代谢组学在类风湿关节炎诊断和治疗中的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种致残率高且病因不明的慢性自身免疫性疾病,早诊断、早治疗对于预防该疾病进一步发展至关重要。近年来,代谢组学技术因其具有整体性、动态性、高灵敏度和高通量等优势广泛应用于生命科学的各个领域,该文就代谢组学技术在RA早期诊断、疾病分型、药物疗效预测与评价研究等方面的进展进行综述,以期从代谢调控角度为RA的临床诊断和治疗提供新的思路。

扁蒴藤素对人结直肠癌细胞HCT116和HT29增殖、迁移和细胞周期的影响及作用机制研究

目的探讨扁蒴藤素对人结直肠癌HCT116细胞和HT29细胞增殖、迁移和细胞周期的影响,并初步探索潜在的分子机制。方法采用噻唑蓝(MTT)实验于不同时点分别检测不同浓度扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞存活率的影响;采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)实验分别检测不同浓度扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞增殖能力的影响;采用Transwell实验观察不同浓度扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞迁移能力的影响;采用流式细胞术检测扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞周期的影响;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测扁蒴藤素对HCT116细胞与HT29细胞周期相关蛋白cyclin E1、CDK2、p53、p21、p27表达和PI3K/Akt/mTOR信号转导通路相关蛋白表达的影响。结果MTT实验结果显示,经不同浓度扁蒴藤素分别处理12、24、36、48、60 h后,HCT116细胞和HT29细胞的存活率均较对照细胞降低,且呈时间和浓度依赖性。EdU实验结果显示,经0.5、1、2μmol/L扁蒴藤素处理24 h后,HCT116细胞中阳性细胞率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);经1、2、4μmol/L扁蒴藤素处理24 h后,HT29细胞中阳性细胞率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。Transwell实验结果显示,加入0.5、1、2μmol/L扁蒴藤素作用24 h后,HCT116细胞穿透小室底膜的数量变少,且细胞迁移率低于对照细胞,差异有统计学意义(P<0.001);加入1、2、4μmol/L扁蒴藤素作用24 h后,HT29细胞穿透小室底膜的数量变少,且细胞迁移率低于对照细胞,差异有统计学意义(P<0.001)。流式细胞术结果显示,扁蒴藤素可诱导HCT116细胞和HT29细胞发生G_(0)/G_(1)期阻滞。Western blot结果显示,与对照细胞比较,HCT116细胞和HT29细胞经扁蒴藤素处理后p53、p21、p27蛋白表达量增加,cyclin E1、CDK2蛋白表达量降低,且p-PI3K、p-Akt、mTOR和p-mTOR蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。结论扁蒴藤素可抑制HCT116细胞和HT29细胞的增殖和迁移,并诱导细胞G_(0)/G_(1)期阻滞,其分子机制可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。