大鼠同种异体骨髓移植慢性移植物抗宿主疾病模型的建立

目的:探讨同种大鼠骨髓移植建立慢性移植物抗宿主疾病模型的可行性,旨在为骨髓间质干细胞对同种异体骨髓移植后移植物抗宿主疾病免疫调节作用的系列研究提供前提条件。方法:实验于2006-04/2006-09在中山大学基础医学院病理学与病理生理实验室完成。①选取清洁级6周龄雄性体Fischer344大鼠(RT1Al)作为供体,清洁级6周龄雌性Waster(RT1Au)大鼠作为受体。②受体大鼠移植前3d开始饮用含庆大霉素(320mg/L)和红霉素(250mg/L)的饮用水。移植当天采用60Coγ射线全身照射法进行预处理,照射剂量为8.0Gy,剂量率为0.7Gy/min。经预处理的受体鼠在照射后6h内,经尾静脉进行骨髓移植,并分组:骨髓移植组(n=10,每只大鼠移植0.8×108个骨髓细胞)、单纯照射组(n=10,预处理后通过尾静脉注射等量的磷酸缓冲液)。观察移植后大鼠的活动、饮食、二便、皮毛、体质量变化情况及靶器官皮肤、肝脏、肠的组织学病理改变。结果:①单纯照射组10只大鼠在预处理后的17d内全部死亡,死亡高峰集中在移植后11和12d左右。骨髓移植组有较高的存活率,除第12,16,18天死亡3只,其余均在60d的观察期内存活。②骨髓移植组大鼠未出现急剧消瘦和严重腹泻等急性移植物抗宿主疾病表现,移植受体体质量增加缓慢,移植后1月受体头背部可见明显脱毛现象,随着时间延长,范围逐渐扩大至腹部和肢体内侧。移植后2个月皮肤可见毛囊缺失和轻度单核细胞浸润,小肠固有层可有中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞浸润,肝脏的表现最为典型,80%以上的汇管区淋巴细胞浸润,胆管细胞坏死并伴有胆管壁纤维化。结论:①通过大鼠F344→Wistar的同种骨髓移植,可建立稳定的慢性移植物抗宿主疾病模型。②模型的病理变化可表现在皮肤、肠道和肝脏,其中肝脏的表现尤其典型,80%以上的汇管区和胆管淋巴细胞浸润,胆管细胞坏死并伴有胆管壁纤维化。

T-bet基因在头颈部鳞癌患者淋巴结中的表达特征及意义

目的了解T-bet基因在头颈部鳞癌患者颈淋巴结中的表达特征和意义。方法取喉癌、舌癌和下咽癌患者颈清扫新鲜和石蜡包埋的淋巴结标本分别用逆转录聚合酶链反应和免疫组化检测T-bet RNA和蛋白水平的表达。结果在鳞癌患者阳性转移淋巴结T-bet mRNA表达强度为(0.118±0.101);在阴性淋巴结中为(0.307±0.121),两者比较,P<0.05。喉癌、舌癌和下咽癌患者阳性颈淋巴结中T-bet蛋白阳性表达率分别为42.11%、25.00%和10.00%;阴性淋巴结组织中分别为65.79%、62.50%和50.00%,P均<0.05。在颈部阳性淋巴结中的T-bet表达阳性率与肿瘤部位、分化程度无关,Ⅲ期鳞癌患者的颈部阳性淋巴结中的T-bet表达阳性率明显高于Ⅳ期患者。三种鳞癌患者中,T-bet表达阳性者5年生存状况比阴性者好,P均<0.05。结论 T-bet表达阳性的淋巴结患者的生存期延长;T-bet表达阳性的淋巴结受肿瘤转移侵犯的机会减少;T-bet阳性表达率可反映肿瘤的分子分期。

肾血管性高血压大鼠头端腹外侧延髓一氧化氮合酶表达的变化

采用免疫组织化学方法观察两肾一夹肾血管性高血压大鼠头端腹外侧延髓 (RVLM)神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)表达的变化。肾血管性高血压大鼠RVLM的nNOS表达增加 ,说明高血压时该区NO活性加强。NO的前体L Arg能增强nNOS的表达 ,nNOS抑制剂L NAME则抑制nNOS的表达。各组nNOS表达变化的特点在高血压 4w和 7w的动物相同。同一组中高血压晚期 (7w)的nNOS表达和早期 (4w)比较略有增加 ,但无统计学差异。

肾性高血压大鼠延髓尾端神经元型一氧化氮合酶表达的改变

实验采用免疫组织化学方法观察两肾一夹肾性高血压大鼠延髓尾端两个区域 (延髓腹面降压区和尾端加压区 )内神经元型一氧化氮合酶 (neuronalnitricoxidesynthase,nNOS)表达的变化。肾性高血压大鼠延髓尾端这两个区域的nNOS的表达均增加 ,说明高血压时L Arg NO通路活性增强。NO的前体L Arg能增强nNOS的表达 ,nNOS抑制剂L NAME则降低nNOS的表达。以上两个区域nNOS表达变化的特点在肾性高血压 4周和 7周的动物相同 ,肾性高血压 7周的nNOS表达和 4周比较 。

转录因子T-bet在变应性鼻炎患者鼻咽相关淋巴组织中的表达特征和意义

目的:探讨T-bet在变应性鼻炎(AR)和非变应性鼻炎(NAR)2组人群的鼻咽相关淋巴组s织(NALT)中的表达特征和意义。方法:分别用免疫组织化学单染色法检测AR患者和NAR人群扁桃体、腺样体和鼻黏膜中的T-bet阳性表达,用免疫组织化学双染色法检测CD4/T-bet表达。结果:在AR组扁桃体、腺样体和鼻黏膜组织中T-bet表达阳性率高于NAR组,差异有统计学意义(均P<0.05);AR组不同年龄之间扁桃体T-bet表达存在差异(P<0.05),其中主要是成年人T-bet表达低于儿童和青少年;在NAR组扁桃体组织T-bet表达没有年龄之间的差异。2组中扁桃体、腺样体和鼻黏膜中均有CD4和T-bet表达,大多数T-bet阳性表达位于CD4+T细胞中。结论:在AR患者NALT中T-bet的下调表达,与AR患者呼吸道局部黏膜免疫转录因子水平的Th1反应低下有关。NALT中的T-bet表达既与黏膜的变应性炎症有关,又与NALT的功能状态有关。