他汀联合葛根素对激素性股骨头缺血性坏死的作用机制研究

目的研究阿托伐他汀和葛根素对股骨头缺血性坏死大鼠的治疗作用及作用机制。方法50只SD大鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、阿托伐他汀组、葛根素组、联合用药组,每组10只。除空白组外,其余各组用脂多糖联合甲强龙建立大鼠激素性股骨头缺血性坏死模型。各组大鼠用对应药物灌胃给药,连续8周。酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)和转化生长因子β1(TGF-β1)的含量;苏木精-伊红(HE)染色观察病理变化及DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL法)观察细胞凋亡;实时荧光定量PCR(qPCR)检测核因子-κB受体活化因子(RANK)和核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)mRNA,并用蛋白质印迹法(Western Blot)检测骨保护蛋白(OPG)、RANK、RANKL和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)蛋白表达。结果空白组大鼠血清中ALP和TGF-β1含量分别为(25.23±1.24)IU/L和(47.12±2.41)ng/mL,而模型组大鼠血清中ALP含量升高,TGF-β1含量降低,分别为(31.86±1.23)IU/L和(37.74±2.68)ng/mL;与模型组相比,联合用药组能够降低ALP和升高TGF-β1含量(P<0.01),分别为(26.96±1.54)IU/L和(44.12±2.42)ng/mL;HE染色结果显示模型组大鼠股骨头组织被破坏,血管减少;联合用药组的软骨细胞排列整齐,骨髓腔内有大量造血细胞,脂肪细胞分布均匀。RT-PCR和蛋白质印迹法结果显示模型组OPG、RANK、RANKL和TRAF-6表达量升高。与模型组相比,联合用药组能提高OPG、RANK和降低RANKL、TRAF-6表达量(P<0.05)。结论阿托伐他汀联合葛根素可有效治疗激素性股骨头缺血性坏死,作用机制可能与OPG/RANKL/RANK信号通路有关。

葛根素联合阿托伐他汀用药对激素性股骨头缺血性坏死Hedgehog信号通路的影响

目的研究葛根素联合阿托伐他汀对股骨头缺血性坏死Hedgehog信号通路的影响。方法将50只SD大鼠随机分为5组,即空白对照组(Ⅰ)、模型组(Ⅱ)、阿托伐他汀组(Ⅲ)、葛根素组(Ⅳ)、联合用药组(Ⅴ),每组10只,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组均利用LPS联合甲强龙造大鼠激素性股骨头缺血性坏死模型,造模的同时Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组分别灌胃阿托伐他汀、葛根素、联合用药治疗,1次/d,连续8周后处死,采样待检。HE染色考察大鼠股骨头坏死情况;ELISA检测血清BGP、OPN、TGF-β1含量;RT-PCR检测股骨头组织Bcl-2、Osx、Runx2mRNA表达量;WB检测股骨头组织VEGF、p53蛋白含量;免疫组化检测股骨头组织Smo、Gli蛋白含量;TUNNEL检测细胞凋亡。结果较单一用药,联合用药组可明显提高血清BGP、TGF-β1含量、股骨头组织Osx、Runx2mRNA表达及VEGF、p53蛋白含量(P<0.05),明显降低血清OPN含量、股骨头组织Bcl-2mRNA表达及Smo、Gli蛋白含量(P<0.01),改善股骨头坏死及细胞凋亡情况。结论葛根素联合阿托伐他汀能够通过影响Hedgehog信号通路,减轻股骨头的坏死程度。

葛根素联合阿托伐他汀对激素性股骨头缺血性坏死COX-2/PGE2/cAMP信号通路的影响

目的研究葛根素联合阿托伐他汀对股骨头坏死COX-2/PGE2/cAMP信号通路的影响。方法50只SD大鼠按随机数字表,随机分为空白对照组(A)、模型组(B)、阿托伐他汀组(C)、葛根素组(D)、联合用药组(E)。每组10只,A组不做处理,其余4组均利用LPS联合甲泼尼龙造大鼠激素性股骨头坏死模型,造模的同时C、D、E组分别灌胃阿托伐他汀、葛根素、联合用药治疗,每天1次,连续8周后处死,采样待检。ELISA检测血清PGE2、TXB2、TGF-β1含量;RT-PCR检测股骨头组织BMP-2、COX-2、TGF-β1、VEGF mRNA表达;免疫组化检测股骨头组织cAMP、PGE2蛋白含量;HE染色考察大鼠股骨头坏死情况;TUNNEL检测细胞凋亡。结果联合用药较单一用药明显提高血清TGF-β1含量、股骨头组织BMP-2、TGF-β1、VEGF mRNA表达(P<0.01),明显降低血清PGE2、TXB2含量以及股骨头组织COX-2 mRNA表达及cAMP、PGE2蛋白含量(P<0.05,P<0.01),改善股骨头坏死及降低股骨头细胞凋亡指数。结论葛根素联合阿托伐他汀可通过有效抑制COX-2/PGE2/cAMP信号通路,减轻股骨头的坏死程度。

曲古霉素通过自噬途径对K7M2 wt细胞凋亡的影响

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素(TSA)对小鼠骨肉瘤K7M2wt细胞增殖的抑制作用,并从凋亡和自噬途径探究其作用机制。方法CCK-8法检测TSA对K7M2wt细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测K7M2wt细胞凋亡率;Western blot检测TSA对K7M2wt细胞凋亡和自噬相关蛋白表达的影响;用自噬抑制剂研究自噬对细胞凋亡的影响。结果CCK-8结果显示TSA对K7M2wt细胞增殖有显著抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;FCM结果显示TSA能够诱导K7M2wt细胞凋亡;Western blot结果显示TSA能够上调促凋亡蛋白caspase-3和Bax表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达;同时上调自噬标志蛋白Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达;自噬抑制剂能够增加TSA对K7M2wt细胞的凋亡作用。结论自噬参与了TSA诱导K7M2wt细胞凋亡的过程,且在该过程中对细胞起到保护作用。