感染坏死性胰腺炎一例诊治分析

通过对1例感染坏死性胰腺炎(INP)患者的诊治过程进行记录与分析,并结合本中心的临床经验及对INP诊疗进展的文献综述,针对外科干预时机及策略进行讨论与总结。总结认为,对于INP的外科干预时机应尽量于4周后进行,而对于外科干预策略的决定应优先选择整体创伤较小的内镜或微创入路(腹腔镜或硬镜)清创,其次是开腹清创;但不应拘束于一种治疗模式,可结合自身条件在充分评估病情后进行升阶梯治疗。整体治疗策略应根据胰腺坏死性感染病灶的位置、累及范围、病程时期、患者一般情况等条件,由MDT团队制定个体化的治疗方案。

经皮置管冲洗引流治疗感染性胰周坏死

目的探讨感染性胰周坏死采用经皮穿刺置管配合冲洗引流治疗的临床疗效。方法2018年1月~2022年6月收治的感染性胰周坏死10例,采用穿刺置管冲洗引流治疗,记录病人引流时间、恢复情况及并发症发生情况。结果9例经穿刺冲洗引流处理后均痊愈,1例穿刺置管冲洗引流治疗失败行开腹清创术后治愈,住院平均冲洗引流时间32天,无并发症发生,治愈后未再复发。结论经皮穿刺逐级置换冲洗引流具有微创、效果明确等特点,可考虑单独用于部分病人感染性胰周坏死的治疗,值得推广。

肝癌细胞仑伐替尼耐药的基因筛选及其通路研究

目的基于CRISPR/Cas9技术筛选肝癌仑伐替尼耐药相关基因并探究其潜在关系。方法应用CRISPR/Cas9 sgRNA全基因组文库技术结合Affymetrix表达谱芯片筛选肝癌对仑伐替尼耐药的相关基因。通过TCGA数据库分析这些基因在肝癌中的表达及预后的关系,最终确定采用THOC2为肝癌仑伐替尼耐药基因并用于后续研究。采用免疫组织化学(immunohistochemical,IHC)染色、Western blotting、RT-PCR检测THOC2在肝癌细胞株(MHCC-97H、MHCC-LM3、SMMC-7721)及仑伐替尼耐药/敏感肝癌组织中的表达情况。通过慢病毒感染构建高表达THOC2的SMMC-7721-THOC2肝癌细胞,采用免疫共沉淀(Co-IP)等技术探讨THOC2介导肝癌仑伐替尼耐药的可能机制。结果发现7个与肝癌仑伐替尼抵抗密切相关的耐药基因,包括THOC2、CTNNB1(β-catenin)、MET(c-Met/HGFR)、HTATIP2、C10orf11、PRDX3、MAST4。TCGA分析提示THOC2在肝癌与癌旁中表达存在统计学差异,且与肝癌临床分期及预后密切相关。IHC染色、Western blotting、RT-PCR检测发现THOC2主要分布于胞核中,其在仑伐替尼耐药组患者中的表达水平高于药物敏感组患者;THOC2在高转移潜能的肝癌细胞株(MHCC-97H、MHCC-LM3)中的表达较在SMMC-7721中更显著;Western blotting、Co-IP进一步表明上调THOC2后Wnt/β-catenin通路下游靶点BAX、cyclinD1和c-myc蛋白水平显著增高,且THOC2与β-catenin存在相互作用关系。结论THOC2基因高表达可能通过Wnt/β-catenin通路参与调控肝癌对仑伐替尼的耐药。

肝癌肉瘤1例报告

1病例资料患者女性,51岁,因“右上腹隐痛3 d”于2016年1月21日入住海南省人民医院。患者于3 d前无明显诱因出现右上腹隐痛,无腹胀腹泻,无畏寒发热,无恶心呕吐。于当地医院医院查腹部彩超提示:右肝前叶占位,考虑原发性肝癌。入院查体:巩膜无黄染,无肝掌和蜘蛛痣。

应用外显子测序对肝癌不同转移潜能的研究

目的应用全基因组外显子测序技术对不同转移潜能的肝细胞癌组织及细胞株进行DNA分析,探讨与肝癌转移潜能相关的突变基因及位点.方法提取不同转移潜能的12例肝细胞癌及其癌旁组织和6株不同转移潜能的肝癌细胞(HCC-LM3、MHCC-97L、MHCC-97H、HepG2、SMCC-7721、PLC-RFP-5)的DNA,行全基因组外显子测序,所得结果进行生物信息学比对分析、筛选出与肝细胞癌转移相关的突变基因及其位点.结果在高、低转移潜能肝癌组织中,高转移潜能组中(≥3例)有UIMC1 (rs3733876C/T)、SEMA3C(rs1527482G/A)、SAMD9(rs10279499G/T)、RECK(rs16932912G/A)、PDLIM4(rs4877 G/T)、LIMK2(rs3747154A/G)、CRIM1 (rs3821169G/T)基因突变与肝癌转移相关.仅存在于高转移潜能肝癌细胞(HCC-LM3、MHCC-97L和MHCC-907H)中与转移相关的有CAPZB(rs79308175C/T)、CSF1R(rs10079250A/G)、HSPA5(rs143920039A/T)、SORBS3(rs2449331T/C,rs3758036C/T)等突变基因及位点;仅在3种低转移潜能细胞中(HepG2、SMCC-7721、PLC-RFP-5)与转移相关的有RASAL3(rs146624357 G/A,rs142945276 C/T)等突变位点;对3株同源的高转移性肝癌细胞(HCC-LM3、MHCC-97L和MHCC-97H)的DNA对比分析后发现,仅出现在HCC-LM3中为EHBP1(rs77403174T/C),仅出现在MHCC-97L和MHCC-97H中的为FAM189B(rs150296362C/T)、SERPINB13(rs144903442G/A)、ARHGEF1(rs2303797C/T)等突变位点.结论通过全基因组外显子测序发现UIMC1(rs3733876C/T)、SEMA3C(rs1527482G/A)、SAMD9 (rs10279499G/T)等突变基因及位点与肝癌转移潜在相关.

HBx不同表达水平对HepG2肝癌细胞增殖、侵袭以及索拉非尼耐药的影响

目的探讨HepG2肝癌细胞不同乙型肝炎病毒X(HBx)表达水平对增殖、侵袭以及索拉非尼耐药的影响。方法肝癌HepG2细胞株感染HBx高表达序列的慢病毒为HBx高表达组,阴性对照组同HBx高表达组,但仅感染空载体。干扰组在HBx高表达组的基础上感染HBx干扰序列病毒,降低HBx表达。干扰对照组同干扰组,但感染的空载体。空白对照组无任何处理。Western印迹检测HBx的蛋白表达。细胞增殖检测试剂盒检测增殖,Transwell侵袭实验检测侵袭能力,检测索拉非尼半抑制浓度(IC50)。结果Western印迹结果显示成功构建各组稳定表达细胞株。HBx高表达组细胞增殖能力优于空白对照组、阴性对照组,干扰组细胞增殖能力低于干扰对照组和HBx高表达组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。空白对照组、阴性对照组、干扰组穿过Matrigel胶的细胞数分别为(46.2±4.1)个、(50.7±5.1)个、(48.2±5.2)个。HBx高表达组穿过Matrigel胶的细胞数(124.2±8.3)个、干扰对照组(117.2±7.5)个,均高于上述三组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。HBx高表达组和干扰对照组细胞IC50分别为(5.36±0.31)μmol/L和(5.48±0.20)μmol/L,高于空白对照组、阴性对照组、干扰组的(4.75±0.22)μmol/L、(4.60±0.14)μmol/L和(3.98±0.03)μmol/L,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论HBx高表达促进HepG2肝癌细胞增殖和侵袭,提高HepG2肝癌细胞对索拉非尼的抵抗能力,抑制细胞凋亡。