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肿瘤靶向性载体的研究与利用──自主性细小病毒趋瘤性的开发
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作者 罗祖玉 林万敏 +1 位作者 郭兰萍 黄青山 《生命科学》 CSCD 1999年第2期72-74,共3页
自主性细小病毒是一类单链DNA病毒,基因组大小约5kb,进入宿主细胞后其基因不整合到细胞染色体中,其中MVM和H—1还具有趋瘤性和抗瘤性。因此;可利用它们作为外源基因的载体,构建成趋向肿瘤细胞的重组病毒。在肿瘤的基因治疗中,重... 自主性细小病毒是一类单链DNA病毒,基因组大小约5kb,进入宿主细胞后其基因不整合到细胞染色体中,其中MVM和H—1还具有趋瘤性和抗瘤性。因此;可利用它们作为外源基因的载体,构建成趋向肿瘤细胞的重组病毒。在肿瘤的基因治疗中,重组自主性细小病毒有其独特的优点。 展开更多
关键词 重组 自主性细小病毒 载体 肿瘤 基因疗法 趋瘤
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细小病毒/人细胞系统检测理化因素致突性的应用前景
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作者 罗祖玉 杨英姿 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1990年第1期53-56,共4页
历史回顾 到目前为止,已有许多系统被用来进行环境致突物的检测,但各系统均有其局限性,本文介绍的是一种80年代发展起来的低剂量环境致突物检测手段——细小病毒/人细胞系统。 环境理化因素的致畸、致突、致癌(以下简称“三致”)是理化... 历史回顾 到目前为止,已有许多系统被用来进行环境致突物的检测,但各系统均有其局限性,本文介绍的是一种80年代发展起来的低剂量环境致突物检测手段——细小病毒/人细胞系统。 环境理化因素的致畸、致突、致癌(以下简称“三致”)是理化因子作用于生物细胞的主要遗传物质——DNA,造成DNA的各种损伤,引起突变、畸变、癌变的表型。 展开更多
关键词 细小病毒 理化因素 细胞系统 理化因子 DNA 三致 致畸 原核生物 易错修复 碱基取代
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细胞因子人MK基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达(简报) 被引量:9
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作者 黄建 林万敏 +1 位作者 罗祖玉 谢毅 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期143-146,共4页
细胞因子Midkine(简称MK)是新发现的一类肝素结合因子家族中的一员.1988年,Kadamatsu等利用差异杂交法在经维甲酸诱导分化的小鼠畸胎瘤细胞株HM-1中首先克隆到小鼠MK基因[1].
关键词 细胞因子MK 肝素结合因子 克隆 表达
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应用PCR技术检测细小病毒H-1DNA在人肝癌与裸鼠正常组织中复制的差异 被引量:1
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作者 黄青山 马承武 +2 位作者 郭兰萍 陈献华 罗祖玉 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期84-87,共4页
应用PCR技术检测细小病毒H-1DNA在人肝癌与裸鼠正常组织中复制的差异黄青山,马承武,郭兰萍,陈献华,罗祖玉(上海复旦大学生理与生物物理学系,上海200433)关键词:自主性细小病毒H-1及MVM,聚合酶链式反应(... 应用PCR技术检测细小病毒H-1DNA在人肝癌与裸鼠正常组织中复制的差异黄青山,马承武,郭兰萍,陈献华,罗祖玉(上海复旦大学生理与生物物理学系,上海200433)关键词:自主性细小病毒H-1及MVM,聚合酶链式反应(PCR),人肝癌模型,抑瘤作用,肿... 展开更多
关键词 肝癌 细小病毒H-1 DNA 聚合酶链反应 复制
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辐射增敏剂增敏活性的分子连接性研究 被引量:1
5
作者 徐素娟 刘学军 +2 位作者 吴强 罗祖玉 吴吉安 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期657-664,共8页
计算42个辐射增敏剂的各阶分子连接性指数mXt及△mXt,并对其中38个非对称性化合物的分子连接性指数与其增敏活性进行定量构效关系(QuantitatireStructureActivityRelationship,... 计算42个辐射增敏剂的各阶分子连接性指数mXt及△mXt,并对其中38个非对称性化合物的分子连接性指数与其增敏活性进行定量构效关系(QuantitatireStructureActivityRelationship,QSAR)的研究,得到相关方程。并分析了影响增敏活性的1gP、ES及σ在一定程度上都可通过分子连接性指数表达出来。对这些增敏剂进行分子对称性的研究,发现对称性会降低分子的极性,进而降低其增敏活性。另外,还发现在这些增敏剂中存在亚类现象,并对各亚类的反应机理进行了探讨。 展开更多
关键词 分子连接性 辐射增敏活性 定量构效关系
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自发转化的人胎肝细胞株对细小病毒H-1感染敏感性的变化 被引量:2
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作者 林万敏 徐磊 +2 位作者 马承武 万山红 罗祖玉 《细胞生物学杂志》 CSCD 1994年第2期69-72,共4页
H-1属自主性细小病毒,对相当多种类的体内外生长的肿瘤细胞和转化细胞有抑制作用。本文报道了人胎肝细胞株HuL-1在其发生自发转化后,对H-1病毒感染的敏感性同时发生了变化的结果。 HuL-1细胞经数年体外培养后其性状发生了明显变化,在0.... H-1属自主性细小病毒,对相当多种类的体内外生长的肿瘤细胞和转化细胞有抑制作用。本文报道了人胎肝细胞株HuL-1在其发生自发转化后,对H-1病毒感染的敏感性同时发生了变化的结果。 HuL-1细胞经数年体外培养后其性状发生了明显变化,在0.3%软琼脂中的集落形成率达20.1%,在裸小鼠体内能形成实体瘤,且瘤块的组织切片显示出癌细胞的特性。与此同时,HuL-1细胞对H-1病毒的感染表现出一定的敏感性。而HuL-1细胞在数年前并不表现出转化细胞的特性,对H-1感染也是不敏感的。结果显示,HuL-1细胞对H-1敏感性的提高与其本身的自发转化是密切相关的。 本文研究了上述敏感性的可能机制。结果表明,受感染细胞存活率的下降,伴随着病毒抗原的产生,也伴随着H-1 DNA复制量的明显增加,以及H-1非结构蛋白NS-1基因的表达。 展开更多
关键词 细胞转化 胎肝细胞 细小病毒 感染
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人肝癌细胞p53基因的表达及其对细小病毒H-1的敏感性
7
作者 郭兰萍 李国栋 +6 位作者 徐红 黄青山 林万敏 凌文海 黄海 罗祖玉 苏兆众 《实验生物学报》 CSCD 1999年第1期22-29,共8页
本文利用单链构象多态性分析,17号染色体短臂等位基因杂合性分析,Northern印迹,免疫沉淀,p53基因第7外显子酶切等技术检测了两个中国人肝癌细胞系SMMC-7721,YY-8103和一个自发转化的人肝细胞系L-02的p53基因结构与表达。实验表明,这三... 本文利用单链构象多态性分析,17号染色体短臂等位基因杂合性分析,Northern印迹,免疫沉淀,p53基因第7外显子酶切等技术检测了两个中国人肝癌细胞系SMMC-7721,YY-8103和一个自发转化的人肝细胞系L-02的p53基因结构与表达。实验表明,这三个细胞系中没有出现17号染色体短臂等位基因杂合性缺失,第4—9外显子也没发生突变,但其mRNA和蛋白表达水平很低。利用MTT比色分析法研究了这三个细胞系和其他已知p53基因背景的八个人肝癌细胞系(QGY-7703、PLC/PRF/5、Huh-7、Hep3B、FOCUS、Tong/ HCC、SK-Hep-1、HepG2)对自主性细小病毒H-1的敏感性。除HepG2细胞外,其他十个细胞系p53基因的结构和/或表达都不正常。经H-1感染(moi=20)后,其敏感性均高于HepG2细胞。本研究初步表明了p53基因结构或表达的不正常可能导致人肝癌或转化细胞对H-1的敏感性的提高。 展开更多
关键词 肝癌 P53基因 基因表达 细小病毒H-1 敏感性
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用PCR技术克隆细小病毒H-1部分非结构蛋白基因
8
作者 黄青山 黄建 +2 位作者 罗祖玉 王顺德 刘为平 《中国病毒学》 CSCD 1995年第4期323-331,共9页
应用PCR技术定向克隆了细小病毒H-1的非结构蛋白(NS)部分基因片段。自行设计并合成了PCR引物△P3和△P4,在两个引物中分别引入两个突变碱基,使扩增后的DNA片段的两端含有限制性核酸内切酶HindⅢ或BamHI... 应用PCR技术定向克隆了细小病毒H-1的非结构蛋白(NS)部分基因片段。自行设计并合成了PCR引物△P3和△P4,在两个引物中分别引入两个突变碱基,使扩增后的DNA片段的两端含有限制性核酸内切酶HindⅢ或BamHI的酶切位点,经双酿切法把该DNA片段重组到pUC118质粒中。对插入片段的DNA序列测定和分析结果证实该片段为H-1NS-1基因序列。以此重组质粒为探针,采用分子杂交的方法,分别测定了H-1及MVMDNA在细胞内的复制水平。这一基因的克隆为制备H-1的质量监测、H-1及MVMNS-1蛋白抑瘤作用机理及其在肿瘤细胞及正常组织中的转录表达等研究奠定了基础。 展开更多
关键词 细小病毒H-1 聚合酶链反应 非结构蛋白基因
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细小病毒H-1对人肝癌移植瘤的抑制及其组织学与组织化学的研究 被引量:5
9
作者 施志仪 马承武 +3 位作者 黄建 林万敏 董荣春 罗祖玉 《实验生物学报》 CSCD 1997年第3期247-259,共13页
本文用人肝癌裸小鼠QGY-9204移植模型为材料,进行了细小病毒H-1抑瘤的组织学、组织化学及分子生物学研究所。
关键词 肝癌 移植瘤 细小病毒H-1 肿瘤抑制
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人肝癌细胞瘤QGY-7703的p53基因及其表达研究 被引量:3
10
作者 王厚义 黄青山 +4 位作者 陈翠微 罗祖玉 谢毅 刘建平 苏兆众 《细胞生物学杂志》 CSCD 1997年第4期169-174,共6页
本文利用等位基因分析,PCR-SSCP,RT-PCR/序列分析,Northern印迹,免疫组织化学,Western印迹,免疫沉淀等方法对人肝癌细胞株QGY-7703的p53基因背景进行了研究,发现17号染色体短臂可能存在等位基因缺失,在p53基因的编码序列上没有发现任何... 本文利用等位基因分析,PCR-SSCP,RT-PCR/序列分析,Northern印迹,免疫组织化学,Western印迹,免疫沉淀等方法对人肝癌细胞株QGY-7703的p53基因背景进行了研究,发现17号染色体短臂可能存在等位基因缺失,在p53基因的编码序列上没有发现任何突变,但发现其mRNA和蛋白表达水平很低,表明在QGY-7703细胞中p53基因的低水平表达可能同细胞的恶性程度有关。 展开更多
关键词 肝癌 细胞株 P53基因 基因表达 肿瘤抑制基因
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细小病毒H-1非结构蛋白NS1在人肝癌细胞内的超显微结构定位
11
作者 施志仪 林万敏 +1 位作者 李健宏 罗祖玉 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第5期529-532,共4页
目的研究细小病毒H-1非结构蛋白NS1对体内人肝癌细胞的抑制作用机制。方法利用免疫胶体金标记电镜技术,在感染细小病毒H-1后不同时间,观察了病毒非结构蛋白NSl在人肝癌裸小鼠QGY-9204移植瘤模型细胞内的超显微结构定位。结果研究表明,... 目的研究细小病毒H-1非结构蛋白NS1对体内人肝癌细胞的抑制作用机制。方法利用免疫胶体金标记电镜技术,在感染细小病毒H-1后不同时间,观察了病毒非结构蛋白NSl在人肝癌裸小鼠QGY-9204移植瘤模型细胞内的超显微结构定位。结果研究表明,在感染后4h,H-1病毒的NSI蛋白主要集中在核仁内;感染后12h,NSl蛋白由核仁内向常染色区转移;感染后24h,常染色区的NSl蛋白逐渐增多并且向核外扩散;感染后72h,核内和胞质内NSl蛋白越来越多,与此同时,细胞核圆缩,核仁消失.H-1 NSl蛋白表达在细胞内的定位过程与H-1DNA复制的定位相一致。用原位杂交研究表明,在感染24h,阳性杂交颗粒仅在少数细胞核内出现,在感染后72h,核内阳性杂交颗粒增多并向核外扩散。结论 NSl从核仁扩散到细胞质,辅证了NS-1蛋白在病毒生活周期和抑制肿瘤细胞生长中起重要作用。 展开更多
关键词 肝肿瘤 细小病毒H-1 非结构蛋白NS1 超显微结构定位
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丙双吗啉对(AT2153)乏氧的人肺腺癌细胞系(SPC-A-1)的辐射增敏活性研究
12
作者 马承武 薛永泉 罗祖玉 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期41-44,共4页
一种属于哌嗪二酮类衍生物的抗癌新药—丙双吗啉(AT_(2153),MST_(-02))是由任云峰等合成的,它对多种肿瘤有显著作用,对小鼠肉瘤S_(37)也有辐射增强作用。本工作利用细胞集落形成技术,研究丙双吗啉对乏氧条件下离体培养的人肺腺癌细胞系(... 一种属于哌嗪二酮类衍生物的抗癌新药—丙双吗啉(AT_(2153),MST_(-02))是由任云峰等合成的,它对多种肿瘤有显著作用,对小鼠肉瘤S_(37)也有辐射增强作用。本工作利用细胞集落形成技术,研究丙双吗啉对乏氧条件下离体培养的人肺腺癌细胞系(SPC-A-1)的辐射增敏效应,在药物浓度为0.1mmol dm^(-3)时,增敏比(SER)为1.22,C_(1.6)值为0.29m mol·dm^(-3)。丙双吗啉是一种具有潜在能力的辐射增敏剂。 展开更多
关键词 丙双吗啉 人肺腺癌细胞 辐射增敏
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哺乳类细胞中易错修复诱导信号的初探
13
作者 苏兆众 罗祖玉 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期39-44,共6页
本研究从两个方面初探哺乳类细胞中易错修复诱导信号的本质:1.诱导信号是否产生于DNA损伤因子直接“击中”细胞中某些靶物质?2.DNA复制的抑制是否诱导信号的必要组成部分?用转染方法,把带有紫外线损伤的外源性DNA导入人和大鼠细胞,能像... 本研究从两个方面初探哺乳类细胞中易错修复诱导信号的本质:1.诱导信号是否产生于DNA损伤因子直接“击中”细胞中某些靶物质?2.DNA复制的抑制是否诱导信号的必要组成部分?用转染方法,把带有紫外线损伤的外源性DNA导入人和大鼠细胞,能像紫外线直接照射细胞一样诱发易错修复功能,而且两种诱导处理有着相似的剂量相应关系和动力学过程。再者,无论导入的DNA在细胞中能否起始复制,都具诱导功能。所以,可以认为,诱导信号来自DNA损伤本身而不是细胞中特定靶物质的损伤;DNA复制的抑制不是诱发易错修复的必要条件。 展开更多
关键词 哺乳类细胞 诱导信号 DNA
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哺乳类细胞中DNA损伤诱导的条件反应、诱导性易错修复功能以及体细胞突变和癌变
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作者 苏兆众 罗祖玉 《国际遗传学杂志》 CAS 1987年第1期17-22,共6页
对DNA损伤修复特别是诱导性易错修复(inducible error-prone repair)机理的研究方兴未艾;主要原因是DNA损伤及其修复同致突变和致癌有直接关系,易错修复造成细胞突变;而体细胞突变又可导致癌变。本文简述哺乳类细胞中由DNA损伤诱导的条... 对DNA损伤修复特别是诱导性易错修复(inducible error-prone repair)机理的研究方兴未艾;主要原因是DNA损伤及其修复同致突变和致癌有直接关系,易错修复造成细胞突变;而体细胞突变又可导致癌变。本文简述哺乳类细胞中由DNA损伤诱导的条件反应,类似细菌SOS修复的诱导性易错功能以及与致突变、致癌的关系。 展开更多
关键词 诱导性 易错修复 条件反应 DNA 染色体畸变 功能 体细胞突变 癌变 损伤诱导
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两种细小病毒MVM宿主细胞的比较研究
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作者 李翠芹 万山红 罗祖玉 《延安大学学报(自然科学版)》 1996年第3期72-74,89,共4页
MVM属自主性细小病毒,对相当多种类的体内外生长的肿瘤细胞和转化细胞有抑制作用。本文对NBK细胞的软琼脂克隆形成率和染色体进行了分析,确认NBK细胞为转化细胞,且对MVM敏感。在此基础上,比较了两种细小病毒MVM宿主... MVM属自主性细小病毒,对相当多种类的体内外生长的肿瘤细胞和转化细胞有抑制作用。本文对NBK细胞的软琼脂克隆形成率和染色体进行了分析,确认NBK细胞为转化细胞,且对MVM敏感。在此基础上,比较了两种细小病毒MVM宿主细胞NBK和A_9的细胞存活率、单位体积培养液中的细胞产量和病毒产量,认为A_9细胞更适合于作为细小病毒MVM的宿主细胞进行病毒的制备和生产。 展开更多
关键词 细小病毒 MVM A9细胞 NBK细胞 宿主细胞 抗癌性
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RESEARCH AND DEVELOPMENT OF CANCER-TARGETING VECTORS: AN EXPLORATION ON ONCOTROPISM AND ONCOSUPPRESSION OF AUTONOMOUS PARVOVIRUSES
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作者 罗祖玉 林万敏 +1 位作者 郭兰萍 黄青山 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2000年第1期46-49,共4页
Autonomous parvoviruses are single-stranded DNA viruses with a genome size of about 5 kb. They are characterized by their oncotropism and oncosuppression to the hosts. After infection the viral genes are not integrate... Autonomous parvoviruses are single-stranded DNA viruses with a genome size of about 5 kb. They are characterized by their oncotropism and oncosuppression to the hosts. After infection the viral genes are not integrated into the chromosome of host cells. Autonomous parvoviruses could be used as potential vectors carrying heterologous therapeutic genes for the construction of recombinant autonomous parvoviruses. The specific advantages of these viral vectors to cancer gene therapy are discussed. 展开更多
关键词 Recombinant autonomous parvovirus VECTOR Gene therapy
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PRELIMINARY COMPARISON OF SENSITIVITY TOWARD PARVO VIRUS H-1 OF HUMAN HEP ATOM A CELLS AND PARAHEPATOMA TISSUE 被引量:1
17
作者 林万敏 崔衍贞 +2 位作者 俞伯根 罗祖玉 林芷英 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1989年第3期18-23,共6页
Preliminary observations on the result of infection by parvovirus of primary cultured cells of human hepatoma and parahepatoma tissue were reported. Human hepatoma and parahepatoma tissue were obtained by the culture ... Preliminary observations on the result of infection by parvovirus of primary cultured cells of human hepatoma and parahepatoma tissue were reported. Human hepatoma and parahepatoma tissue were obtained by the culture method of tissue fragment plating. It was observed that their respective sensitivity to parvovirus H-1 was different. H-1 had inhibitory effect on epithelial cells of hepatoma tissue but without any significant effect on fibroblasts simultaneously, H-l had no effect on epithelial cells and fibroblasts of parahepatoma tissue. Further investigation of the relationship between parvovirus and hepatoma would be helpful not only in elucidating the mechanism of carcinogenesis and its suppression but also in the search of new approach for the treatment of hepatoma. 展开更多
关键词 PRELIMINARY COMPARISON OF SENSITIVITY TOWARD PARVO VIRUS H-1 OF HUMAN HEP ATOM A CELLS AND PARAHEPATOMA TISSUE
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EXPERIMENTAL STUDY ON THE CYTOCIDAL EFFECT OF AT-1840 AND PARVOVIRUS H-1 AGAINST STOMACH CANCER CELLS
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作者 吴裕炘 吴云林 +6 位作者 余春仙 萧树东 刘炳荣 江绍基 苏兆众 罗祖玉 张素胤 《Medical Bulletin of Shanghai Jiaotong University》 CAS 1990年第1期37-46,共10页
We had given evidences of cytocidal effect in vitro of either parvovirus H-I(PV H-1) or AT-1840 (lycobetaine) on gastric cancer cells. They act on different phase of the cell cycle of the gastric cancer cells, with PV... We had given evidences of cytocidal effect in vitro of either parvovirus H-I(PV H-1) or AT-1840 (lycobetaine) on gastric cancer cells. They act on different phase of the cell cycle of the gastric cancer cells, with PV H-1 on the late stage of S phase and AT-1840 on M phase. Combined use of these drugs gives better killing effect than the individual drug alone. In gastric cancer-bearing nude mice (ascites and solid tumor forms), both AT-1840 and PV H-1 increased the survival peroids and decreased the size of solid tumors. Depsite these are the experimental study which may not to be the same in human being. However, the study has layed down a solid foundation for our further exploration of these two substances as anti-gastric cancer drugs in the future. 展开更多
关键词 PARVOVIRUS H-1 (PV H-1) lycobetaine (AT-1840) cytocidal EFFECT dye EXCLUSION test flow CYTOMETRY cancer-bearing NUDE mice
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细小病毒核苷酸序列同源性的比较——对抗癌作用的一点启示 被引量:2
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作者 罗祖玉 王顺德 +1 位作者 王健 刘为平 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期399-404,共6页
细小病毒(Parvovirus,PV)在离体培养系统中有抑瘤效应。使用IBM/PC机或Micro Vax II机,对啮齿动物四种PV(H-1,H-3,MVM,KRV)DNA的3′端片段之间及与AAV复制原点片段,H-1与MVM DNA,MVM与MVM_iDNA,H-1与B_(10)-Au DNA序列作了同源性比较。... 细小病毒(Parvovirus,PV)在离体培养系统中有抑瘤效应。使用IBM/PC机或Micro Vax II机,对啮齿动物四种PV(H-1,H-3,MVM,KRV)DNA的3′端片段之间及与AAV复制原点片段,H-1与MVM DNA,MVM与MVM_iDNA,H-1与B_(10)-Au DNA序列作了同源性比较。结果表明:啮齿动物四种PV DNA 3′端的同源程度颇高,达96%以上;H-1与MVM DNA的同源性为77%;而H-与B_(19)-Au DNA的同源性仅39%。这显示H-1与MVM DNA可能包含同样的抗瘤片段,而B_(19) DNA则不合此片段。AAV与啮齿动物四种PV的任一种DNA序列的同源程度仅有28%~29%,这表明虽然它们都有抑瘤活性,但机理可能并不相同。 展开更多
关键词 病毒 核苷酸 抑瘤机理 同源性
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细小病毒抑瘤活性研究的历史与现状 被引量:2
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作者 罗祖玉 马承武 +2 位作者 陈涛生 郭兰萍 林万敏 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期85-92,共8页
细小病毒(PV)(包括自主性的及依存性的)有抗肿瘤活性.本文在介绍PV的结构及理化性质、病毒复制后,阐述了PV与肿瘤的关系,即其对自发肿瘤及诱发肿瘤的抑制作用,特别是本实验室多年来利用离体细胞培养系统广泛地测试了PVH-1及MVM抑制转化... 细小病毒(PV)(包括自主性的及依存性的)有抗肿瘤活性.本文在介绍PV的结构及理化性质、病毒复制后,阐述了PV与肿瘤的关系,即其对自发肿瘤及诱发肿瘤的抑制作用,特别是本实验室多年来利用离体细胞培养系统广泛地测试了PVH-1及MVM抑制转化细胞及癌细胞活性得到的结果,对33株细咆及人癌(肝、肾)与癌周组织原代培养的细胞测得的抑瘤效应亦列于表内. PV抑瘤机理仍在分子水平上研讨之中.文中强调了非结构蛋白NS/rep的细胞毒作用,它可部分地阐明PV的抗肿瘤机制. 展开更多
关键词 细小病毒 抗肿瘤活性 DNA复制
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