结直肠癌患者血浆lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p水平与临床特征及术后复发的关系

目的探讨血浆长链非编码RNA-FER1样家族成员4(lncRNA-FER1L4)、微小RNA-18a-5p(miR-18a-5p)水平与结直肠癌患者临床特征及术后复发的关系。方法选取2019年6月至2022年6月在江苏省宿迁市第一人民医院住院并进行手术的110例结直肠癌患者作为研究对象,根据结直肠癌是否复发分为复发组和无复发组。收集患者临床特征资料,检测血浆lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p水平,进行生物信息学分析。采用Pearson相关分析结直肠癌术后复发患者血浆lncRNA-FER1L4水平与miR-18a-5p水平的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p对结直肠癌患者术后复发的预测价值。采用多因素Logistic回归分析结直肠癌患者术后复发的危险因素。结果低肿瘤分化、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移和脉管浸润患者血浆lncRNA-FER1L4水平低于中高肿瘤分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移和无脉管浸润患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。低肿瘤分化、TNM分期为Ⅲ期有淋巴结转移和脉管浸润患者血浆miR-18a-5p水平高于中高肿瘤分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移和无脉管浸润患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。无复发组有72例患者,复发组有38例患者。复发组血浆lncRNA-FER1L4水平低于无复发组,miR-18a-5p水平高于无复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。生物信息学分析结果显示,lncRNA-FER1L4与miR-18a-5p可能存在靶向关系。Pearson相关分析结果显示,结直肠癌术后复发患者血浆lncRNA-FER1L4水平和miR-18a-5p水平呈负相关(r=-0.488,P=0.002)。ROC曲线分析结果显示,lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p单独及2项指标联合预测结直肠癌患者术后复发的曲线下面积(AUC)分别为0.899、0.843、0.944。2项指标联合预测的AUC高于lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p单独预测的AUC(Z=2.859、3.311,P<0.05)。复发组低肿瘤分化、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移和脉管浸润的患者比例高于无复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血浆miR-18a-5p水平升高、lncRNA-FER1L4水平降低是结直肠癌患者术后复发的危险因素(P<0.05)。结论结直肠癌患者血浆lncRNA-FER1L4水平降低,miR-18a-5p水平升高,二者与结直肠癌患者临床特征和术后复发有关,且可作为结直肠癌患者术后复发的辅助预测指标。

pcDNA3.1(+)-ABCG2真核表达载体的构建与鉴定

目的构建人的ABCG2基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-ABCG2,并在ABCG2阴性SMMC7721肝癌细胞中表达。方法以人的癌细胞为材料提取RNA,经反转录得到cDNA,利用PCR方法,根据人ABCG2基因62526032(NM_004827.2)序列信息设计引物,扩增ABCG2基因的CDS序列,将其克隆到pcDNA3.1+表达载体中。酶切及测序鉴定重组质粒正确后,脂质体介导转染至ABCG2阴性SMMC7721肝癌细胞中。采用Western blot法检测外源基因ABCG2的表达。结果PCR扩增片段大小与理论片段大小相符,酶切大小与理论大小相符,阳性的克隆测序鉴定正确,表明人ABCG2基因克隆及真核表达载体pcDNA3.1(+)-ABCG2构建成功。在蛋白水平,转染72h后的细胞中外源基因ABCG2表达均明显增加。结论成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-ABCG2,并在ABCG2阴性SMMC7721肝癌细胞中进行了表达。

siRNA干扰ABCG2影响肝癌细胞的耐药及侵袭能力

目的探讨ABCG2在肝癌细胞的耐药及转移侵袭过程中的作用。方法 MTT方法检测siRNA干扰前后三种肝癌细胞MHCC97-L、MHCC97-H、SMMC-7721对多柔比星的药物敏感性;划痕与Transwell实验证实这几种肝癌细胞在siRNA干扰前后的转移、侵袭能力;western-blot、PCR实验证实siRNA转染效率。结果 SMMC-7721、MHCC97-L、MHCC97-H细胞内ABCG2水平呈逐渐上升趋势,对多柔比星的耐受程度也同样逐步上升,同时侵袭能力逐渐增强;siRNA干扰后,MHCC97-L、MHCC97-H两株细胞中ABCG2水平明显降低,对多柔比星敏感性明显增强,侵袭能力明显下降。结论 ABCG2不仅在肝癌细胞的耐药过程中起到重要作用,同时还影响肝癌细胞的转移侵袭能力,靶向干扰ABCG2水平增加了化疗药物敏感性并降低肝癌细胞的转移侵袭能力。

腹腔镜直肠癌根治术低位结扎IMA联合NOSE临床效果分析

目的:探讨腹腔镜直肠癌根治术中低位结扎肠系膜下动脉(IMA)联合自然腔道标本提取(NOSE)的临床效果。方法:回顾性分析2017年6月-2018年11月我院57例直肠癌患者临床资料,其中行低位结扎保留左结肠动脉(低位结扎组)19例,NOSE+低位结扎保留左结肠动脉18例(NOSE组),高位结扎不保留左结肠动脉20例(高位结扎组)。比较3组患者术中及术后恢复情况。结果:3组患者一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。3组手术时间、术后疼痛评分、住院时间、预防性造瘘比率、切口感染发生比率比较差异有统计学意义(P<0.05);术中出血量、淋巴结转移数目、第3站淋巴结转移数目比较差异无统计学意义(P>0.05)。NOSE组术后排气时间最短、术后疼痛评分最低、住院时间最短(P<0.05)。结论:腹腔镜直肠癌根治术低位结扎IMA联合NOSE可以减少吻合口漏发生概率,淋巴清扫效果与高位结扎相当,术后疼痛更轻,有临床推广价值。

腹腔镜疝囊高位结扎术治疗小儿腹股沟斜疝临床效果

目的:分析腹腔镜疝囊高位结扎术治疗小儿腹股沟斜疝的临床效果。方法:采用腹腔镜疝囊高位结扎术(腹腔镜组)87例,传统小切口疝囊高位结扎术(传统手术组)185例,比较两组平均手术时间、下床活动时间、住院时间、住院费用、术后疼痛评分以及术后阴囊血清肿发生率。结果:腹腔镜组平均手术时间25.00±13.66 min,下床活动时间5.14±3.73 d,分别少于传统手术组的33.29±29.97min和18.52±7.83 d,差异均有统计学意义(P<0.05);腹腔镜组住院费用4 554.39±1 048.67元,高于传统手术组的3 422.45±1 634.64元,差异有统计学意义(P<0.05);两组住院天数比较,差异无统计学意义(P>0.05);腹腔镜组术后VAS疼痛评分2.82±1.49分,低于传统手术组的4.73 ±1.76分,差异具有统计学意义(P<0.05);腹腔镜组无阴囊血清肿发生,而传统手术组有13例(7.03%)发生阴囊血清肿,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:与传统小切口疝囊高位结扎术相比,腹腔镜疝囊高位结扎术手术创伤小,手术时间短,术后疼痛轻,术后并发症少,有利于发现对侧隐匿疝,具有有良好的应用前景。

改良经腹腹膜前修补术治疗腹股沟斜疝的临床研究

目的:分析改良经腹腹膜前修补术(transabdominal preperitoneal,TAPP)术对成人腹股沟斜疝治疗的有效性和安全性。方法:回顾分析84例腹股沟斜疝患者的临床资料,其中观察组40例采用改良TAPP术,对照组54例采用传统TAPP术。比较两组间手术时间、中转手术、手术副损伤、术后第1日疼痛评分、术后静脉止痛药使用时间、术后住院时间、术后并发症发生情况。结果:观察组手术时间单侧为57.4±18.27 min,双侧为85.9±25.66 min,分别短于对照组的71.55±21.88 min和144.30±37.83 min,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组均未发生手术副损伤、中转手术和术后复发,两组间术后第1天疼痛数字评分、术后静脉止痛药使用时间、术后住院时间及术后并发症发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:改良TAPP术治疗成人腹股沟斜疝缩短了手术时间,其手术疗效及并发症发生风险与传统TAPP术相当,适合临床推广。