肾舒复健汤对慢性肾衰竭大鼠PTEN/PI3K/AKT信号通路的影响

目的 基于网络药理学结合动物体内实验探讨肾舒复健汤(黄芪、白术、生地黄等)治疗慢性肾衰竭(CRF)的作用机制。方法 (1)通过TCMSP数据库检索并筛选肾舒复健汤的活性成分,通过Swiss数据库筛选其潜在作用靶点;通过DisGeNET、GeneCards数据库检索CRF疾病相关靶点;通过Venn平台对活性成分潜在作用靶点与CRF疾病相关靶点取交集,获得肾舒复健汤治疗CRF的关键靶点(共同靶点);采用Cytoscape3.7.2软件构建肾舒复健汤治疗CRF的“活性成分-关键靶点”网络,分析核心活性成分;将共同靶点导入STRING数据库,构建蛋白互作(PPI)网络,筛选核心靶点;将共同靶点导入DAVID数据库进行GO功能及KEGG通路富集分析。(2)将大鼠随机分为正常组、模型组、尿毒清组(5 g·kg^(-1))、肾舒复健汤组(11 g·kg^(-1)),每组8只;采用饲喂0.5%腺嘌呤饲料以建立CRF大鼠模型,连续造模21 d;模型复制成功后开始灌胃给药,每日1次,持续干预28 d。检测大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白(24 h U-pro)水平;采用HE染色法及MASSON染色法检测大鼠肾脏组织病理变化,计算胶原容积分数(CVF);免疫组化法检测肾脏组织中PTEN、PI3K、p-AKT蛋白表达。结果 (1)网络药理学预测得到肾舒复健汤治疗CRF的活性成分140个,关键靶点(共同靶点)199个,核心活性化合物包括金合欢素、木犀草素、槲皮素等;核心靶点包括蛋白激酶B(AKT1)、肿瘤蛋白53(TP53)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)等;GO功能主要与缺氧反应、血管生成正向调节、蛋白质磷酸化正调节等生物过程相关;关键通路主要涉及癌症途径、PI3K/AKT信号通路、Ras信号通路等;调控PTEN/PI3K/AKT信号通路可能是肾舒复健汤治疗CRF的重要作用机制之一。(2)体内试验显示,与正常组比较,模型组大鼠的血清SCr、BUN及24 h U-pro水平显著升高(P<0.01);肾脏组织病理改变明显,可见大量蓝色胶原纤维沉积,CFV明显升高(P<0.01);大鼠肾组织中PTEN蛋白表达水平显著降低(P<0.01),PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠的血清SCr、BUN及24 h U-pro水平显著降低(P<0.05,P<0.01);肾脏组织病理损伤明显减轻,纤维沉积面积明显减少,CFV明显降低(P<0.05,P<0.01);大鼠肾组织中的PTEN蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),PI3K、p-AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 肾舒复健汤能够明显改善CRF大鼠的肾功能,有效改善肾脏组织病理损伤及纤维化,可能与其调节PTEN/PI3K/AKT信号通路密切相关。

对妇幼卫生统计报表质量进行量化队列管理

本文采用模糊数学方法,提出对妇幼卫生统计报表质量进行量化队列管理,实践证明这种方法效果可靠,有利于提高妇幼卫生信息统计工作水平。

三七总皂苷对慢性肾衰竭大鼠AngⅡ/AT1R/ERK1/2信号通路的影响

目的研究三七总皂苷(PNS)对腺嘌呤诱导的慢性肾衰竭(CRF)大鼠AngⅡ/AT1R/ERK1/2信号通路的影响,探讨其延缓慢性肾衰竭进展的作用机制。方法将65只雄性SD大鼠随机分为正常组10只、造模组55只,正常组常规饲养,造模组采用250 mg·kg^(-1)·d^(-1)腺嘌呤混悬液连续灌胃28 d复制CRF大鼠模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、贝那普利组(10 mg·kg^(-1))及PNS低、中、高(40、80、160 mg·kg^(-1))剂量组,灌胃给药,每日1次,连续28 d。检测大鼠24 h尿蛋白(24 h U-pro)及血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)的含量;采用HE染色法观察肾组织病理形态,Masson染色法观察肾间质纤维化程度;采用ELISA法检测血清及肾组织匀浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血清中胱抑素C(Cys-C)的含量;采用Western Blot法分析肾组织中血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型(AT1R)、细胞外调节激酶(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达情况;Real-time PCR法检测肾组织中AngⅡ、AT1R、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达;免疫组化法检测肾组织中AT1R蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠的24 h U-pro、Scr、BUN、Cys-C水平显著升高(P<0.01),血清、肾组织匀浆中的AngⅡ含量明显增加(P<0.01),肾组织中的AngⅡ、AT1R、CTGF mRNA表达均明显上调(P<0.01),AT1R、p-ERK1/2蛋白表达均明显上调(P<0.01)。与模型组比较,给药组大鼠的Scr、BUN、24 h U-pro及Cys-C水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),血清、肾组织中的AngⅡ含量均明显降低(P<0.05,P<0.01),肾组织中的AngⅡ、AT1R、CTGF mRNA表达均明显下调(P<0.05,P<0.01),AT1R、p-ERK1/2蛋白表达均明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论三七总皂苷可改善CRF模型大鼠的肾功能和肾脏的病理学改变,其机制可能与调控AngⅡ/AT1R/ERK1/2信号通路有关。

复肾功方对慢性肾衰竭大鼠Klotho蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨复肾功方(Fushengong decoction,FSGD)对慢性肾衰竭(Chronic renal failure,CRF)大鼠Klotho蛋白及mRNA表达的影响。方法将55只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组及复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。采用腺嘌呤含量为0.5%的饲料建立CRF模型,连续喂养21 d。模型复制成功后,所有大鼠改用常规饲料喂养;复肾功方低、中、高剂量组按照体质量分别以含生药4、8、16 g·kg^-1的复肾功方水煎剂灌胃给药,正常组及模型组给予同体积生理盐水,给药体积20 mL·kg^-1·d^-1,每日1次,连续灌胃给药30 d。实验结束后,取各组大鼠血清检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的含量;HE染色法检测大鼠肾脏组织的病理形态学变化;采用Western Blot法和免疫组化法检测肾脏组织Klotho蛋白的表达;Real-time PCR法检测肾脏组织Klotho mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清SCr、BUN的含量均显著升高(P<0.01),肾脏组织病理损害明显,肾脏Klotho蛋白及mRNA的表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,复肾功方各剂量组大鼠的肾脏组织病理损害明显减轻,血清SCr、BUN含量显著降低(P<0.05,P<0.01),大鼠肾脏组织Klotho蛋白及mRNA的表达明显升高(P<0.05)。结论复肾功方能够降低CRF大鼠血清SCr、BUN的含量,减轻肾损伤,可能与上调肾脏组织的Klotho蛋白及mRNA的表达有关。

6m焦炉基础结构抗震设计探讨

目前．我国正在运行的焦炉已有1000多座．由于工艺生产的要求，焦炉一般建于钢筋混凝土构架基础之上，蓄热室、燃烧室、炭化室及入炉煤均可认为是均布荷载，总计可达210kPa，正常生产传给焦炉基础顶板的温度达100℃左右。顶板下表面温度达60℃左右，钢筋砼框架的温度变形及抗震问题一直受到关注。

人口性别与年龄的分析——对大庆市第四次人口普查资料的分析

性别与年龄是刻画人口结构的最重要标志之一,而且是构造其他人口参数的基础,是反映一个社会人口特征的最基本指标,是对社会实行科学管理,如:编制国民经济计划,劳动、文教、妇幼卫生保健计划,制定人口政策等的基本依据。 分析一个社会人口的性别与年龄构成是对人口资料的最基本分析。现以大庆市(包括萨尔图区、龙凤区、

财政部门预算编制及管理中的资金风险探究

在财政部门管理工作中,预算编制和管理的有效开展,能够提高政府工作效率,体现我国的预算能力。我国的财政预算编制主要有各级财政部门、各级政府及其所属行政事业单位和各级人大三个主体。在财政部门预算和管理的过程中,财政资金的流向以及资金风险等为应当受到重视,采取有效的防控措施。文章中阐述财政部门预算编制的内容,探究管理中存在的风险,提高财政部门的预算能力。

小学语文教学中的情感教育的实施研究

开展小学语文教学活动,融入情感教育,能够增强教学活力.从教学实践效果来看,为促使小学语文教学改革的落实,以情感教育为着力点,运用情感教学法,对优化小学语文课堂教学,有着积极的作用,值得推广应用.

一个不可忽视的现实——人口分布与医疗机构、床位、人员之间的差异

从合理利用卫生资源,为大庆市居民的健康提供优质服务,根据大庆市人口分布,剖析医疗机构、床位、人员分布的纵横关系,反映现状,究其差异,为科学管理和决策提供依据。 现状与分析 医疗机构、床位的设置为居民健康提供了条件,而人口的分布以及人群的社会经济心理、地理条件、人口特征、医疗制度等,对医疗机构的服务效应具有重要影响。

7.63m焦炉熄焦车轨道地基加固与研究

山东兖矿国际焦化有限公司1#、2#焦炉是我国第1次引进的炭化室高7．63m焦炉，熄焦车整套设备从德国拆迁购来。1#、2#焦炉熄焦车轨道基础2004年开工建设，2006年建成投产．至2011年1月焦炉大修，2#焦炉至熄焦塔区段（总长162．7m）熄焦车轨道产生严重地基不均匀沉降现象．并且随着时间的增长，沉降量逐渐增大．最大处达270mm，导致熄焦车轨道无法正常运行。

水蛭、三七及其配伍对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化作用机制比较

目的:观察水蛭-三七单味药与药对改善慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾脏病理形态及对蛋白磷酸酶2A(PP2A)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:将55只雄性SD大鼠随机分为正常组11只、造模组44只。正常组常规饲养,造模组进行0.25 g·kg^(-1)·d^(-1)腺嘌呤连续灌胃28 d复制CRF模型。将造模成功后的大鼠随机分为模型组、水蛭组(3 g·kg^(-1)·d^(-1))、三七组(3 g·kg^(-1)·d^(-1))与水蛭-三七组(3 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组9只,正常组和模型组以等体积生理盐水灌胃,连续30 d。实验结束后,测定各组大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)含量;苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色和电镜观察肾脏病理形态学改变;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织PP2A、AMPK、mTOR mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织PP2A、AMPK、磷酸化(p)-AMPK、mTOR、p-mTOR蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾脏病理结构变化明显,血清SCr、BUN含量明显升高,肾组织PP2A mRNA表达增加,PP2A蛋白表达和p-mTOR/mTOR均明显升高,p-AMPK/AMPK明显降低(P<0.05);与模型组比较,药物干预治疗后各组大鼠肾脏病理形态学明显改善,血清中SCr、BUN含量均明显降低,肾组织PP2A mRNA表达下降,PP2A蛋白表达和p-mTOR/mTOR均明显降低,p-AMPK/AMPK明显升高(P<0.05),水蛭-三七组效果更为明显。正常组、模型组及治疗各组肾组织AMPK、mTOR mRNA表达差异未见统计学意义。结论:水蛭-三七对改善CRF大鼠肾纤维化的疗效明显优于单味药,其对CRF大鼠肾纤维化的改善可能与调节PP2A/AMPK/mTOR信号通路有关。

复肾功方对慢性肾衰竭大鼠Wnt/β-catenin信号途径的影响

目的:观察复肾功方对慢性肾衰竭(CRF)大鼠分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号途径的影响,探讨其减少细胞外基质(ECM)的沉积,抗肾小管间质纤维化(TIF)及延缓CRF进展的作用机制。方法:将55只雄性SD大鼠随机将分为正常组,模型组,复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。正常组常规饲养,其余4组大鼠则用腺嘌呤含量为0.5%的饲料建立CRF模型,连续喂养21 d。造模成功后所有大鼠改用常规饲料,正常组和模型组大鼠给予20 mL·kg^-1生理盐水灌胃;复肾功方低、中、高剂量组大鼠则按体质量分别灌胃4,8,16 g·kg^-1复肾功方水煎剂,1次/d,连续灌胃30 d。实验结束后,马松(Masson)染色观察大鼠肾组织病理形态学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织Wnt4,β-catenin mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织Wnt4,β-catenin,基质金属蛋白酶-7(MMP-7)蛋白的表达,免疫组化检测肾组织Wnt4,β-catenin蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾小管间质纤维化明显增多,肾组织Wnt4,β-catenin mRNA及Wnt4,β-catenin,MMP-7蛋白的表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,复肾功方各组大鼠肾组织Wnt4,β-catenin mRNA及Wnt4,β-catenin,MMP-7蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论:复肾功方减少ECM的沉积、抗肾小管间质纤维化、延缓CRF进展可能与抑制Wnt/β-catenin信号途径的激活有关。

复肾功方对慢性肾衰竭大鼠p38 MAPK信号通路的影响

目的:观察复肾功方对慢性肾衰竭(CRF)大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的影响,探讨其减轻肾组织炎症反应及延缓肾间质纤维化发展的作用机制。方法:将55只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。正常组常规饲养,其余4组大鼠食用含0.5%腺嘌呤饲料制造CRF模型,连续造模21 d。造模成功后,所有大鼠改用常规饲料。正常组和模型组灌胃生理盐水20 mL·kg^-1,复肾功方低、中、高剂量组分别以4,8,16 g·kg^-1灌胃水煎剂,每日1次,连续30 d。实验结束后,Masson染色观察肾间质纤维化程度,免疫组化检测肾脏单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾脏磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)及转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾间质胶原沉积明显增多,肾脏组织MCP-1平均光密度值和p-p38 MAPK,TGF-β1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与模型组比较,复肾功方各剂量组肾间质胶原沉积明显减少,肾脏MCP-1平均光密度值及p-p38 MAPK,TGF-β1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:复肾功方能有效抑制CRF大鼠肾脏组织相关炎症因子表达,从而减轻肾组织炎症反应,延缓肾间质纤维化的发展,其机制可能与抑制p38 MAPK信号通路的激活有关。

复肾功方对慢性肾衰竭大鼠ACE-AngⅡ-AT1R及ACE2-Ang(1-7)-MASR轴“调控-拮抗”作用的影响

目的:研究复肾功方对腺嘌呤诱导的慢性肾衰竭(CRF)大鼠血管紧张素转化酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体(ACE-AngⅡ-AT1R)轴与血管紧张素转化酶2-血管紧张素(1-7)-Mas受体[ACE2-Ang(1-7)-MASR]轴的"调控-拮抗"作用,探讨其延缓CRF进展的作用机制。方法:将65只雄性SD大鼠随机分为正常组10只、造模组55只,正常组常规饲养,造模组进行为期28 d的0.25 g·kg^(-1)d-1腺嘌呤混悬液灌胃。模型建立后,将存活造模大鼠随机分为模型组,贝那普利组(0.01 g·kg^(-1)·d^(-1)),复肾功方低、中、高剂量(4,8,16 g·kg^(-1)·d^(-1))组,正常组和模型组以等体积生理盐水灌胃,持续28 d。实验结束后,测量各组大鼠尾静脉舒张压(SBP),收缩压(DBP),并收集24 h尿液以测定24 h尿蛋白(24 h U-pro);测定血清中肌酐(SCr),尿素氮(BUN)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织形态;马松(Masson)染色观察肾间质纤维化程度;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清和肾组织匀浆中AngⅡ,Ang(1-7)及血清中胱抑素C(CysC)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织中ACE,ACE2,AT1R,MASR蛋白表达水平;免疫组化标记肾组织中ACE,ACE2蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清SCr,BUN,CysC明显上升(P<0.05),血清与肾组织中的AngⅡ含量明显增加,Ang(1-7)含量明显减少(P<0.05),肾组织中ACE,AT1R蛋白表达量明显升高(P<0.05),ACE2,MASR蛋白表达量明显降低(P<0.05);与模型组、贝那普利组比较,经复肾功方干预治疗后,大鼠血清SCr,BUN,CysC含量明显下降(P<0.05),血清与肾组织中的AngⅡ含量显著减少,Ang(1-7)含量明显增加(P<0.05),肾组织中ACE,AT1R蛋白表达量显著降低,ACE2,MASR蛋白表达量明显升高(P<0.05),其中复肾功方高剂量效果最佳,复肾功方高、中、低剂量的效果呈剂量相关性。结论:复肾功方可改善腺嘌呤所致CRF大鼠肾功能和肾脏的病理学改变,其机制可能与通过抑制ACE-AngⅡ-AT1R轴,同时促进ACE2-Ang(1-7)-MASR轴来延缓CRF的进展有关。